關于脂肪干細胞油紅O和臺盼藍復合染色介紹
用 0.5%油紅O,對成脂誘導后的各組樣本進行染色。具體操作方法是:先用D-hanks將樣本細胞沖洗充分,然后加入油紅稀釋染色10~15 min,(油紅O 稀釋液配制方法:0.5%飽和油紅O 原液按3:2(油紅O:蒸餾水)加入蒸餾水,然后過濾,待用),接下來用75%的乙醇溶液將樣本分化至間質清晰,然后蒸餾水沖,最后再用臺盼藍對脂質以外的細胞核部分進行復染,并于100 倍鏡下觀察拍照。以每組樣本隨機選取5~10 視野進行拍照觀察以考察共培養方法的成脂誘導分化效果。......閱讀全文
關于脂肪干細胞油紅-O-和臺盼藍復合染色介紹
用 0.5%油紅O,對成脂誘導后的各組樣本進行染色。具體操作方法是:先用D-hanks將樣本細胞沖洗充分,然后加入油紅稀釋染色10~15 min,(油紅O 稀釋液配制方法:0.5%飽和油紅O 原液按3:2(油紅O:蒸餾水)加入蒸餾水,然后過濾,待用),接下來用75%的乙醇溶液將樣本分化至間質清晰
臺盼藍染色法
材料: ? ? ?1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管; 2. 試劑:0.4%臺盼藍染液; 3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g; 4. 生理鹽水:100ml; 操作步驟: 1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養的貼
臺盼藍染色法
材料:1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管;2. 試劑:0.4%臺盼藍染液;3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g;4. 生理鹽水:100ml;操作步驟:1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養的貼壁細胞;3. 再加入適量H
【實驗技巧】臺盼藍染色
臺盼藍是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。機理 正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,
脂質染色實驗_油紅-O-染色
實驗材料冰凍切片試劑、試劑盒油紅 O乙醇二甲苯蒸餾水甘油明膠蘇丹 III儀器、耗材彎鉤玻璃棒5 ml 染色缸載玻片插板實驗步驟油紅 O-乙醇染色液:油紅 O(oil red O,上海試劑三廠)2.5 g,70% 乙醇 500 ml,混合后間隔搖動多次,待 24 h 形成飽和液,即可使用。置室溫中可保
活性染料-臺盼藍染色的原理和步驟
在高中生物中,用血細胞計數板對酵母菌的計數不能專門計數活細胞,但也有染色試劑專門染色活細胞的,結合計數就可以知道活細胞的數目,如臺盼藍就是一種細胞活性染料。 臺盼藍是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。分子式:C34H24N6O14S4Na4。 一、臺盼藍染色的原理
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(二)
在下面的小視頻中,臺盼藍染料被緩緩加入在室溫培養了168小時的Jurkat細胞。大家可以清楚地看到部分細胞被染成藍色后迅速膨脹和破裂,染色隨即變淺,細胞失去形態變成“氣球“。整個過程僅幾秒鐘。?有視頻為證,這些“氣球“狀物體就是死細胞的殘骸。但當我們在顯微鏡下計數時,這些“氣球”由于顏色太淺通常不會
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(一)
臺盼藍 (Trypan Blue) 染色法是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不被染色;而死細胞的胞膜不完整,通透性增加,可使臺盼藍滲入將細胞染成藍色。因此,借助臺盼藍染色可以簡單、快速地區分活細胞和死細胞。想當年小編還是初入實驗室的
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(三)
臺盼藍濃度不同的臺盼藍濃度對細胞染色會有不同影響嗎?Nexcelom的科學家們將同一Jurkat細胞樣本與0.4%,0.2%,0.1%,0.05%和0.025%的臺盼藍以1:1比例混合,以下是部分濃度染色后的細胞圖片:?下面的直方圖統計了不同濃度臺盼藍檢測到的死細胞(較深著色)和“氣球”狀細胞的濃度
細胞凋亡的形態:生化性質實驗——臺盼藍染色
實驗方法原理實驗材料細胞試劑、試劑盒染料混合物:0.01%臺盼藍l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙錠所有試劑都在PBS中制備約5×105?5×106細胞 ml的細胞懸浮液在完全的RMPI 1640培養基儀器、耗材12 mm×75 mm的玻璃試管顯微鏡載玻片和2
臺盼藍(trypan-blue)排斥實驗
實驗方法原理臺盼藍染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。是最常用的檢測細胞活率的方法。實驗材料細胞試劑、試劑盒臺盼藍生理鹽水儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟1. ?將待染色細胞稀釋至所需濃度。(方法及
臺盼藍(trypan-blue)排斥實驗
?實驗方法原理 臺盼藍染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。是最常用的檢測細胞活率的方法。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 臺盼藍生理鹽水儀器、耗材 顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟 1. ?將待染色細胞稀釋至所需濃
細胞培養細胞計數時為什么要用臺盼藍染色?
參加臺盼藍后,活細胞不上色,臺盼藍上色的細胞呈深藍色,是不健康或已逝世的細胞,不能計數。
如何解決臺盼藍染色PBMCs進行細胞計數的問題?
“為什么很難用臺盼藍染色劑來計數PBMC!有大的,小的,成團的……;你能告訴我怎么在未染色的細胞中挑出有核細胞?”小編經常被問到各種各樣關于如何計數PBMC的問題,今天就借此機會跟大家分享一下。?首先,了解下人類PBMCs的組成? ? ? 外周血單核細胞(Peripheral blood monoc
細胞活性檢測臺盼藍細胞計數
臺盼藍(Trypan Blue)計數法臺盼藍(BI,貨號:03-102-1B)是一種藍色細胞活性染料,無法通過結構完整的細胞膜進入細胞內部;但細胞死后,喪失細胞膜穩定性,臺盼藍會進入細胞將細胞染成藍色,因此在細胞實驗中,常規地搭配自動細胞計數儀或血球計數板,應用于分辨活細胞和死細胞、及檢測細胞膜的完
間質干細胞成脂和成骨誘導分化
成骨和成脂誘導是鑒定干細胞的一種重要的方法,也是zui常用、報道見得zui多的方法。成骨zui常用的染色方法是茜素紅染色(堿性磷酸酶),成脂誘導zui常用是Oil Red O (油紅O)染色法。下面介紹一下這兩種染色方法的原理和步驟。成骨誘導分化茜素紅染色方法和原理:茜素紅又名茜素磺酸鈉,茜素S,茜
手把手教您給細胞染色
細胞凋亡、細胞計數都會用到細胞染色今天我們就聊聊:新手入門如何輕松搞定細胞染色,給你的細胞一個精致瑞麗的妝容?細胞骨架的熒光染色臺 盼 藍 染 色臺盼藍染色是細胞培養常見的實驗,用于細胞計數,檢測細胞活性。健康的正常細胞能夠排斥臺盼藍,而死亡的細胞,膜的完整性喪失,通透性增加,細胞可被臺盼藍染成藍色
關于脂肪干細胞的分離和培養介紹
將脂肪組織沖凈,稱重后消化。當消化完成后,棄掉上層未消化的脂肪組織,將下層的細胞懸液以1500 r/min(375g),離心10 min 后棄上清,得到離心管底部的脂肪干細胞團,將其重懸,密度調整到1×105mL-1,然后接種在培養面積為25 cm2 的細胞培養瓶中。 當干細胞長滿培養瓶后按一
脂肪干細胞的Hoechst/PI-死活染色介紹
棄掉舊培養基,用D-Hanks 沖洗除去殘留培養基然后向每個Transwell 孔中加入質量濃度為1 mg/mL 的Hoechst 33342 大約10 μL,使其終質量濃度為10 μg/mL,37℃下避光反應10 min。待Hoechst 染色完成后,用D-Hanks 沖洗除凈殘余的Hoech
細胞計數及活力測定實驗——臺盼蘭染色法
實驗方法原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。?在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損
錐蟲藍的作用機理
正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中最常用的死細胞
錐蟲藍染色劑的染色原理
正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中最常用的死細胞
活細胞與死細胞的差異性
細胞膜通透性的差異 活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加,常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。臺盼藍,又稱錐藍,是一種陰離子型染料,不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色,而活細胞
關于脂肪干細胞的流式檢測介紹
通過酶消化法將細胞收集到離心管中,細胞懸液調整密度為1×105 mL-1,800r/min(120g),離心5 min,棄掉上清,用4℃的冷D-Hanks 沖洗重懸細胞,再次將細胞懸液以800 r/min,離心5 min,之后棄去上清。然后用D-Hanks 將細胞重懸至1 mL,加入抗體5~10
間充質干細胞(MSC)如何培養與鑒定
相比于胚胎干細胞或神經干細胞,MSC具有易獲取、易體外培養、傳代穩定性、低免疫原性等優勢,在體外經過多次傳代后仍具有多向分化和自我復制的潛能,且MSCs多來自于成年的組織,研究過程的道德和倫理學問題較小。MSC的大小與形狀具有異質性,即不同種屬或不同組織的MSC具有不同的生長形態,例如三極形、長梭形
鑒別活細胞
染色法分化學染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括:死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死
目前細胞計數的常用方法
Countstar自動細胞計數儀技術特點:1.寬泛的樣本檢測范圍:測量濃度范圍:1×104—3×107/ml;直徑范圍:5-180μm,可檢測各種傳代細胞及原代細胞,干細胞,藻類,浮游生物,酵母細胞,白細胞等。2.經濟節約的配套耗材成本:每個樣品測量盤可檢測5個樣品,提供實驗結果的平行性及可重復性檢
細胞染色方法歸納
Hoechst染色hoechst可以穿過活細胞膜與細胞核結合 (主要為凋亡活細胞)在紫外光下將核染為藍色. Hoechst染細胞核會影響共聚焦顯微鏡對該樣本其他熒光的觀察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258兩種 ?hoechsts33258,hoechs
關于脂肪干細胞的基本信息介紹
脂肪組織在人體內儲量豐富,通過抽脂從中獲得的大量脂肪干細胞(ADSCs),有自我更新增殖及多向分化潛能,可向脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞、成骨細胞、神經細胞、神經膠質細胞及胰島細胞分化,而且可分泌多種促血管生成因子和抗凋亡因子而抗炎、抗氧化,可抵抗氧自由基的損傷,有望成為修復受損的組織和器官的干細
關于脂肪干細胞共性培養的分析介紹
為脂肪細胞與脂肪干細胞經過20d 共培養后脂肪干細胞的Hoechst/PI 死活染色結果。Hoechst 染料對活的細胞具有特異性染色的特點,PI 則對死細胞特異性染色。從中可以看到,兩組中的細胞均呈明亮的藍色,說明細胞的活性很好。基本上看不到PI 染成紅色的死細胞的存在。表明,本實驗中,經過共