免疫反應的操作步驟
1、將膜用TBS從下向上浸濕后,移至含有封閉液的平皿中,室溫下脫色搖床上搖動封閉1h。2、將一抗用TBST稀釋至適當濃度(在1.5ml離心管中);撕下適當大小的一塊兒保鮮膜鋪于實驗臺面上,四角用水浸濕以使保鮮膜保持平整;將抗體溶液加到保鮮膜上;從封閉液中取出膜,用濾紙吸去殘留液后,將膜蛋白面朝下放于抗體液面上,掀動膜四角以趕出殘留氣泡;室溫下孵育1~2h后,用TBST在室溫下脫色搖床上洗兩次,每次10min;再用TBS洗一次,10min。3、同上方法準備二抗稀釋液并與膜接觸,重復步驟(2)中最后一步,進行化學發光反應。......閱讀全文
免疫反應的操作步驟
1、將膜用TBS從下向上浸濕后,移至含有封閉液的平皿中,室溫下脫色搖床上搖動封閉1h。2、將一抗用TBST稀釋至適當濃度(在1.5ml離心管中);撕下適當大小的一塊兒保鮮膜鋪于實驗臺面上,四角用水浸濕以使保鮮膜保持平整;將抗體溶液加到保鮮膜上;從封閉液中取出膜,用濾紙吸去殘留液后,將膜蛋白面朝下放于
免疫反應的操作步驟
1、將膜用TBS從下向上浸濕后,移至含有封閉液的平皿中,室溫下脫色搖床上搖動封閉1h。2、將一抗用TBST稀釋至適當濃度(在1.5ml離心管中);撕下適當大小的一塊兒保鮮膜鋪于實驗臺面上,四角用水浸濕以使保鮮膜保持平整;將抗體溶液加到保鮮膜上;從封閉液中取出膜,用濾紙吸去殘留液后,將膜蛋白面朝下放于
免疫反應的操作步驟
1、將膜用TBS從下向上浸濕后,移至含有封閉液的平皿中,室溫下脫色搖床上搖動封閉1h。2、將一抗用TBST稀釋至適當濃度(在1.5ml離心管中);撕下適當大小的一塊兒保鮮膜鋪于實驗臺面上,四角用水浸濕以使保鮮膜保持平整;將抗體溶液加到保鮮膜上;從封閉液中取出膜,用濾紙吸去殘留液后,將膜蛋白面朝下放于
免疫酶技術的操作步驟
(1) 用微量移液器分別加待檢血清、陽性對照、陰性對照各100μl于1、2、3孔中,370C水浴箱溫育30min。(2) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干。(3) 每孔加入酶結合物2滴,370C水浴箱溫育30min。(4) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干(5) 每孔分別加入顯色A液、B
火箭免疫電泳的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法,選取最小抗原量與最低抗體濃度,在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰,長達2~5cm者為標準。一般抗原用量為0.5~5微克,抗血清用量為5~10微升,稀釋度于1:10~1:200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化(SP法)操作步驟 1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行 2.緩沖液洗 3min/2 次。 3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。 4. 緩沖液洗 5min/
火箭免疫電泳的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法,選取最小抗原量與最低抗體濃度,在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰,長達2~5cm者為標準。一般抗原用量為0.5~5微克,抗血清用量為5~10微升,稀釋度于1:10~1:200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化(SP法)操作步驟1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加
細胞免疫熒光操作步驟
1.細胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定細胞器用預冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化處理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封閉30min;7.加入1%BSA稀釋的一抗,于37℃雜交2h;8.
免疫熒光技術操作步驟
基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少,相對使用標記抗體用量偏大。試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗體溶液:以 0.01mol/L,pH7.4 的 PBS 進行稀釋緩沖甘油:分析純無熒光的甘油
有關樹脂反應釜的操作步驟
樹脂反應釜在生產過程中,應按照嚴格的操作步驟進行。下面小編為大家從12個步驟仔細講解:1、投料前所用的原料應檢驗合格,不合格的原料不允許投料。投料計量應準確,應按工藝技術要求注意投料順序和加料速度,輕拿輕放,防止液體物料四濺或固體粉料飛揚,保持崗位的環境衛生。2、反應釜的裝料量應根據所生產樹脂品種的
小型高壓反應釜的操作步驟
小型高壓反應釜 采用法蘭式組成,使用4、6、8、12根高壓螺栓。? 一、在使用前要把釜蓋上兩個手把裝好(便于擰緊每一根螺栓或用臺鉗固定夾緊),再把釜蓋上配件,閥門,按指向安裝,壓力表安裝等。? 二、然后用專用扳手將每根螺帽按順時針方向擰開,后再把釜蓋取出,一定要輕放好,以防碰壞釜蓋上有壓力表
火箭免疫電泳實驗的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法,選取最小抗原量與最低抗體濃度,在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰,長達2~5cm者為標準。一般抗原用量為0.5~5微克,抗血清用量為5~10微升,稀釋度于1:10~1:200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
非標記抗體免疫電鏡的操作步驟
1.經典法?(1)將被檢病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀釋的特異性免疫?血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min離心90min。(4)吸去上清,將離心管口倒置于濾紙上,吸去殘留液體。(5)沉淀物中加少量H
免疫印跡法實驗的操作步驟
一蛋白質樣品獲得:細菌誘導表達后,可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞,真核細胞加勻漿緩沖液,機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃,13,000r離心15min。取上清液作為樣品。二電泳:制備電泳凝膠,進行SDS-PAGE。三轉移:(半干式轉移)1、電泳結束后將膠條割至合適大小,用轉膜緩沖液平
細胞免疫熒光的詳細操作步驟
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分
細胞免疫熒光的詳細操作步驟
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分
非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1.經典法(1)將被檢病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min離心90min。(4)吸去上清,將離心管口倒置于濾紙上,吸去殘留液體。(5)沉淀物中加少量H2?
免疫印跡法試驗操作步驟
一蛋白質樣品獲得:細菌誘導表達后,可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞,真核細胞加勻漿緩沖液,機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃,13,000r離心15min。取上清液作為樣品。二電泳:制備電泳凝膠,進行SDS-PAGE。三轉移:(半干式轉移)1、電泳結束后將膠條割至合適大小,用轉膜緩沖液平
彩色免疫金銀染色的原理及操作步驟
實驗概要本文介紹了彩色免疫金銀染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步驟。實驗原理彩色免疫金銀染色方法(coloured ? IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基礎上,根據洗彩色照片的顯影原理而發展起來的,即IGSS后,在抗原位點處生成的銀顆粒經鐵氰化鉀與溴化鉀的
彩色免疫金銀染色的原理及操作步驟
實驗概要本文介紹了彩色免疫金銀染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步驟。實驗原理彩色免疫金銀染色方法(coloured ? IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基礎上,根據洗彩色照片的顯影原理而發展起來的,即IGSS后,在抗原位點處生成的銀顆粒經鐵氰化鉀與溴化鉀的
免疫印跡法的操作步驟有哪些
一蛋白質樣品獲得:細菌誘導表達后,可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞,真核細胞加勻漿緩沖液,機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃,13,000r離心15min。取上清液作為樣品。 二電泳:制備電泳凝膠,進行SDS-PAGE。 三轉移:(半干式轉移) 1、電泳結束后將膠條割至合適大小
免疫組化(LP法)操作步驟
1.切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行 2.緩沖液洗3min/2次。 3.為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在Hydrogen Peroxide Block中孵育10-15分鐘。 4.緩沖液洗5min/2次。 5.滴加UltraVBlock,在室溫下
電泳做Western免疫印跡操作步驟
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。1、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠
免疫組化(SP法)操作步驟
免疫組化(SP法)操作步驟1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul
反轉錄聚合酶鏈反應的操作步驟
1、從RNA(或mRNA)反轉錄合成cDNA第一鏈:2、于95℃加熱5~10min,滅活反轉錄酶,使RNA—cDNA雜交體變性,然后迅速冰浴冷卻:3、PCR擴增:方法基本同PCR。cDNA第一鏈合成方法:20ul反應液中含10xPCR擴增緩沖液,2ul;四種dNTP(10 mmol/L)2ul;RN
低溫恒溫反應浴使用準備和操作步驟
低溫恒溫反應浴使用準備和操作步驟:? 1、用保溫軟管把該設備的進、出液口分別與實驗設備的出、進口對應連接好。(保溫軟管是設備所帶配件相關)? 2、打開保溫蓋從水槽口加入水或其它介質,液體必須掩蓋住蒸發器。? 3、接通電源 在連接電源之前要確定安全開關是關閉的。 將電源接頭插入專用的插座上,
微波化學反應器操作使用步驟
微波這種東西,不可謂不熟。它是一種波長極短的電磁波,和無線電波、紅外線、可見光一樣,都屬于電磁波,微波的頻率范圍從300MHz到300KMHz,即波長從1毫米到1米的范圍。微波加熱的原理:微波加熱就是將微波作為一種能源來加以利用,當微波與物質分子相互作用,產生分子極化、取向、摩擦、碰撞、吸收微波能