聯合團隊解析熒光RNA同染料識別和發色機制
華東理工大學藥學院、生物反應器工程國家重點實驗室、光遺傳學與合成生物學交叉學科研究中心教授楊弋、朱麟勇,浙江大學生命科學研究院研究員任艾明課題組聯合,在熒光RNA研究中取得新進展,為進一步理解和探索熒光RNA適配體潛在的通用結構提供了重要線索。相關研究發表于《自然—化學生物學》。熒光RNA是近些年來發展起來的活細胞RNA成像技術。聯合攻關團隊在前期發展了Clivia系列大斯托克斯位移熒光RNA,具有高穩定性、高信噪比、高亮度,是目前唯一可用于活細胞分析的大斯托克斯位移熒光RNA,也是唯一可在活體上對RNA動態進行測量的熒光RNA。為探析Clivia和熒光染料NBSI的識別和發色機制,研究團隊對Clivia-NBSI復合物的三維結構進行了解析。結果顯示,整體結構呈紡錘型,非常緊湊,內環J12中A11、A12和A13與雙螺旋莖區P1通過遠距離相互作用,形成3個連續堆積的三堿基平面。配體結合口袋位于中間位置,配體與結合口袋之間通過完美......閱讀全文
聯合團隊解析熒光RNA同染料識別和發色機制
華東理工大學藥學院、生物反應器工程國家重點實驗室、光遺傳學與合成生物學交叉學科研究中心教授楊弋、朱麟勇,浙江大學生命科學研究院研究員任艾明課題組聯合,在熒光RNA研究中取得新進展,為進一步理解和探索熒光RNA適配體潛在的通用結構提供了重要線索。相關研究發表于《自然—化學生物學》。熒光RNA是近些年來
研究人員合成高性能熒光RNA實現活細胞RNA成像
2019年11月5日,華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室楊弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技術》)雜志上發表了封面學術論文,題為“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
華東理工楊弋教授發文:這種合成方法實現活細胞RNA成像
2019年11月5日,華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室楊弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技術》)雜志上發表了封面學術論文,題為“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
什么是活細胞熒光
沒有聽說過這個術語,不過應該很好猜測,就是用熒光技術標記活細胞,可以是只有活細胞才能吸收的熒光物質,該物質被活細胞吸收后,該活細胞就發出熒光可用于觀測了。而死細胞不吸收就觀測不到熒光,可以區分細胞死活。
活細胞RNA成像技術獲突破
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509263.shtm
研究實現活細胞及線蟲體內DNA和RNA的同步熒光成像
近期,中國科學院合肥物質科學研究院智能機械研究所智能微納器件研究室研究員張忠平和王振洋領導的團隊在生物體核酸結構的同步原位影像分析方面取得新進展,合成了一種具有高效生物膜穿透能力的陽離子碳量子點,實現了對活細胞及線蟲體內DNA和RNA的同步熒光成像。相關研究成果發表在國際化學期刊《德國應用化學》
活細胞RNA檢測-一步輕松實現
一提到RNA的檢測,大家的腦海中可能會立即浮現出:RT-PCR、FISH、Northern blot等。的確,這些都是檢測RNA的經典方法,但它們需要裂解、固定、RNA抽提等,頗為繁瑣。其實,RNA的檢測完全可以更smart。默克密理博最新推出的SmartFlare? RNA“靈光”技術
活細胞間接免疫熒光法
一.實驗器材:1.??器材:40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2.??試劑:單抗隆抗體(單抗)、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、疊氮鈉(NaN3)等二.方法(微量法)1.??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分鐘
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中,它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中,它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強
Nature子刊:首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
生物大分子標記技術是生物分子成像的關鍵。在科學歷史上,人們利用熒光蛋白“點亮”細胞內蛋白質, 實現了生命動態過程中蛋白質分子的可視化。熒光蛋白技術是當代生物科學研究中最重要的研究工具之一;在短短十余年內,其研究即被授予諾貝爾獎。RNA同樣具有獨特的結構、種類繁多的生物學功能以及復雜的時間空間分
日本開發出觀測活細胞RNA的新技術
日本研究人員日前開發出一種人造核酸,它能夠標識擁有特定堿基序列的核酸。借助這樣的人造核酸,研究人員觀測到了活細胞中RNA(核糖核酸)的活動情況。 為探索細胞的機能,人類迄今開發了種類眾多的熒光蛋白質。如果要觀測某一細胞,熒光蛋白質可以和這一細胞內部的分子結合,然后發出熒光信號,從而使人們能
全自動活細胞實時熒光成像系統概述
全自動活細胞實時熒光成像系統是一種用于生物學領域的分析儀器,于2018年12月11日啟用。 1、顯微鏡采用全封閉箱式設計,并可通過機身TFT觸摸屏進行自動進樣,調用預設實驗程序自動進行成像實驗。 2、全自動成像方式,無需任何手動調節即可實現普通明場、斜照明和高襯度浮雕效果PGC成像,并可在熒
我國科學家在RNA成像工具研發方面取得突破性進展
在生物大分子中,核糖核酸(RNA)具有重要的生物學功能,也與人類重大疾病的發生和發展密切相關。人們利用熒光蛋白“點亮”細胞內蛋白質,實現了生命動態過程中蛋白質分子的可視化。與蛋白質相比,大部分種類的RNA結構和功能尚未被鑒定,被稱為基因組中的“暗物質”。科學家們一直試圖發展人工合成的熒光RNA,
國際首次|我國學者實現活細胞RNA標記與無背景成像
華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年合作研究,在熒光RNA及活細胞RNA成像領域獲突破性進展。他們原創的系列高性能熒光RNA,在國際上首次實現了不同種類RNA在動物細胞內的熒光標記與無背景成像。11月5日,該成果以封面論文形式發表于《自然—生物技術》。 熒光蛋白
活細胞熒光染色后細胞形態變圓是什么原因
不固定直接染色,細胞就會變圓,因為染色液的滲透壓和細胞質不一樣可以選擇用CFSE染色后,鋪板。過夜,等細胞重新貼壁后,再用PI染色,你應該是要看雙染的效果,這個比較合適。用熒光顯微鏡觀察的時候可以先觀測拍照再固定,避免甲醇影響了細胞狀態讓它貼的不牢,或者不固定直接拍照,PI染色效果一個小時影響不大。
科學家首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
圖為《自然—生物技術》11月期封面圖片。它顯示了利用熒光RNA可對單細胞中mRNA的翻譯過程進行定量研究。癌細胞中mRNA水平與其編碼蛋白質水平之間存在較低相關性,提示癌細胞的翻譯調控顯著失調,這為癌癥的診療提供一種全新的思路。 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白
在過去的五年中,熒光蛋白在監測體內生物學研究中,起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是zui早被我們應 用的熒光蛋白,但是隨著時間的推移,現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富,包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它們都可以
RNA酶的用途及破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法
RNA酶又名核糖核酸酶,為白色凍干粉末 ,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。RNA酶用途說明:生化研究,測定核酸的結構RNase 保護檢測去除非特異結合的RNA分析RNA 序列水解蛋白樣品中的RNA純化DNA此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許
RNA酶的用途及破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法
RNA酶又名核糖核酸酶,為白色凍干粉末 ,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。RNA酶用途說明:生化研究,測定核酸的結構RNase 保護檢測去除非特異結合的RNA分析RNA 序列水解蛋白樣品中的RNA純化DNA此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許
細胞RNA實時成像或將“成為可能”?!
結合并激活熒光染料的適體熒光 RNA(FR)已用于對豐富的細胞 RNA 種類進行成像。然而,諸如低亮度和具有不同光譜特性的染料 / 適體組合的有限可用性的局限性,限制了這些工具在活的哺乳動物細胞和體內的使用。 2019 年 9 月 23 日,華東理工大學朱麟勇及楊弋共同通訊在 Nature B
活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料抗體血清試劑、試劑盒RPMI1640DPBS洗滌液固定液儀器、耗材玻璃管塑料管離心機顯微鏡實驗步驟1. ?
活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒兔血清第二抗體單克隆抗體FCS-RPMI1640DPBS儀器、耗材玻璃管塑料管離心機熒
富集活細胞
實驗方法原理在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107 個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。實驗材料細胞懸液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
活細胞計數
活細胞計數是培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。 培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
富集活細胞
實驗方法原理在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107?個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。實驗材料細胞懸液D-PBSA試劑、試劑盒Ficoll-Hypaque溶液或其他類似物儀器、耗材離心管或常規容器生長培養基注射器移
活細胞計數
活細胞計數是培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。 培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
富集活細胞
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107 個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。 實驗材料
鑒別活細胞
染色法分化學染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括:死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白(三)
在本次實驗中,ZsGreen和DsRed細胞系在底讀模式都有著相似的檢測限,而且兩者都比AcGFP細胞系的檢測下限低3到4倍。本次實驗一共重復了三次,但是DsRed實驗結果并不是每次都能表現的足夠好。在一次實驗中,它的檢測下限近似于AcGFP,但是在另一次實驗中,它的檢測下限又會很高。我們將這些區別