華東理工楊弋教授發文:這種合成方法實現活細胞RNA成像
2019年11月5日,華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室楊弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技術》)雜志上發表了封面學術論文,題為“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”。該論文報道他們利用系列高性能熒光RNA,實現不同種類RNA在動物細胞內活體的熒光標記與無背景成像。 迄今為止,在自然界尚未發現天然存在的熒光RNA。目前人工合成的少數幾種熒光RNA熒光強度弱,性能不穩定,難以實用。針對這一亟需解決的技術挑戰,楊弋教授等組建了化學生物學與合成生物學聯合攻關團隊,利用全新的分子設計及分子共同定向進化技術,首次獲得了系列高亮、穩定、低背景的熒光RNA。這些熒光RNA分子結構緊湊,特異結合創新染料分子后產生強烈熒光,可呈現藍、綠、黃、橙、紅等不同顏色,與五顏六色的辣椒相似,因......閱讀全文
科學家首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
圖為《自然—生物技術》11月期封面圖片。它顯示了利用熒光RNA可對單細胞中mRNA的翻譯過程進行定量研究。癌細胞中mRNA水平與其編碼蛋白質水平之間存在較低相關性,提示癌細胞的翻譯調控顯著失調,這為癌癥的診療提供一種全新的思路。 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年
Nature子刊:首次實現活細胞RNA標記與無背景成像
生物大分子標記技術是生物分子成像的關鍵。在科學歷史上,人們利用熒光蛋白“點亮”細胞內蛋白質, 實現了生命動態過程中蛋白質分子的可視化。熒光蛋白技術是當代生物科學研究中最重要的研究工具之一;在短短十余年內,其研究即被授予諾貝爾獎。RNA同樣具有獨特的結構、種類繁多的生物學功能以及復雜的時間空間分
國際首次|我國學者實現活細胞RNA標記與無背景成像
華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年合作研究,在熒光RNA及活細胞RNA成像領域獲突破性進展。他們原創的系列高性能熒光RNA,在國際上首次實現了不同種類RNA在動物細胞內的熒光標記與無背景成像。11月5日,該成果以封面論文形式發表于《自然—生物技術》。 熒光蛋白
無標記近紅外二區熒光成像用于慢性肝臟疾病無創監測
NIR-II應用|無標記近紅外二區熒光成像用于慢性肝臟疾病無創監測慢性肝臟疾病以及隨之帶來的肝纖維化是普遍且日益嚴重的公共健康問題。非酒精性脂肪性肝病(NAFLD, Non-alcoholic fatty liver disease)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致的肝細胞內脂肪過度沉積
腫瘤細胞的標記及活體熒光成像
摘要 以綠色熒光蛋白( GFP) 作為標記基因轉入人類肺癌細胞系(ASTC2a21) , 經800 mg/ L G418 篩選, 獲得5 株高表達細胞系. 利用流式細胞儀對GFP 表達的穩定性進行了初步研究, 結果表明本實驗中有些細胞株間GFP 表達穩定性有顯著差異( P < 0101) . 將穩定
分子間相互作用分析:熒光標記VS無標記
同無標記技術相比,利用熒光技術檢測分子間相互作用的實驗成本較低,例如熒光共振能量轉移和凝膠遷移實驗,無需昂貴的儀器便可完成結合分析。然而,基于熒光標記的檢測技術也存在自己的局限性,像凝膠遷移實驗就只能用來檢測蛋白和核酸間的相互作用。那么在具體的實驗中,研究人員該如何選擇合適的檢測技術呢?不要著急,下
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對...
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對其進行成像分析簡介基于細胞成像的分析技術一般需要使用熒光染料進行標記,一些熒光標記可能對活細胞具有毒性或者只能用于固定過的細胞進行染色。無標記細胞分析技術使得研究者既無需耗時耗力的染色流程也無需擔心染料對正常細胞活力的影響,就可以計算出細胞數目和細胞匯
植物熒光成像儀——熒光成像簡介
熒光是自然界常見的一種發光現象。熒光是光子與分子的相互作用產生的,這種相互過程可以通過雅布隆斯基(Jablonslc)分子能級圖描述:大多數分子在常態下,是處于基態的最低振動能級So,當受到能量(光能、電能、化學能等等)激發后,原子核周圍的電子從基態能級So躍遷到能量較高的激發態(第一或第二激發
植物熒光成像儀——熒光成像原理
熒光是自然界常見的一種發光現象。熒光是光子與分子的相互作用產生的,這種相互過程可以通過雅布隆斯基(Jablonslc)分子能級圖描述:大多數分子在常態下,是處于基態的最低振動能級So,當受到能量(光能、電能、化學能等等)激發后,原子核周圍的電子從基態能級So躍遷到能量較高的激發態(第一或第二激發
新研究“點亮”熒光RNA成像的結構機制
5月17日,中國科學院生物物理研究所方顯楊研究組與動物研究所李幸研究組合作在《自然-通訊》上發表研究論文,揭示熒光點亮RNA適配體RhoBAST結合與激活熒光團TMR-DN的機制,為理性設計和優化這一重要的FLAP系統提供了機制見解。在活細胞中對生物大分子如蛋白質和RNA等進行時空定位和追蹤,對于理
新研究“點亮”熒光RNA成像的結構機制
5月17日,中國科學院生物物理研究所方顯楊研究組與動物研究所李幸研究組合作在《自然-通訊》上發表研究論文,揭示熒光點亮RNA適配體RhoBAST結合與激活熒光團TMR-DN的機制,為理性設計和優化這一重要的FLAP系統提供了機制見解。在活細胞中對生物大分子如蛋白質和RNA等進行時空定位和追蹤,對于理
新研究“點亮”熒光RNA成像的結構機制
5月17日,中國科學院生物物理研究所方顯楊研究組與動物研究所李幸研究組合作在《自然-通訊》上發表研究論文,揭示熒光點亮RNA適配體RhoBAST結合與激活熒光團TMR-DN的機制,為理性設計和優化這一重要的FLAP系統提供了機制見解。 在活細胞中對生物大分子如蛋白質和RNA等進行時空定位和追蹤
新研究“點亮”熒光RNA成像的結構機制
5月17日,中國科學院生物物理研究所方顯楊研究組與動物研究所李幸研究組合作在《自然-通訊》上發表研究論文,揭示熒光點亮RNA適配體RhoBAST結合與激活熒光團TMR-DN的機制,為理性設計和優化這一重要的FLAP系統提供了機制見解。在活細胞中對生物大分子如蛋白質和RNA等進行時空定位和追蹤,對于理
熒光成像系統
用熒光顯微鏡進行3D球狀體熒光成像時,需要進行儀器設置優化和使用高級功能才能得到更好的成像結果。對球狀體進行Z軸層掃時,需要選擇合適的物鏡并進行合適地聚焦才能拍出更清晰的圖片。EVOS細胞成像系統和配套的CellesteTM成像分析軟件可以完美地對球狀體的大小、結構和蛋白表達水平進行定性和定量分析。
熒光成像系統
對完全校準好的熒光成像系統,當用不同的濾色鏡組時,樣品上一個點在檢測器上精確成像為一個點,也就是像素對像素。然而,不同顏色的通道 merge 時,物鏡的色差校正不夠、濾鏡光路沒有完全對準都會使得熒光信號之間的記錄有差錯。對具有復雜圖案的圖像或明暗信號相混的圖像,這個可能就檢測不到。會得出這樣的結論:
活體成像中熒光色素標記細胞的方法
實驗概要本實驗以研究干細胞活體移植后的存活率為例,簡介了一兩種內源性熒光色素標記的實驗方法。實驗原理活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Lucifer
研究人員合成高性能熒光RNA實現活細胞RNA成像
2019年11月5日,華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室楊弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技術》)雜志上發表了封面學術論文,題為“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例????活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,今天,生物發光標記物可以標記到任何
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
? 活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,今天,生物發光標記物可以標記到任何一種基因上,使對基因功能的全面細致研
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
?? 活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,今天,生物發光標記物可以標記到任何一種基因上,使對基因功能的全面細致研究
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
?活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,今天,生物發光標記物可以標記到任何一種基因上,使對基因功能的全面細致研究
熒光原位雜交的背景
對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較低的熒光信號強度: 較低的細胞核糖體含量 較低的細胞周邊的通透性 較低的目標序列可接觸性(由于rRNA的折疊產生的構象,有些位置與rRNA分子內其他鏈或其他rRNA或蛋白緊密接觸,從而使探針無法和目標序列雜交) 為檢驗細胞中的目標序列是
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法:較為常用,具體步驟是:1) 抗體溶液的制備:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素:根據待標記抗體的總量,按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
熒光素標記抗體技術
(一) 原理 目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力
LSCM多重熒光標記
由于大部分實驗都需同時觀測兩個或多個細胞內的組分,需要對細胞進行多重熒光標記。這時,研究者需要綜合考慮實驗目的、所使用的激光共聚焦顯微鏡配置和已有的實驗材料。通常,激光共聚焦顯微鏡配備?4?個激光器(405nm?半導體固體激光器、氬離子激光器、543nm?氦/氖激光器或?561nm半導體固體激光器和
LSCM的熒光標記
傳統應用于熒光標記的染料如異硫氰酸熒光素(fluorescin isothiocyanate,FITC,ex 490 nm/em520 nm)、四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC,ex 550 nm/em 620 nm)、羅丹明(Rhodamine,ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)
FluorCam多光譜熒光成像技術應用案例—多光譜熒光成像...
FluorCam多光譜熒光成像技術應用案例—多光譜熒光成像是什么1.?多光譜熒光的發現及特性二十世紀八九十年代,植物生理學家對植物活體熒光——主要是葉綠素熒光研究不斷深入。激發葉綠素熒光主要是使用紅光、藍光或綠光等可見光。當科學家使用UV紫外光對植物葉片進行激發,發現植物產生了具備4個特征性波峰的熒
ACS-Nano:熒光成像膜蛋白標記方法揭示膜蛋白幾何構型
南通大學生命科學學院教師陳昌盛與德國弗萊堡大學合作,在活體細胞單分子層面構建出一種新型的熒光成像膜蛋白標記方法,可研究膜蛋白復合體的亞基組成及其幾何構型。4月28日,相關研究成果《鋅指蛋白介導的蛋白標記方法揭示膜蛋白的幾何構型》在《美國化學學會納米雜志》發表。 表達于細胞膜表面的膜蛋白一直以來
熒光成像與高光成像區別
熒光成像與高光成像區別如下:1、原理:熒光成像是利用熒光標記的分子在激發后發出特定波長的光來成像,而高光成像是基于樣本的反射或透射光強度的差異來成像。2、樣本處理:熒光成像需要在樣本中引入熒光標記物,通常是通過染色或基因工程技術來實現,而高光成像則不需要對樣本進行特殊處理,直接觀察樣本的自然反射或透
熒光原位雜交技術的背景
對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較低的熒光信號強度: 較低的細胞核糖體含量 較低的細胞周邊的通透性 較低的目標序列可接觸性(由于rRNA的折疊產生的構象,有些位置與rRNA分子內其他鏈或其他rRNA或蛋白緊密接觸,從而使探針無法和目標序列雜交) 為檢驗細胞中的目標序列是