RNAi藥物市場潛力巨大但路途遙遠
RNA干涉技術（RNAi）正在受到越來越多的關注，一些大型制藥企業已經注入數以十億美元的資金。由于RNAi特異性抑制蛋白質的合成，所以在理論上優于任何以抑制蛋白功能為機制的傳統藥物。但是，目前仍沒有任何一種RNAi新藥上市，最早也要等到2010年，市場達到一定規模至少要5-10年。 現在有4家公司的RNAi新藥候選者進入后期臨床研究，這4家公司是美國默克公司（NYSE: MRK）、瑞士的諾華（NYSE: NVS）和美國的OPKO以及Alnylam公司。最早上市RNAi新藥的可能是總部在美國邁阿密的OPKO，總市值為6.5億美元，其Bevasiranib已進入III期臨床研究，也是截止到目前唯一進入III期臨床的RNAi藥物，適應癥是老齡視力喪失，是發達國家致盲的最常見原因。如果III期臨床研究成功，2010年該藥可能上市，并可能成為“重磅炸彈”藥品，與基因泰克（NYSE:DNA）的單抗藥物Lucent......閱讀全文
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技術可用在研究與胚胎發育相關基因的功能上，但是由于細胞分裂造成 dsRNA 的稀釋，使得這種方法在研究成體的基因功能時有一定的局限性。為彌補早期 RNAi 技術的不足，Tavernarakis 等將 RNAi 技術做了一些改進及更動，將目的基因之標的序列以反向重復的方式，由
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
RNA干涉實驗
化學合成siRNA分子實驗 體外轉錄合成siRNA分子實驗 采用RNA聚合酶Ⅲ啟動子表達siRNA分子 采用RNaseⅢ制備siRNA分子實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法
RNA干涉實驗
RNA 干涉（RNA1） 是指在真核細胞中引入雙鏈 RNA ( doubt-stranded RNA，dsRNA ) 分子從而導致具有序列同源性的基因產生特異件基內沉默（gene silencing ) 的現象。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理當確定了靶基因上的 siRN
RNA干涉實驗
實驗方法原理 當確定了靶基因上的 siRNA 分子作用位點以后，根據靶位點的序列可以很方便地推導得到相應的 siRNA 分子的正義與反義 RNA 鏈序列。它們包含 19 bp 的互補雙鏈區和兩側的不配對區（每側為 2 個 U 成 2 個 T )，在合成時用 T 替代 U 可以降低成本并可以提
反義技術——RNA干擾（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
羅氏制藥公司宣布退出RNA干涉研究領域
新藥研發陷入困境羅氏退出RNA干涉研究領域 羅氏公司總部位于瑞士巴塞爾，是全球最大的醫藥公司之一。據最新出版的《科學》雜志報道，11月下旬，羅氏宣布退出RNA干涉（RNAi）研究領域，這一決定是該公司計劃裁減6%的人力即4800人的計劃的一部分。 RNA干涉是一種分子生物學上由雙
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(3)
SiRNASmall interfering RNA (siRNA)：是一種小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員，激發與之互補的目標mRNA的沉默。ShRNAshRNA 短發夾RNAshRNA
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(2)
1RNA i的發現RNA i是在研究秀麗新小桿線蟲（C. elegans）反義RNA （antisenseRNA ）的過程中發現的，由dsRNA 介導的同源RNA 降解過程。1995年，Guo等發現注射正義RNA （senseRNA ）和反義RNA 均能有效并特異性地抑制秀麗新小桿線蟲par
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(1)
Rnai最近由于RNA 干擾（RNA interference，RNA i）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在 RNA i領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA 干擾是
RNA干擾RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNA干擾（RNAi）實驗成功要素
基因和siRNA選擇RNAi實驗的通量可從沉默單個感興趣的基因，到少量相關基因或同一個通路上的基因，到全基因組高通量篩選，取決于需要解決的生物學問題。siRNA的設計至關重要。轉染優化用于RNAi實驗的細胞應當有效轉染siRNA。轉染必須經過優化確保siRNA的濃度是最低的有效濃度以避免非特異性效應
Rules－of－siRNA－design－for－RNA－interference－(RNAi)
General GuidelinessiRNA targeted sequence is usually 21 nt in length.Avoid regions within 50-100 bp of the start codon and the termination codonAvoid
RNAi（RNA干擾）的分子機制
通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱為Dic
RNAi藥物市場潛力巨大但路途遙遠
RNA干涉技術（RNAi）正在受到越來越多的關注，一些大型制藥企業已經注入數以十億美元的資金。由于RNAi特異性抑制蛋白質的合成，所以在理論上優于任何以抑制蛋白功能為機制的傳統藥物。但是，目前仍沒有任何一種RNAi新藥上市，最早也要等到2010年，市場達到一定規模至少要5-10年。 現在有4家公
哺乳動物RNAi技術－Mammalian－RNA－Interference
Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York?Excerpted from?RNAi: A Guide To Gene S
RNA干擾（RNAi）實驗原理與方法（2）
dsRNA消化法的主要優點在于可以跳過檢測和篩選有效siRNA序列的步驟，為研究人員節省時間和金錢（注意：通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜）。不過這種方法的缺點也很明顯，就是有可能引發非特異的基因沉默，特別是同源或者是密切相關的基因。現在多數的研究顯示這種情況通常不會造成影響。最
RNA干擾（RNAi）實驗原理與方法（1）
近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（RNAi）。一、R
RNA干擾（RNAi）實驗原理與方法（3）
3.DEAE-葡聚糖和polybrene帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體復合物和帶負電的DNA分子使得DNA可以結合在細胞表面。通過使用DMSO或甘油獲得的滲透休克將DNA復合體導入。兩種試劑都已成功用于轉染。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時轉染。4.機械法轉染技術也包括使用機械的方法，
－默沙東退出RNAi研究領域
盡管最近羅氏公司、賽諾菲兩個制藥巨頭宣布重返RNAi療法研究領域，默沙東公司卻做出相反的決定，宣布撤出這一研究領域。公司最近宣布將相關的 Sirna公司以1億7千5百萬美元的價格出售給Alnylam公司。這也是默沙東公司宣布進行研發部門重組后的又一個大動作。??????? 公司于2006年以
RNAi——雙鏈RNA引起的基因敲除（2）
在構建雙鏈RNA的表達載體時，使用RNA多聚酶Ⅲ來指導RNA的合成。這是因為RNA多聚酶Ⅲ有明確的啟始和終止序列，而且合成出的RNA不會帶有polyA尾。當RNA多聚酶Ⅲ遇到連續5個胸腺嘧啶時，它指導的轉錄就會終止，并且轉錄產物在第二個尿嘧啶處被切下來。U6啟動子能被RNA多聚酶Ⅲ識別， 合
RNAi——雙鏈RNA引起的基因敲除（1）
1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現，反義和正義RNA都阻斷了基因的表達，他們對這個結果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究證明，在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中，真正起作用的是雙鏈RNA[1]。這些雙鏈RNA是體外
Nature子刊：增強RNA干涉的效力
人們可以通過納米顆粒將短鏈RNA運輸到目標細胞，關閉功能發生異常的基因，從而治療癌癥和其他疾病。不過迄今為止，科學家們還不完全了解，納米顆粒進入細胞后發生的情況。 現在，麻省理工MIT的一項新研究展現了這些納米顆粒的命運，這一發現能幫助人們大大提高siRNA的運輸效率。文章于六月二十三日發
羅氏收購Alnyam－展開RNAi領域最大合作
來自紐約7月9日的消息，全球最大醫藥公司之一羅氏Roche Holding AG宣布計劃收購美國生物制藥公司Alnyam（Nasdaq: ALAN），并已與其簽訂總值為10億美元的合作協議，聯合開發以RNA干涉（RNAi）技術為基礎的新藥。這是迄今為止本領域最大規模的合作，也是自上周五英國制藥公司阿
專訪RNAi前沿科學家劉一
5月14日的《Nature》雜志以封面文章形式發表了德克薩斯大學西南醫學中心劉一的一篇RNAi研究前沿文章，劉一教授發現了一類新的RNAi分子，qiRNA。人們對RNAi的了解又深入了一步。 為了讓讀者更進一步的了解qiRNA，生物通記者采訪了文章的通訊作者劉一教授，百忙中的劉一教授爽
RNAi實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程
RNAi 實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程，本實驗方法來自于加州大學Jim教授實驗，很權威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1.?Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post tran
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri