小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗1
培養以及小鼠外周血分裂相細胞收獲實驗實驗材料雌性小鼠7?10周齡試劑、試劑盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素鈉溶液秋水仙堿溶液固定劑儀器、耗材聚苯乙烯組織培養管肝素化的微量毛細分血管有蓋的12mm X 75mm 無菌管錐形玻璃離心管清潔的顯微鏡玻片實驗步驟基本方案 培養以及小鼠外周血分裂相細胞收獲1.對于每一個小鼠標本,用一個 16 mm X 125 mm 組織培養管,其內有:0.95 ml RPMI;0.1 ml PHA 溶液;0.1 ml LPS 溶液(750ug/ml);0.15 ml FBS。接種前需冷藏。2.用兩只 75u1 肝素化的微量毛細管分血器分別從每只小鼠的兩個眼眶靜脈竇采集血液 (圖 4.2.1; 體重 30 g 的小鼠可采集 300u1 血液)。接種至含有 0.1 ml 500 USPU/ml 肝素鈉的 12 mm X 75 mm 無菌管中。注:如果不能熟練操作,可從小鼠尾靜脈采血(備......閱讀全文
小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗1
?培養以及小鼠外周血分裂相細胞收獲實驗實驗材料雌性小鼠7?10周齡試劑、試劑盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素鈉溶液秋水仙堿溶液固定劑儀器、耗材聚苯乙烯組織培養管肝素化的微量毛細分血管有蓋的12mm X 75mm 無菌管錐形玻璃離心管清潔的顯微鏡玻片實驗步驟基本方案 培養以及小鼠外周血分裂
小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗2
GIEMSA 顯帶(G顯帶)實驗材料分裂中期染色體玻片試劑、試劑盒2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸鹽緩沖液玻片染色缸儀器、耗材亮視野顯微鏡實驗步驟1.于室溫存放染色體玻片 7~10d。2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的廣口瓶中孵育玻片 1.5 h,每個廣口瓶中盛放玻片
正常細胞常規核型的標本制備_人體染色體常規核型分析
實驗材料染色體儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟一、人體染色體的觀察1. ?取制備較好的染色體玻片標本,先在低倍鏡下觀察。2. ?在標本中選擇一個染色體之間分散較好,互不重疊的中期分裂相,置于視野中央,然后換油鏡仔細觀察。3. ?每個染色體都含有兩條染色單體,兩單體連接處為著絲粒。4. ?計數時
光譜染色體核型分析實驗
實驗方法原理光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理為基礎。對流式分選的染色體進行PCR標記,直接標記熒光素或間接標記半抗原。5種光譜學不同的純色染料進行組合得到獨特的染色體探針混合物。探針混合物與中期染色
光譜染色體核型分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
光譜染色體核型分析實驗(一)
實驗方法原理 光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理為基礎。對流式分選的染色體進行PCR標記,直接標記熒光素或間接標記半抗原。5種光譜學不同的純色染料進行組合得到獨特的染色體探針混合物。探針混合物與中期染
光譜染色體核型分析實驗(二)
三、染色體標本預處理和變性1.染色體標本至少自然老化2d或用前37℃過夜。2.染色體標本在系列乙醇(70%、80%和95%)中分別脫水5min,晾干。3.加入15?20μL的10%胃蛋白酶儲存液到50mL預熱的0.01mol/L HCl中,將染色體標本在37℃染色缸中溫育5min。同時,準備一缸70
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質,使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片,然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
染色體核型分析
一、實驗目的 掌握染色體核型分析的各種數據指標,學習染色體核型分析的基本方法。二、實驗原理 染色體核型是指將動物、植物等的某一個體或某一分類群(亞種、種、屬等)的體細胞整套染色體按它們相對恒定的特征排列起來的圖像。核型分析通常需辨析每條染色體的特征。它包括染色體的數目、長度、
人類染色體核型分析實驗原理及操作步驟
實驗原理核型(karyotype)一詞在20世紀20年代首先由蘇聯學者T. A. Levzky等人提出。核型分析的發展有三項技術起了很重要的促進作用,一是1952年美籍華人細胞學家徐道覺發現的低滲處理技術,使中期細胞的染色體分散良好,便于觀察;二是秋水仙素的應用便于富集中期細胞分裂相;三是植
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養人淋巴細胞染色體標本制備腫瘤細胞的染色體標本制備人體染色體常規核型的分析實驗方法原理采用微量全血培養人體外周血中淋巴細胞,在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
光譜染色體核型分析
實驗材料 AppliedSpectralImaging ( MigdalHaemekIsrael) 試劑盒組織樣本試劑、試劑盒 組織培養基秋水仙胺檸檬酸鹽KCl甲醇冰乙醇去離子甲酰胺20 X SCCHClPBS MgCl2分裝標記探針二甲苯儀器、耗材 解剖刀和刀片 無菌培養皿組織培養瓶培養箱水浴鍋離
染色體核型分析方法
鏡下選擇染色體分散適度(不過于分散和相互重疊),染色體長短合適,染色清晰的分裂相,在油鏡下觀察。 1.計數 將一個細胞中的全部染色體按其自然位置劃成幾個小區,為了防止重數或漏數,可按其鏡下形態畫出簡圖然后計數,確定有無數目異常。人類正常體細胞2n=46,其中常染色體22對,性染色體1對,正常
外周血細胞染色體核型分析-是什么
染色體核型分析是以分裂中期染色體為研究對象,根據染色體的長度、著絲點位置、長短臂比例、隨體的有無等特征,并借助顯帶技術對染色體進行分析、比較、排序和編號,根據染色體結構和數目的變異情況來進行診斷。核型分析可以為細胞遺傳分類、物種間親緣的關系以及染色體數目和結構變異的研究提供重要依據。
染色體核型分析的分析技術
一、GRQ帶技術 人類染色體用Giemsa染料染色呈均質狀,但是如果染色體經過變性和(或)酶消化等不同處理后,再染色可呈現一系列深淺交替的帶紋,這些帶紋圖形稱為染色體帶型。顯帶技術就是通過特殊的染色方法使染色體的不同區域著色,使染色體在光鏡下呈現出明暗相間的帶紋。每個染色體都有特定的帶紋,甚至
染色體核型分析的介紹
染色體核型分析技術,傳統上是觀察染色體形態,近年來,采用熒光原位雜交技術,將熒光素標記的探針進行染色體核型特定位點的檢測和標記,可以精確地檢測染色體上DNA鏈中,單個堿基的突變,從而大大提高了染色體核型分析的精度。
什么是染色體核型分析
染色體核型分析是根據染色體的長度、著絲點位置、臂比、隨體的有無等特征,并借助染色體分帶技術對某一生物的染色體進行分析,比較,排序 編號。染色體核型分析以體細胞分裂中期染色體為研究對象。
什么是染色體核型分析
染色體核型分析是分析生物體細胞內染色體的長度、著絲點位置、臂比、隨體大小等特征,其分析以體細胞分裂中期染色體為研究對象。不同物種的染色體都有各自特定的形態結構(包括染色體的長度、著絲點位置、臂比、隨體大小等)特征,而且這種形態特征是相對穩定的。
染色體核型分析操作步驟
1.秋水仙素處理,消化,離心收集,PBS洗一次 2.低滲KCL(0.075M)處理。時間在不同細胞不大一樣一般20-40min 3. 滴加少量固定液,(1/10體積)離心1500rpmX5min 4.去上清,保留1ml上清,輕輕吹打懸起,緩慢加入固定液,邊加邊振蕩,直至滿管。離心1500r
簡述染色體的核型分析
確定核型的技術通常稱為核型分析。細胞可以秋水仙堿體外固定分裂(中期)細胞,然后將這些細胞染色,拍照并按照先常染色體(長度順序)后性染色體(此處為X/Y)的順序將染色體排列成核型。像許多有性生殖的物種一樣,人類有特殊的性染色體,女性為XX,男性為XY。
人類染色體核型分析
實驗概要學習和掌握人類染色體核型分析的方法,進一步識別和鑒定人類染色體。實驗原理核型(karyotype)一詞在20世紀20年代首先由蘇聯學者T. A. Levzky等人提出。核型分析的發展有三項技術起了很重要的促進作用,一是1952年美籍華人細胞學家徐道覺發現的低滲處理技術,使中期細胞的染
染色體核型分析系統的用途及工作原理
系統用途 染色體核型分析系統目前已廣泛應用于各大醫院檢驗科、血液科、婦產科、生殖中心、計劃生育研究所、職業病防治所以及高校和科研院所等單位。主要應用范圍包括: 遺傳疾病診斷 主要做外周血G帶染色體分析,一般用于臨床醫學、婚前檢查和優生優育。如生殖功能障礙、第二性征異常、外生殖器兩性畸形、先
小鼠骨髓的染色體制備
實驗概要本實驗介紹了制備小鼠骨髓染色體的原理及操作流程。實驗原理小鼠骨髓細胞有高度的分裂活性,并且數量非常多,因此不必進行體外培養,可直接觀察到分裂期細胞。處于分裂期的細胞經秋水仙素處理,阻斷紡錘絲的形成,使細胞分裂停止于中期,此時染色體達到最大收縮,具有典型的形態。低滲處理使細胞破裂,便于染色體分
染色體核型分析的分析結果介紹
在分析結果中,寫出該細胞的核型式,注明性染色體。 正常核型的描述方式: 46,XY正常男性核型。46條染色體,包括1條X染色體和1條Y染色體。 46,XX正常女性核型。46條染色體,包括2條X染色體。
染色體核型分析的分析方法介紹
鏡下選擇染色體分散適度(不過于分散和相互重疊),染色體長短合適,染色清晰的分裂相,在油鏡下觀察。 1、計數 將一個細胞中的全部染色體按其自然位置劃成幾個小區,為了防止重數或漏數,可按其鏡下形態畫出簡圖然后計數,確定有無數目異常。人類正常體細胞2n=46,其中常染色體22對,性染色體1對,正常
染色體核型分析系統的簡介
染色體核型分析,常規方法是將染色體涂片置于鏡下觀察。而采用熒光原位雜交技術,將熒光素標記的探針進行染色體核型特定位點的檢測和標記的染色體核型分析,則可通過熒光檢測儀器,直接判讀反應體系熒光信號的變化強度,直接測定染色體DNA鏈中單個堿基的突變,此時一個染色體核型為一個堿基。
染色體核型分析系統的性能
1.1多語言版本,含全中文軟件界面、中英文操作界面窗口可即時切換。 1.2軟件(核型分析、FISH)模塊共用一個軟件系統,同窗口顯示、整體性強。 1.3全部圖標化的功能菜單,方便操作學習。 1.4全屏幕同一窗口下多幅圖像平鋪顯示及處理功能。 1.5可以全部顯示或分類顯示不限數量的圖像縮略