實驗材料 AppliedSpectralImaging ( MigdalHaemekIsrael) 試劑盒組織樣本試劑、試劑盒 組織培養基秋水仙胺檸檬酸鹽KCl甲醇冰乙醇去離子甲酰胺20 X SCCHClPBS MgCl2分裝標記探針二甲苯儀器、耗材 解剖刀和刀片 無菌培養皿組織培養瓶培養箱水浴鍋離心管移液槍染色缸熒光顯微鏡實驗步驟 一、探針已經標記好的商品探針以混合形式溶解在雜交液中。二、從組織中制備染色體1.在組織培養用的超凈工作臺中進行無菌操作,在無菌培養皿中,用刀片將組織切碎成細小的塊。2.將細碎的組織塊轉入有足夠培養基的、具有通氣孔的組織培養瓶中;培養基要蓋過平面放置的培養瓶底(通常 10~15 mL)。3.將培養瓶放入 CO2 培養箱中,靜置培養 24 h。4.光鏡下觀察其生長狀態。5.當達到要求的生長狀態或培養時間時,向培養瓶中加入秋水仙胺至終濃度 l(ug/mL,在 CO2 培養箱中繼續培養 2~3 h(見注釋 ......閱讀全文
【摘要】近年微陣列一比較基因組雜交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技術被應用到臨床細胞遺傳學領域。該技術是選擇DNA特殊片段作為靶,固化在載體上,形成密集、有序的分子微陣列。然后,從測試標本中提取DNA,將測試DNA
基本方案 實驗方法原理 光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗
實驗方法原理光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理為基礎。對流式分選的染色體進行PCR標記,直接標記熒光素或間接標記半抗原。5種光譜學不同的純色染料進行組合得到獨特的染色體探針混合物。探針混合物與中期染色
實驗方法原理 顯微切割或流式分選的染色體經過PCR擴增制備整條染色體的DNA,被認為是對某條染色體全部涂染的高質量探針的首選途徑。對于單個染色體、多色FISH(M-FISH)或光譜核型分析中所有24條染色體的涂染均是此種情況。下面提供的操作程序是簡并寡核苷酸引物PCR(DOP-PCR)最原始操作程序
實驗方法原理 光譜染色體核型分析(SKY)采用24種顏色對所有染色體進行涂染,在一次試驗中可以觀察到每一條染色體。該技術以光譜成像和傅里葉光譜學原理為基礎。對流式分選的染色體進行PCR標記,直接標記熒光素或間接標記半抗原。5種光譜學不同的純色染料進行組合得到獨特的染色體探針混合物。探針混合物與中期染
基本方案 實驗方法原理 顯微切割或流式分選的染色體經過PCR擴增制備整條染色體的DNA,被認為是對
實驗方法原理顯微切割或流式分選的染色體經過PCR擴增制備整條染色體的DNA,被認為是對某條染色體全部涂染的高質量探針的首選途徑。對于單個染色體、多色FISH(M-FISH)或光譜核型分析中所有24條染色體的涂染均是此種情況。下面提供的操作程序是簡并寡核苷酸引物PCR(DOP-PCR)最原始操作程序的
M-FISH 被成功地用于鑒別先天性疾病中的標記染色體或衍生染色體。近來該方法越來越多地被用于確認復雜核型中的多重染色體異常;在進行血液疾病的診斷時,M-FISH 在檢測臨界染色體重排中非常有用試劑、試劑盒DAPI 復染液乙醇SSC鹽酸HClNP-40胰酶NaCl檸檬酸鈉Spectra Vysion
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年,由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增,人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現,為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
自從50年前誕生至今,流式細胞儀(Flow cytometry)一直并仍然是無以倫比的高通量、高內涵的單細胞分析技術。 2015年11月,是流式細胞儀誕生50周年之時。人們可能會想象,一種如此長時間以前發明的技術應該到今天會是徹底地不同于當年,但是事實不然,它的基礎原理與結構幾乎沒有什么改變,