硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
硫酸銨沉淀法 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、溶液散熱少和經濟適用。硫酸銨濃度常以百分濃度表示，以 X％ 表示所需配制的溶液濃度，表示開始的溶液濃度，所需的硫酸銨克數按以下公式計箅：g＝515（X－X0）/（100－0.27X）大多數蛋白質在 55％ 硫酸銨中沉淀，獲得最大量蛋白質沉淀是 85％ 硫酸銨溶液，以不含硫酸銨的 100 ml 蛋白質溶液為起始溶液。 ......閱讀全文
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗——硫酸銨沉淀法
實驗方法原理當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、溶
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
硫酸銨沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋白質
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
免疫沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 實驗材料?含蛋白質的樣品試劑、試劑盒?100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟 1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
三氯醋酸沉淀法 丙酮沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 含蛋白質的樣品
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮（或其他有機溶劑如乙醇或甲醇）儀器、耗材Eppendorf 管（小塑料離心管）Eppendorf 管離心機（小型臺式離心機）混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 樣品溶液，混勻。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型臺式離
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
有機溶劑沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min （或在冷凍
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
聚乙二醇法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低，形成沉淀的子衡時間短等特點，使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30％ 時，蛋白質就能夠達到最大量沉淀。
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低，形成沉淀的子衡時間短等特點，使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30％ 時，蛋白質就能夠達到最大量沉淀。實驗材料蛋
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗——有機溶劑沉淀法
實驗方法原理將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑的濃度按體
IgG的分離與提純實驗_硫酸銨沉淀法
IgG的分離與提純實驗可以用于：制備酶標抗體或熒光抗體。實驗方法原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離，是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子，從而破壞蛋白質表面的水化膜，降低其溶解度，使之從溶液中沉淀出
蛋白濃縮方法基本
蛋白濃縮方法基本有：?丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……?1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。?2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！?3，硫酸銨沉淀法：利用高濃
蛋白濃縮（protein－concentration）基本方法
蛋白濃縮方法基本有：丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法：得有特異性抗體！ 3.硫酸銨沉淀法
蛋白濃縮方法
蛋白濃縮方法基本有：?丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……?1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法?試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。?2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！?3，硫酸銨沉淀法：利用高濃
馬鈴薯中優質濃縮蛋白的提取
?硫酸銨沉淀與等電點沉淀提取馬鈴薯濃縮蛋白的比較研究 中國農科院供圖 中國農業科學院農產品加工研究所薯類加工與品質調控創新團隊研究發現，利用硫酸銨沉淀與等電點沉淀的方法可從馬鈴薯加工漿液中提取得到功能特性、理化性質和營養品質良好的濃縮蛋白。相關論文發表在International Jour
蛋白的濃縮方法
丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！3，硫酸銨沉淀法：利用高濃度鹽將蛋白質析出（鹽析）選擇
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換層析裝置實驗步驟 1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂，不斷攪拌以促進平衡；2. 傾瀉掉大部分溶液，保留的溶液置要使樹脂能輕松的
批量層析法濃縮蛋白質實驗
批量層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液（幾毫升），用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的，2 mg/ml
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
超濾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液（幾毫升），用離心力的方法使溶
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換層析裝置實驗步驟1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂，不斷攪拌以促進平衡；2. 傾瀉掉大部分溶液，保留的溶液置要使樹脂能輕松的攪拌；3
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液（幾毫升），用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的，2 mg
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性，不應含有非抗體的血清蛋白。因此，為了濃縮和提高抗體的效價，或為制備免疫球蛋白特異性抗體時，通常也需要分
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱，比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必