2.2 PCR-SSCP并測序分析發現X連鎖遺傳性鐵幼粒細胞貧血家系ALAS2基因第5外顯子基因異常 分析兩兄弟及其父母、外祖父母的ALAS2基因,兩兄弟ALAS2基因第5外顯子的PCR擴增產物有與正常臍血不同的單鏈電泳條帶,他們的父親和外祖父有與正常臍血相同的單鏈電泳條帶,而他們的母親和外祖母同時由上述兩種不同的條帶。提示兩患者的ALAS2基因存在異常,這一異常基因來自母系。(圖1)測序表明兩患者的ALAS2第5外顯子有G514A的點突變,母親為雜合子攜帶者。將DNA序列測定結果在互聯網上(www.ncbi.nlm.nih.gov/Blast)進行同源性分析確定兩患者ALAS2第5外顯子G514A點突變。 2.3 常規實時定量PCR在Gene Amp PCR System 2400 PCR儀用Taqman熒光探針能夠檢測ALAS2基因第五外顯子點突變 在Taqman探針對此家系中六位成員DNA與二份正常男性......閱讀全文
簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術,該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針,具有可實時監測,高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,極大地克服了原有PCR儀技術的不足,擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr;熒光;基因Flu
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( PCR )
數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值(Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度
PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,它是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”一樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。 PCR儀也叫基因擴增儀,它是利用PCR技術對特定基因做
PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,它是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”一樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。 PCR儀也叫基因擴增儀,它是利用PCR技術對特定基因做試管內的大量
來自中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所傳染病診斷室的研究人員建立并初步評價了一種針對重要腸道病原菌的多重PCR基因芯片檢測方法,這一方法具有較高的特異性,并且混合PCR可以分別按照種屬內和種屬間的引物組合方案用于多病原的篩檢。 感染性腹瀉在我國發病率居各類傳染病之首,長期以來嚴重危害人民
今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展! 其實相對于其
來自疾病預防控制中心傳染病預防控制所傳染病診斷室的研究人員建立并初步評價了一種針對重要腸道病原菌的多重PCR基因芯片方法,這一方法具有較高的特異性,并且混合PCR可以分別按照種屬內和種屬間的引物組合方案用于多病原的篩檢。 感染性腹瀉在我國發病率居各類傳染病之首,長期以來嚴重危害人民健康。其中絕大
梯度PCR儀梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置,根據結果,一步就可以摸索出zui適反應條件。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR
梯度PCR儀梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置,根據結果,一步就可以摸索出zui適反應條件。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR
摘要:本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞:轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Genetically modifi
基因芯片 技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門,曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交 為基本原理,基于A和T、G和C的
(1) 定性PCR法定性PCR可直接檢測啟動子、終止子、標記基因片斷、目的基因片斷。為使目的基因很好的進行表達,在構建基因表達載體時常在目的基因的5’和3’端分別加上啟動子和終止子。當前大約75%的轉基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S啟動
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置。梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置。梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按
摘要:本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞:轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Gen
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其zui適合的退火溫度不
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其zui適合
液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原 抗體、酶 底物、配體 受體的結合
液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原抗體、酶底物、配體
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
雖然PCR基因擴增儀的生產廠家、型號很多,工作原理不盡相同,使用方法也不盡一致,但都具有向自動化和智能化發展的趨勢,這對于使用者來說比較方便,只要參考說明書輕輕觸動鍵鈕,輸入或改變擴增程序、反應時間、溫度等,置入擴增樣品,PCR基因擴增儀就會自動完成整個擴增過程。 溫度控制是決定PCR反應能否成功
引言 一提到分子診斷,人們自然會想到核酸和基因。的確,分子診斷技術的發展與分子生物學的研究是分不開的,自1953年Watson和Crick發現DNA雙螺旋結構以來,一系列分子生物學新技術相繼出現,如Sanger測序、放射性核素和非放射性核素標記技術、電泳、層析、核酸純化、核酸液相和固相雜交、基
引言 一提到分子診斷,人們自然會想到核酸和基因。的確,分子診斷技術的發展與分子生物學的研究是分不開的,自1953年Watson和Crick發現DNA雙螺旋結構以來,一系列分子生物學新技術相繼出現,如Sanger測序、放射性核素和非放射性核素標記技術、電泳、層析、核酸純化、核酸液相和固相雜交、基
多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
miRNA的好Homie,非編碼RNA界的NewStar --沒想到在農業上大展身手啦 你沒看錯!不是標題黨。說到miRNA的好Homie,非編碼RNA界的NewStar,想必聰明博學的你就已經猜到了是lncRNA。今天大閱哥要給大家挖一挖lncRNA在農業上的研究進展。為了寫這篇主題
以前只要提到基因表達分析,人們就會想到熒光定量PCR;只要提到高通量基因表達分析,人們會首先想到基因芯片。雖然熒光定量PCR儀幾乎每個實驗室都有,但是做芯片就不一定每個實驗室都具備這個條件了。那么只有一臺熒光定量PCR儀是否也能進行高通量的基因表達譜分析呢?QIAGEN 推出的RT2 Profile