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    多肽合成藥物的基因重組技術

    基因的表達包括相應的mRNA合成( 轉錄) 和蛋白質合成( 翻譯) , 在微生物體內進行外來基因的蛋白質生物合成依賴于微生物遺傳物質和編碼目標蛋白的重組DNA片段。具體步驟如下: 第1步,從供體中分離出編碼蛋白的DNA片段; 第2步,將DNA分子插入到表達載體上; 第3步,將載體轉染到宿主體內; 第4步,培養宿主組織,進行基因的擴增,mRNA合成和多肽合成; 第5步,純化重組多肽。通常根據宿主細胞的不同將多肽藥物重組技術分為兩類: ( 1) 多肽藥物的真核表達; ( 2) 多肽藥物的原核表達。1 多肽合成藥物的真核表達真核表達的多肽具有定向性強、產品安全衛生、原料來源廣泛和成本低等優點,可以得到質量高、療效好的且活性與天然多肽相當多肽類藥物。目前,真核宿主細胞主要有酵母菌、動物和昆蟲細胞等,而酵母菌在真核表達中最常用。Cao等利用畢赤酵母細胞成功地表達了雞 b-防御素6( AvBD-6)和脫半胱氨酸的Av......閱讀全文

    Cre-loxP 基因重組技術

    re-loxP 是一種位點特異的基因重組技術,被廣泛應用于特異位點的基因敲除、基因插入、基因翻轉和基因易位,在真核生物和原核生物中均有廣泛應用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一種重組酶,是causes recombination的縮寫,于1981 年從 P1 噬菌體中被發現,屬于 λIn

    分子生物學實驗基礎知識

    分子生物學是在生物化學基礎上發展起來的,以研究核酸和蛋白質結構、功能等生命本質的學科,在核酸、蛋白質分子水平研究發病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程(基因技術,基因重組)是目前分子生物學研究熱點,這些技術可以改造或擴增基因和基因產物,使微量的研究對象達到分析水平,是研究基因調控和表達的方法,也

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    基因敲除的原理與方法

    基因敲除可以說是基因組 學、細胞分離培養以及轉基因技術的組合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做個小結,以供大家學習。一.概述:基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子 生物學技術,是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用D

    基因敲除技術概述(一)

    1.概述:基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術,是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理,用設計的同源片段替代靶基因片段,從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展,除了同源重組外,新的原理和技術也逐漸被應用,比較成

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    基因敲除技術

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    基因敲除技術

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    新基因圖譜揭示基因組交叉地帶

      據英國《新科學家》網站近日報道,美國科學家繪制出了目前世界上最先進的人類基因圖譜,該圖譜能幫助更準確地識別某些影響特定人群的遺傳病根源。   這一基因圖譜發現,西非人后裔的基因中有著歐洲人后裔所沒有的基因重組的高發地帶,這有可能是導致特定人種先天性疾病諸如貧血癥的遺傳學原因。當然

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    化東寶基因重組人胰島素專家冷春生通自主創新攀高峰

      今年3月,四位波蘭生物醫學專家慕名來到吉林省通化東寶藥業股份有限公司參觀基因重組人胰島素二期工程,頗感“震撼”。他們沒想到,中國居然能攻克基因重組人胰島素工業化、產業化這一世界性難題;他們更沒想到,帶領團隊打破發達國家壟斷、使中國闖入世界三強的,竟是該公司年僅37歲的基因重組人胰島素專家冷春生。

    基于胚胎干細胞的同源重組技術??介紹

    基因改造(包括敲除和敲進)小鼠已經成為現代生命科學基礎研究和藥物研發領域不可或缺的實驗動物模型,在生命科學、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用。今天呢,就給大家介紹最傳統最穩定的基因改造技術:基于胚胎干細胞的同源重組技術。Capecchi和Smithies早在在1989年根據同源重組(homo

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    五、親代桿狀病毒基因組的改進就像轉移質粒的改進,對親代桿狀病毒基因組的改進也是為了滿足各種不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重組桿狀病毒載體構建和分離低效率的方法,這也是最初的桿狀病毒-昆蟲細胞系統存在的主要問題。現在已經知道這個問題的根源在于, 在共轉染的昆蟲細胞系中,轉移質粒和親代桿狀病毒

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      由英國愛丁堡大學、日本理化學研究所等機構組成的一個國際研究小組發現,人類腦細胞會高頻度地進行基因重組,腦細胞之間的基因各不相同。   科學家早前發現,在人類的細胞中,與遺傳相關的細胞存在遺傳基因重組現象。此次國際研究小組的發現首次證實了人類腦細胞也同樣存在基因重組現象。   這

    抗體多樣性的緣由與衍生-基因重組與體細胞高突變

      這是一個繽紛多彩的世界,眾生各得其時,恣意生長;又是一個危機四伏的世界,萬物相生相克,終歸塵土。世界因多變而精彩,又因未知而危險。各種各樣的病毒、細菌、真菌和寄生蟲讓人防不勝防,是各類呼吸系統、循環系統、消化系統或皮膚黏膜疾病的元兇之一。導致中世紀歐洲人口驟減的鼠疫陰魂不散,瘧疾、霍亂弧菌、流感

    中緬邊境地區注射吸毒人群HIV-1分子流行病學研究獲進展

      吸毒人群是我國HIV-1感染的高危人群,注射吸毒(IDUs) 尤其是跨境注射吸毒導致的艾滋病重組流行已成為我國艾滋病傳播的重要途徑之一。由于毗鄰著名的毒品生產基地“金三角”,云南省特別是邊境地區的吸毒現象較為普遍。1989年年底,我國在云南省瑞麗市吸毒者中首次發現規模人群感染艾滋病

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    蛋白酶生化性質的改善可以通過對該酶基因的錯摻突變和 DNA 混編方法實現。混編技術可用于同一基因的一組突變體,或者對相關家族基因的片段進行新的組合,產生嵌合突變基因產物。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料pBSII KS 質粒大腸桿菌 DH5α試劑、

    大腸桿菌雜交及基因定位

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    Gateway的原理

    Gateway也可以被視為一種克隆操作平臺:把目的基因克隆到入門載體(Entry Vector)后,就不用依賴限制性內切酶,而靠載體上存在的特定重組位點和重組酶,高效、快速地將目的基因克隆到其它的受體載體(Destination Vector,目的載體)上。Gateway的原理也是建立在噬菌體DNA

    PCR技術(十五):個體配子DNA序列的PCR分析

    高等生物遺傳圖譜的構建依賴于選擇性雜交后代的分析或者通過家系分析法來計 算連鎖關系。對人類而言僅后者是可行的。使用長度多態性限制片段(RFLPS)在構 建人連鎖圖譜方面已取得長足的進步。為了對帶有與已知表現型相關的RFLP標記的基 因進行定位,首先得建立間隔約10CM的遺傳標記束(平均1CM等于1%

    基因治療的方法(一)

       1.基因轉移方法  (1)特異正常基因的分離與克隆:應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果,已有不少基因并將會有更多人類基因被分離和克隆,這是基因治療的前提,在當代分子生物技術條件下,一般來說,只要有基因探針和準確的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,現在既可人工

    5月6日《科學》雜志精選

       在人體內能促進HIV免疫反應的抗體  兩項新的研究揭示,給予一種能與HIV結合的強效廣譜中和抗體可在人體內激發強效免疫反應,它甚至能加快清除被感染的細胞。首先,Till Schoofs等人分析了一個臨床試驗的結果,在該試驗中,15名感染HIV患者得到了一種廣譜中和抗體(bNAb)的單次注射,這

    基因敲除技術最新研究進展

      基因敲除技術最新研究進展—|基因敲除技術|轉基因研究|基因克隆|基因靶向操作|  基因敲除  技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發展起來的一種分子生物學技術。1987年Thompsson建立了完整的ES細胞基因敲除的小鼠模型 。近年來新興起了ZFNs、TALENS、Cas9

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    成體細胞還原為胚胎干細胞的探索之路

      不用創建一個胚胎,而將成體細胞還原為胚胎狀態是一件棘手的事情。科學家們現已能重置一個成熟體細胞中的DNA,使該細胞能成長為人體內的任何細胞類型,如心臟肌肉細胞、神經細胞和膀胱細胞等。   一個病人到醫院診斷病情,醫生告知其診斷結果不太好,必須進行手術治療。   于是,醫生從病人的頭上拔出一根

    桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統

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