BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR／Cas9基因編輯
BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因編輯摘要近期，CRISPR/Cas9系統被廣泛地應用于突變體小鼠的構建，但是借助于微注射方法很大程度上限制了基因編輯于高通量上的應用。這篇文章中，我們闡述了一個簡單，高效，大規模的基因編輯方法：即借助于電轉染將RNAs轉入卵，而不是通過顯微注射。我們用這種方法將單鏈寡脫氧核苷酸（ssODN）轉入小鼠卵，構建敲除突變體。研究結果證明此方法使得大規模基因分析成為現實。材料和方法小鼠、卵和胚胎使用ICR和B6D2F1(C57BL/6XDBA2F1)孕鼠。ICR主要用于電轉條件摸索，而B6D2F1用于基因編輯。從E0.5的輸精管中收集受精卵。ICR和B6D2F1和同種雄鼠自然雜交。基因編輯試驗中，從B6D2F 1和R26-H2b-mCherry雄性雜交得到的卵，培養在mWM培養基中等待電轉染。電轉染應用BEX定制電極（長：10mm，寬：3mm，高：0.5mm，間距：1mm）......閱讀全文
BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因編輯
BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因編輯摘要近期，CRISPR/Cas9系統被廣泛地應用于突變體小鼠的構建，但是借助于微注射方法很大程度上限制了基因編輯于高通量上的應用。這篇文章中，我們闡述了一個簡單，高效，大規模的基因編輯方法：即借助于電轉染將RNAs轉入卵，而不是通過
電轉化儀高效轉染mRNA進入小鼠受精卵形成穩定突變體
摘要隨著小鼠基因組序列測序完成，許多研究都圍繞著功能基因參與的生物學過程，特別是發育和疾病研究領域。那么穩定遺傳修飾的模型動物對于闡明基因的作用十分重要，然而，傳統的方法，包括在胚胎干細胞中的同源重組或是構建小鼠嵌合體，既耗時又耗力。然而新的基因組編輯方法明顯的優化這個過程。在有效的基因組編輯方法中
借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生...
借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生成非嵌合體突變體胚胎基因編輯解析：借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生成非嵌合體突變體基因編輯技術指能夠讓人類對目標基因進行“編輯”，實現對特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技術自問世以來，就有著
全新CRISPR/Cas9基因編輯系統助力肝癌建模
最近發表在開放獲取期刊《Genome Medicine》上的一項研究，報道了一種建立肝癌小鼠模型的新方法，即利用CRISPR/Cas9系統快速將癌癥相關基因敲入小鼠的DNA中。 研究的通訊作者、麻省大學醫學院RNA療法研究所的王文說：“為了更好地理解腫瘤生物學、開展臨床前研究以及為病人找到潛在
全新CRISPR/Cas9基因敲入系統助力肝癌建模
最近發表在開放獲取期刊《基因組醫學》（Genome Medicine）上的一項研究，報道了一種建立肝癌小鼠模型的新方法，即利用CRISPR/Cas9系統快速將癌癥相關基因敲入小鼠的DNA中。 研究的通訊作者、麻省大學醫學院RNA療法研究所的王文說：“為了更好地理解腫瘤生物學、開展臨床前研究以及
NEPA21電轉在工業微藻中高效無轉基因靶向誘變的應用
Highly efficient transgene-free targeted mutagenesis and single-stranded oligodeoxynucleotide-mediated precise knock-in in the industrial microalg
CRISPR－實驗利器：BTX－電轉儀
什么是 CRISPR?CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）, 是細菌中用于與病毒進行斗爭的免疫武器。 生命進化歷史上，細菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進化出 CRISPR 系統，利用這個系統，細菌可以不動
基因編輯那么熱，可是你都會用了嗎？
基因編輯是一種遺傳工程技術，針對某個序列已知但功能未知的序列，通過改變生物的遺傳基因，使其特定的基因功能喪失作用，通過研究對生物體造成的影響，進而推測出該基因的生物學功能。本文為你科普基因編輯三大技術： 基因敲除 進行DNA水平編輯。一般用于構建基因敲除鼠模型。 CRISPR/Cas9：C
用CRISPR/cas9編輯精原細胞基因
利用CRISPR/Cas9 系統對胚胎進行基因編輯，可有效地產生具有靶向基因組修飾的生物體。三月十二日在Cell子刊《Cell Reports》發表的一項研究中，來自德克薩斯大學西南醫學中心、芝加哥大學和猶他大學等處的研究人員，用CRISPR / cas9技術對大鼠的精原細胞進行基因編輯，為在大
中科院學者連發兩篇Cell－Res文章獲CRISPR技術重要突破
基因編輯工具的快速發展令整個生物學研究領域瘋狂，目前第三代DNA剪刀的主角是CRISPR，這是一種比其前身更快更便宜的工具。近期來自中科院神經科學研究所的楊輝研究組與多個研究組合作，在Cell Research雜志上發表了多篇文章，獲得了CRISPR-Cas9技術的重要突破。 研究組成員通過與
CRISPR新改良實現高效基因敲入
細菌一直在與病毒或入侵核酸進行斗爭，為此它們演化出了多種防御機制，CRISPR/Cas適應性免疫系統就是其中之一。該系統能在小RNA分子（crRNA）的引導下，靶標并沉默入侵者的遺傳物質。 發現CRISPR系統之后不久，人們就開始用它來進行特異性的基因編輯。這種基因編輯技術更容易操
基因編輯CRISPR/Cas9新技術路在何方？
CRISPR/Cas9這項新技術使人們能更精準地對DNA代碼進行控制，引發了遺傳學和細胞生物學領域的革新，科學家們對它寄予厚望，希望借助它的力量，治療包括癌癥在內的疾病并進一步解開人類細胞身上籠罩的謎團。 但這一基因編輯技術也引發了科學家們的憂慮。據美國趣味科學網站報道，有科學家擔心，這一新工
頂級期刊：用光控制CRISPR/Cas9基因編輯
一段時間以來，科學家們一直都在嘗試操縱基因。最近，美國匹茲堡大學的Alexander Deiters就發現了一種方式，以更高的精度來控制這個過程。他采用的是光。Deiters及其研究團隊首次實現了這一技術突破，他們將相關研究結果發表在最近的化學領域頂級期刊《美國化學學會雜志》（Journal o
PNAS：利用RNA控制CRISPR/Cas9基因編輯
在過去的幾年里，研究人員找到了一種方法利用天然存在的細菌免疫系統CRISPR/Cas9來失活或糾正任何生物體內的特定基因。然而，CRISPR/Cas9持續地發揮基因編輯活性，帶來了額外編輯不必要位點的風險。 現在，來自加州大學圣地亞哥醫學院、Ludwig癌癥研究所和艾希司制藥公司（Isis P
CRISPR/Cas9：基因編輯的歷史與發展
CRISPR/Cas系統是細菌和古菌特有的一種天然防御系統，用于抵抗病毒或外源性質粒的侵害。當外源基因入侵時，該防御系統的 CRISPR 序列會表達與入侵基因組序列相識別的 RNA，然后 CRISPR 相關酶(Cas)在序列識別處切割外源基因組DNA，從而達到防御目的。根據Cas蛋白的特點，可將CR
吉林大學：利用CRISPR/Cas9構建轉基因豬
來自吉林大學的研究人員報告稱，他們利用CRISPR/Cas9系統高效構建出了myostatin (MSTN)基因突變豬。這一研究成果發布在11月13日的《Scientific Reports》雜志上。吉林大學的逄大欣(Daxin Pang)教授及焦虎平（Huping Jiao）是這篇論文的共同通
吉林大學：利用CRISPR/Cas9構建轉基因豬
來自吉林大學的研究人員報告稱，他們利用CRISPR/Cas9系統高效構建出了myostatin (MSTN)基因突變豬。這一研究成果發布在11月13日的《Scientific Reports》雜志上。吉林大學的逄大欣(Daxin Pang)教授及焦虎平（Huping Jiao）是這篇論
CRISPRCas9技術及其在腫瘤研究中的應用
CRISPR的前世今生1987年，日本科學家在研究大腸桿菌的時候發現其基因組上存在一些看起來“奇怪”的重復結構：有一段29堿基的序列反復出現了5次，且兩兩之間被32個堿基形成的序列隔開了！但這個發現在當時并沒有引起科學界的很大關注，畢竟在自然界的生物體內，各種奇奇怪怪的發現實在太多。然后僅僅幾年后，
CRISPRCas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（一）
IDT Alt-R? CRISPR-Cas9基因編輯系統?IDT（Integrated DNA Technologies）作為核酸定制合成領域的知名企業，依托30年來的技術研發，推出了Alt-R?系列CRISPR-Cas9基因編輯產品，通過對gRNA序列、Cas9核酸酶優化，對RNP轉染效率、同
中國農大特聘教授發表CRISPR文章
2015年12月10日，中國農業大學特聘教授韓建永帶領的研究小組，以Letter的形式在《Protein & Cell》雜志上發表題為“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRISPR-
中國農大特聘教授發表CRISPR文章
2015年12月10日，中國農業大學特聘教授韓建永帶領的研究小組，以Letter的形式在《Protein & Cell》雜志上發表題為“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRISPR-
無需新gRNA質粒的CRISPR/Cas9高效基因組編輯技術：CAGO
CRISPR/Cas9作為一項革命性的基因組編輯技術已廣泛應用于多種生物的基因組編輯，該技術在具體應用中存在一些問題，例如在基因組中存在的“PAM-free”和“CRISPR-tolerant”等區域無法使用傳統的CRISPR/Cas9技術進行編輯；基因組中每個位點的編輯都需要構建特定的gRNA
檢測CRISPR/Cas9基因編輯系統的副作用
目前，弗吉尼亞大學醫學院的研究人員設計出一種方法，檢測風靡科學界的CRISPR/Cas9基因編輯系統中意想不到的副作用。相關研究結果發表在最近的《Nature Biotechnology》。 稱為CRISPR的基因打靶系統，可讓我們編輯基因組中特定靶位點的遺傳信息。這種新方法揭示的系統，有可能
Cell子刊介紹一種高效精確的基因敲入技術：TildCRISPR
一組研究人員設計了一種新型基因靶向整合策略Tild-CRISPR，它可以在小鼠和人的細胞中實現高效精確的基因敲入。Tild-CRISPR不僅適用于高效地構建小鼠動物模型，同時為研究體內的基因功能以及開發潛在的基因療法提供新思路。 這一研究成果公布在Developmental Cell期刊上，題
電轉儀助力CRISPR編輯iPSC新進展:－協同基因編輯效應
2006年，日本科學家山中伸彌（Shinya Yamanaka）教授利用逆轉錄病毒將4個轉錄因子轉入成體細胞，將其轉變為誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。從此后，誘導多潛能干細胞研究領域取得了極大進步，被用于研究人類疾病，目前已經有多項研
李博文等開發新型LNP載體，可高效mRNA遞送及基因編輯
先天性肺部疾病，例如表面活性蛋白缺乏癥、囊性纖維化、α-1抗胰蛋白酶缺乏癥等等，會導致終身發病甚至是死亡。雖然這些疾病的遺傳機制已經被深入研究，但仍然缺乏有效的治療方案。最近，可吸入式mRNA遞送平臺備受制藥業和學術界的關注。這種平臺可以提供非侵入性、直接進入肺上皮細胞和肺泡的RNA藥物，在應用
應用優化CRISPR技術建立基因完全敲除的小鼠及猴
6月6日，《細胞研究》在線發表了一項成果，應用改進的“C-CRISPR”技術可以獲得單基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴。這項研究由中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心的楊輝研究組、熊志奇研究組以及神經所蘇州非人靈長類研究平臺孫強團隊合作完成。該研究通過將多個
基因編輯CRISPR/Cas9技術構建轉基因小鼠的優勢
當當當！敲黑板！！看這里！！！2016年國家自然科學基金放榜已經有一段時間啦！各位老師是不是還沉浸在喜悅中不能自拔呢？O(∩_∩)O清醒一下，我們的目標是：基金年年有，明年中更多！每年的國家自然科學基金都是中國科研領域的風向標！通過分析國自然，可以看出最新的研究熱點、目前國家重視的科目、臨床上亟待解
基因編輯CRISPR/Cas9技術構建轉基因小鼠的優勢
當當當！敲黑板！！看這里！！！ 2016年國家自然科學基金放榜已經有一段時間啦！各位老師是不是還沉浸在喜悅中不能自拔呢？O(∩_∩)O清醒一下，我們的目標是：基金年年有，明年中更多！ 每年的國家自然科學基金都是中國科研領域的風向標！通過分析國自然，可以看出最新的研究熱點、目前國家重視
基因電轉化技術的創新介紹
常規的轉染包括脂質體，電轉化和病毒法。普通的293、Hela等細胞系，脂質體轉染也能達到70-80%。而對于其他一些極難轉染的細胞，如原代神經元，原代神經干細胞，免疫細胞等來說，脂質體轉染不僅轉化效率很低（約10%），而且細胞死亡率極高。因此有些研究人員不得不轉用更加昂貴而且毒性更大的病毒包被法。病