吖啶橙和溴化乙啶雙重染色
染料同時染色細胞，為鑒別凋亡細胞和壞死細胞提供較好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性較高的染料 溴化乙啶(EB）正常細胞： AO－ 綠色熒光強，EB－ 染色紅色熒光較弱；凋亡細胞： AO－ 綠色熒光強度弱減，EB－ 染色紅色熒光加強；壞死細胞： AO－ 綠色熒光強度弱或消失，EB－ 染色紅色熒光強（EB可誘導AO的淬滅）。 ......閱讀全文
吖啶橙和溴化乙啶雙重染色
染料同時染色細胞，為鑒別凋亡細胞和壞死細胞提供較好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性較高的染料?溴化乙啶(EB）正常細胞： AO－ 綠色熒光強，EB－ 染色紅色熒光較弱；凋亡細胞： AO－ 綠色熒光強度弱減，EB－ 染色紅色熒光加強；壞死細胞： AO－ 綠色熒光強度弱或消失，EB－ 染色紅色熒光
吖啶橙熒光染色
【臨床意義】 紅細胞系統細胞核發深綠色熒光。原始紅細胞有時可看到粉紅色核仁。粒細胞系統細胞核發黃綠色熒光。原始粒細胞有時也可看到粉紅色的核仁。但嗜酸性粒細胞的細胞核發深綠色熒光，比紅細胞系統還要深一些。 淋巴細胞核的熒光稍帶灰綠色。 各系統細胞的胞漿內因含有核糖核酸（RNA），所以均發紅色熒光
吖啶橙/溴化乙錠雙熒光染色
AO / EB原理與流程zhongyisheng:1、原理：吖啶橙(AO)能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，使之發出明亮的綠色熒光。溴乙錠(E僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現為染色增強，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結構。非凋亡細胞核呈現熒光深淺
雙重染色抗體的選擇
用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一，二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
培養細胞的染色實驗——吖啶橙染色熒光觀察法
實驗方法原理吖啶橙（Acridine Oringe：AO）是一種常用熒光染料，用于直接染色觀察活細胞或固定染色觀察細胞均可。吖啶橙對DNA和RNA都能染色，快速、簡便和有一定的特異性。吖啶橙對活細胞毒性小，配成2×10－4～1×10－4?可用于直接染色觀察法更好。實驗材料細胞試劑、試劑盒酒精PBSC
吖啶橙的顯色過程
在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光，由
吖啶橙的顯色過程
在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光，由
吖啶橙的顯色過程
在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光，由
吖啶橙的主要用途
主要用作熒光指示劑，與細胞中DNA和RNA結合量存在差別，可發出不同顏色的熒光，與DNA結合量少發綠色熒光，與RNA結合量多發桔黃色或桔紅色熒光，該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色。因此，在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中
關于吖啶橙的基本介紹
吖啶橙（Acridine Orange）3，6－（二甲胺基）吖啶鹽酸鹽，分子式C17H19N3 · HCl · ZnCl?, 分子量438.12g/mol,是一種熒光色素，其檢測激發濾光片波長488nm,阻斷濾光片波長515nm。它與細胞中DNA和RNA結合量存在差別，可發出不同顏色的熒光，與D
細胞凋亡的形態：生化性質實驗——吖啶橙染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒染液儀器、耗材試管實驗步驟1b)將1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃試管的底部。加入25μL細胞懸浮液，轉動手腕輕柔地混合。2b)將10μL的該混合液放在一干凈的顯微鏡載玻片上，蓋上22 mm2的蓋玻片。用一 落射光顯微鏡的40×到60×的干物鏡和一適合觀察熒
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結合后發不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結合后發不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟
1．一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。2．二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫
細胞凋亡的形態：生化性質實驗——吖啶橙或溴化乙錠染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒染液儀器、耗材試管實驗步驟1c)將1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃試管的底部。加入25μL細胞懸浮液，用手腕輕柔地混合。2c)將10μL的該混合液放在一干凈的顯微鏡載玻片上，蓋上22 mm2的蓋玻片。用一 落射光顯微鏡的40×到60×的干物鏡和一適合觀察熒光
雙酶雙底物的雙重免疫染色—多種組織抗原配對的雙重酶
改良的 EnVision-HRP/AP 雙酶雙底物的雙重免疫染色（間接法）——Ki-67-CK20 等多種組織抗原配對的雙重酶實驗步驟1. 恒冷切片或石蠟切片，厚 4～6 μm，常規處理。2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH 7.8）或 0.3％H2O2/甲醇，
雙酶雙底物的雙重免疫染色—淋巴瘤輕鏈κ、λ的雙重酶標記
實驗步驟1. 石蠟切片常規脫蠟至水（若用含汞固定液固定的組織，則需用內含 0.5％ 碘的乙醇溶液脫汞 5 min，乙醇濃度為 70％，經自來水洗后以 2.5％ 硫代硫酸鈉浸洗 1 min，水洗）。2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自來水洗，蒸餾水洗，入 PBS（0.01mol/L
細胞凋亡（apoptosis）的檢測2
【材料】１試劑：吖啶橙貯存液（10mg吖啶橙溶解于100mLPBS中，過濾，4℃避光保存），0.01mol/L、Ph6.8PBS。２器材：吸管，試管，玻片，熒光顯微鏡。【方法】１制備待檢活細胞懸液，濃度約為1×10７/mL。２取95uL的細胞懸液，加5uL的吖啶橙貯存液混勻。３吸一滴混合液
顯微鏡形態學觀察細胞凋亡
實驗方法原理細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征，如胞膜有小泡生成，細胞固縮，核質濃縮，染色質凝聚，DNA降解，胞膜最終形成許多凋亡小體，然后被鄰近的巨噬細胞所吞噬。實驗材料Hela細胞Jurkat細胞試劑、試劑盒蒸餾水盼藍儀器、耗材光學顯微鏡倒置顯微鏡熒光顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡透射電子顯微鏡實
顯微鏡形態學觀察細胞凋亡
顯微鏡檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征，如胞膜有小泡生成，細胞固縮，核質濃縮，染色質凝聚，DNA降解，胞膜最終形成許多凋亡小體，然后
顯微鏡形態學觀察細胞凋亡
顯微鏡檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征，如胞膜有小泡生成，細胞固縮，核質濃縮，染色質凝聚，DNA降解，胞膜最終形成許多凋亡小體，然后
顯微鏡形態學觀察細胞凋亡——顯微鏡檢測法
用透射電鏡觀察細胞凋亡可以用于：（1）可清楚地觀察到細胞結構在凋亡不同時期的變化；（2）電鏡形態學觀察是迄今為止判斷凋亡最經典、最可靠的方法, 被認為是確定細胞凋亡的金標準。實驗方法原理細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征，如胞膜有小泡生成，細胞固縮，核質濃縮，染色質凝聚，DNA降解，胞膜最終形成許
吖啶橙的計算化學數據
疏水參數計算參考值（XlogP）：無氫鍵供體數量：0氫鍵受體數量：3可旋轉化學鍵數量：2互變異構體數量：0拓撲分子極性表面積：19.4重原子數量：20表面電荷：0復雜度：298同位素原子數量：0確定原子立構中心數：:0不確定原子立構中心數量：0確定化學鍵立構中心數量：0不確定化學鍵立構中心數量：0共
吖啶橙的理化性質
密度：1.169g/cm3熔點：165oC沸點：468.6oC閃點：237.2oC折射率：1.71外觀：棕色粉末
吖啶橙的結構功能特點
吖啶橙，化學名稱為3,6-二(二甲基胺)吖啶、溶劑橙15，是一種有機化合物，化學式為C17H19N3，是一種熒光色素，主要用作熒光指示劑，與細胞中DNA和RNA結合量存在差別，可發出不同顏色的熒光，與DNA結合量少發綠色熒光，與RNA結合量多發桔黃色或桔紅色熒光，該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使
光鏡下雙/多重免疫標記實驗——雙重免疫熒光染色
實驗步驟1. 古茲菲德-雅各氏病（CJD）病人的尸解腦組織，4％ 中性甲醛固定，石蠟包埋，連續切片，厚 5 μm（貼片前的載玻片應預涂不含有熒光色素的黏合劑）。2. 常規脫蠟，水化。3. 抗原修復（檸槺酸鹽緩沖液 pH 6.0 中，高壓滅菌器加熱 100℃，20 min）及 96％ 甲酸孵育 2 m
雙重和多重原位雜交(hybridization－in－situ)技術
為了在同一標本上或同一細胞內同時檢測是否存在兩種或兩種以上的靶核酸序列。可應用雙重或多重原位雜交技術．即以兩種或多種標記探針與靶核酸雜交。然后利用不同的檢測手段分別顯示各種靶核酸的存在和分布。該技術與免疫組織化學技術中的雙重或多重標記相似，除了探針本身的特異性外，對結果的干擾主要來自標記物及檢測試劑
吖啶橙的基本信息介紹
簡稱：AO AO能與無機酸形成鹽，具有綠色熒光。如果再稀釋的話，便水解成游離的AO，而呈現紫色熒光。 吖啶橙/溴化乙錠雙熒光染色測定PC12細胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）： （1）細胞爬片：在6孔培養板中預先置入玻璃蓋玻片，接種細
細菌的簡單染色和革蘭氏染色
（一）實驗目的：學習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。（二）實驗原理：用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷，能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低，當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷，所以通常采用堿性染料（如美藍、結晶紫、堿性復紅或孔
細菌的簡單染色和革蘭氏染色
（一）實驗目的：學習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。 （二）實驗原理：用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷，能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低，當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷，所以通常采用堿性染料（如美藍、結晶紫、堿性復紅或