培養細胞的染色實驗——吖啶橙染色熒光觀察法
實驗方法原理吖啶橙（Acridine Oringe：AO）是一種常用熒光染料，用于直接染色觀察活細胞或固定染色觀察細胞均可。吖啶橙對DNA和RNA都能染色，快速、簡便和有一定的特異性。吖啶橙對活細胞毒性小，配成2×10－4～1×10－4 可用于直接染色觀察法更好。實驗材料細胞試劑、試劑盒酒精PBSCaCl2醋酸實驗步驟1. 用蓋片單層培養細胞，從瓶中取出后速用溫Hanks液漂洗3~5 秒，以去除培養基中血清（于此步可進行直接染色觀察活細胞）；2. 投入95 %酒精或醋酸/甲醇固定15~30 分鐘，微干（蓋片邊緣接觸濾紙）；3. 1 %醋酸作用30 秒；4. 1×10－4 吖啶橙染30 秒或1 分鐘；5. 0.1 M CaCl2處理30 秒~2 分鐘；6. PBS漂洗3 次，每次數秒；7. PBS封片，熒光顯微鏡下直接觀察并拍照......閱讀全文
培養細胞的染色實驗——吖啶橙染色熒光觀察法
實驗方法原理吖啶橙（Acridine Oringe：AO）是一種常用熒光染料，用于直接染色觀察活細胞或固定染色觀察細胞均可。吖啶橙對DNA和RNA都能染色，快速、簡便和有一定的特異性。吖啶橙對活細胞毒性小，配成2×10－4～1×10－4?可用于直接染色觀察法更好。實驗材料細胞試劑、試劑盒酒精PBSC
吖啶橙熒光染色
【臨床意義】 紅細胞系統細胞核發深綠色熒光。原始紅細胞有時可看到粉紅色核仁。粒細胞系統細胞核發黃綠色熒光。原始粒細胞有時也可看到粉紅色的核仁。但嗜酸性粒細胞的細胞核發深綠色熒光，比紅細胞系統還要深一些。 淋巴細胞核的熒光稍帶灰綠色。 各系統細胞的胞漿內因含有核糖核酸（RNA），所以均發紅色熒光
吖啶橙/溴化乙錠雙熒光染色
AO / EB原理與流程zhongyisheng:1、原理：吖啶橙(AO)能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，使之發出明亮的綠色熒光。溴乙錠(E僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現為染色增強，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結構。非凋亡細胞核呈現熒光深淺
培養細胞的染色實驗
Giemsa染色法 蘇木精伊紅染色法 Feulgen染色法 吖啶橙染色熒光觀察法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Giemsa 染色是最常用的方法
培養細胞的染色實驗——Feulgen染色法
實驗方法原理此染色法為Feulgen早在1924年提出的一種鑒別細胞中DNA的組織化學方法。細胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解離脫氧核糖核酸，使嘌呤堿基與糖苷犍破壞，嘌呤堿脫掉，脫氧核糖的中的醛基游離；醛基能與Schiff試劑相結合，形成一種紫色的復合物。本方法中酸的離解根重要，若溫度過低
培養細胞的染色實驗——Giemsa染色法
實驗方法原理Giemsa 染色是最常用的方法之一，它簡便、快速，適用于多種細胞和染色體染色。試劑、試劑盒Giemse甘油甲醇Sorensen儀器、耗材滴管玻璃片實驗步驟1. ?染液制備（1）稱Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研缽內先用少量甘油與Giemsa充分混合，研磨至無顆粒；（2）再
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結合后發不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結合后發不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
細胞凋亡的形態：生化性質實驗——吖啶橙染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒染液儀器、耗材試管實驗步驟1b)將1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃試管的底部。加入25μL細胞懸浮液，轉動手腕輕柔地混合。2b)將10μL的該混合液放在一干凈的顯微鏡載玻片上，蓋上22 mm2的蓋玻片。用一 落射光顯微鏡的40×到60×的干物鏡和一適合觀察熒
細胞免疫熒光染色實驗
實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
細胞免疫熒光染色實驗
實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
培養細胞的染色實驗——蘇木精伊紅染色法
培養細胞可用各種方法染色，有一般和特殊之分；一般染色為觀察細胞一般形態之用，特殊染色為用于觀察細胞的特殊成分和結構的染色方法。內容來源：組織培養和分子細胞學技術。實驗材料蘇木精試劑、試劑盒甘油冰醋酸伊紅銨礬儀器、耗材載玻片蓋玻片實驗步驟1. ?37 ℃溫BSS漂洗3 次，每次20 秒~1 分鐘；中性
植物細胞有絲分裂觀察——染色觀察法
實驗材料蠶豆側根試劑、試劑盒結晶紫 醋酸洋紅 醋酸地衣紅 改良石炭酸品紅 鹽酸儀器、耗材鑷子 載玻片 吸水紙 顯微鏡 蓋玻片 酒精燈刀片中期 （metaphase）從染色體排列到赤道面上，到它們的染色單體開始分向兩極之前，這段時間稱為中期。有時把前中期也包括在中期之內。中期染色體在赤道面形成所謂赤道
細胞凋亡的形態：生化性質實驗——吖啶橙或溴化乙錠染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒染液儀器、耗材試管實驗步驟1c)將1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃試管的底部。加入25μL細胞懸浮液，用手腕輕柔地混合。2c)將10μL的該混合液放在一干凈的顯微鏡載玻片上，蓋上22 mm2的蓋玻片。用一 落射光顯微鏡的40×到60×的干物鏡和一適合觀察熒光
果蠅唾腺染色體制片實驗_觀察法
實驗方法原理果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態，由于多次復制而不分開，因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.，本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,，壓制染色體玻片標本的方法，觀察多線染色體的特征。實驗材料果蠅試劑、試劑盒水醋酸洋紅儀器、耗材解剖針雙筒解
染色體組型分析實驗_觀察法
實驗方法原理染色體組型分析是對染色體組中處于有絲分裂中期時染色體的數目、大小、形態、著絲點的位置以及次縊痕、隨體的有無等形態特征作一描述。將一個細胞內的染色體按照一定的順序排列起來所構成的圖像就稱為該細胞的核型。?染色體的排列原則：①染色體的大小（即長度），②著絲粒的位置，③特殊標記。實驗材料小鼠儀
吖啶橙和溴化乙啶雙重染色
染料同時染色細胞，為鑒別凋亡細胞和壞死細胞提供較好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性較高的染料?溴化乙啶(EB）正常細胞： AO－ 綠色熒光強，EB－ 染色紅色熒光較弱；凋亡細胞： AO－ 綠色熒光強度弱減，EB－ 染色紅色熒光加強；壞死細胞： AO－ 綠色熒光強度弱或消失，EB－ 染色紅色熒光
培養細胞染色體顯示法實驗
實驗方法原理 培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材 酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟 1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；
熒光免疫染色和DAPI染色實驗步驟
免疫染色實驗方法和步驟免疫染色(immunol staining)包括免疫熒光(immunol fluorescence)、免疫組化(immunol histochemistry)、免疫細胞化學(immunol cytochemistry)等，可以參考如下步驟進行操作。?1. 樣品準備(Sample
SYPRO－Ruby－熒光染色實驗
實驗方法原理到目前為止，在常用來檢測經聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的蛋白質的方法中，SYPRORUBY 可能是最靈敏的突光染色方法了，它能檢測出僅含 1?2ng 蛋白的條帶。遺憾的是，如此微量的蛋白條帶經染色后用肉眼卻不可見，需要一個熒光掃描儀檢測（SYPRORuby 的最大激發光和發射光的波長分別是
SYPRO－Orange－熒光染色實驗
實驗材料單向凝膠電泳分離后的蛋白樣品儀器、耗材鋁箔熒光掃描儀塑料容器實驗步驟1.電泳結束后，將凝膠置于盛有試劑 A 的塑料容器中，試劑 A 的量要足夠覆蓋整塊凝股。例如，一’塊典型的 mini 膠（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的試劑 A。2.用鋁箔遮蓋好容器
細胞免疫熒光染色
實驗概要細胞免疫熒光染色實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1
培養細胞染色體顯示法實驗——傳代培養細胞染色體顯示法
實驗方法原理培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料細胞試劑、試劑盒HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；2. ?加
細胞鐵染色實驗
實驗方法原理 骨髓內的鐵蛋白及含鐵血黃素（細胞外鐵）和幼稚紅細胞的鐵粒（細胞內鐵）在鹽酸環境下與亞鐵氰化鉀作用生成亞鐵氰化鐵，即普魯士藍反應．試劑、試劑盒 鹽酸溶液亞鐵氰化鉀溶液堿性復紅貯存液復染應用液甲醛實驗步驟 一、 實驗試劑：1. 4％鹽酸溶液，小心取濃鹽酸（38％）40ml慢慢滴加至冷蒸
細胞鐵染色實驗
實驗方法原理骨髓內的鐵蛋白及含鐵血黃素（細胞外鐵）和幼稚紅細胞的鐵粒（細胞內鐵）在鹽酸環境下與亞鐵氰化鉀作用生成亞鐵氰化鐵，即普魯士藍反應．試劑、試劑盒鹽酸溶液亞鐵氰化鉀溶液堿性復紅貯存液復染應用液甲醛實驗步驟一、 實驗試劑：1. 4％鹽酸溶液，小心取濃鹽酸（38％）40ml慢慢滴加至冷蒸餾水340
病原性球菌的形態染色及培養實驗——形態染色
實驗步驟一、病原性球菌形態染色特征觀察觀察葡萄球菌，鏈球菌，肺炎球菌，腦膜炎球菌及淋球菌革蘭染色標本片。注意各。菌的形態，排列及染色性。二、病原性球菌培養特征觀察1.? 觀察金黃色葡萄球菌及表皮葡萄球菌在血平板上菌落的形態，大小，表面，邊緣，透明度，色素及溶血性，瓊脂斜面培養基上菌苔的色素，及甘露醇
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，離心
DNA熒光染色的樣品制備實驗
試劑、試劑盒PBS儀器、耗材DNA熒光染料流式細胞儀實驗步驟DNA是細胞內含量比較恒定的參量，隨著細胞增殖周期的各時相而發生變化。熒光染料（如PI）可選擇性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的雙螺旋堿基之間，與細胞特異性結合，DNA含量與熒光染料的結合量成正比，因此通過測定熒光強度可獲知細胞的增殖情況
DNA熒光染色的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 儀器、耗材 DNA熒光染料 流式細胞儀 實驗步驟