酶活性測定條件的選擇和限定
僅在一定條件下酶反應速度v才和酶量成正比例。一定條件是什么？這些條件之間有無主次關系？如何選擇合適的測定條件？這些都是實驗室工作者在設計或選擇測酶活性濃度方法時必須面對的問題。 首先可從理論上探討在什么特定情況下的反應速度才可能與酶量成正比例。酶的整個反應過程可簡化如下： 式中Kp可看成為ES的解離常數.Michaclis和Menten通過推導可得出下式方程式 此式中V為最大反應速度，對一定濃度的酶而言為一常數。Km為實驗室工作所熟系的米氏常數。上式也可改寫為： Kp和Km雖為常數，但[S]為變量，因此在一般情況下不可能為常數，即v≠k[E]，從理論上很清楚說明反應速度v和酶量E之間在絕大多數條件下只存正比，即v∝[E]。而非正比例關系。但在底物[S]濃度很大，遠遠超過Km的特殊條件下Km值由于相對很小可忽略不計。此式可變為： 由于底物[S]濃度很大，使酶飽和。ES已達極限，反應速度不再增加，故此時反應速度為最大反應V......閱讀全文
酶活性測定條件的選擇和限定
僅在一定條件下酶反應速度v才和酶量成正比例。一定條件是什么？這些條件之間有無主次關系？如何選擇合適的測定條件？這些都是實驗室工作者在設計或選擇測酶活性濃度方法時必須面對的問題。 首先可從理論上探討在什么特定情況下的反應速度才可能與酶量成正比例。酶的整個反應過程可簡化如下： 式中Kp可看成為ES的
酶活性測定條件的選擇和限定2
曲線A：V對pH作圖曲線B：酶先在pH5及pH8預孵育后，在pH6.8測活性 氫離子可以通過多種途徑影響酶催化反應。如在脫氫酶反應中往往需要氫離子參加，也可能產生氫離子，從理論上可以將氫離子看成是該反應的底物和產物之一。此外，當pH變化時，可影響到底物、酶、酶-底物復合物的解離狀態和構型，甚至還
酶活性和質量測定方法及其評價
酶測定包括酶量測定和酶活性測定。酶在體液中含量極微，因此臨床上大都采用酶活性測定，以酶活性間接表示酶量。酶活性的概念：酶活性指酶催化反應的能力即酶促反應速度。反應速度是指在規定條件下單位時間內底物的減少量或產物的生成量。1.酶活性測定方法（1）按反應時間分類法1）定時法：（兩點法） 通過測定酶反應開
酶活性和質量測定方法及其評價
1.酶活性測定方法 （1）按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。20世紀50年代中期開始采用連續監測法。這種方法在自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受
酶活性測定的方式
酶促反應速度的測定可采用兩種方式： 一、測定完成一定量反應所需的時間； 二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法，后者稱為動力學法。 終點法 該方式是在特定條件下，將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物，然后根據反應進行到某一程度（即達到某一指標）所需要的時間長短來估計酶的活力。 其
酶活性的測定方法
一般采用測定酶促反應初速度的方法來測定活力，因為此時干擾因素較少，速度保持恒定。反應速度的單位是濃度/單位時間，可用底物減少或產物增加的量來表示。因為產物濃度從無到有，變化較大，而底物往往過量，其變化不易測準，所以多用產物來測定
酶活性的測定實驗
連續性檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示，或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量
酶活性的測定實驗
酶活性的測定可應用于：（1）酶動力學的研究；（2）酶抑制的研究。實驗方法原理1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示，或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量的量度，取決于指定的條件。SI單位是katal，1 katal = 1 mol /s，更實際
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L＝K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑．2. 開機預溫達37度．3. 選取測定程序．4. 測試：加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度．以后每隔30秒測定一次．5. 實驗結果：計算ΔA/min求出測定結果．
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L＝K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑．2. 開機預溫達37度．3. 選取測定程序．4. 測試：加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度．以后每隔30秒測定一次．5. 實驗結果：計算ΔA/min求出測定結果．
原子吸收的測定條件選擇
測定條件該如何選擇 1、分析線的選擇： 最適宜的分析線，應視具體情況由實驗確定。 實驗方法：首先掃描空心陰極燈的發射光譜，了解有哪幾條可供選擇的譜線，然后噴入試液，根據吸收情況，選擇不受干擾而且吸光度值適度的譜線作為分析線。 2、狹縫寬度的選擇： 合適的狹縫寬度同樣
原子吸收的測定條件選擇
測定條件該如何選擇1、分析線的選擇：最適宜的分析線，應視具體情況由實驗確定。實驗方法：首先掃描空心陰極燈的發射光譜，了解有哪幾條可供選擇的譜線，然后噴入試液，根據吸收情況，選擇不受干擾而且吸光度值適度的譜線作為分析線。2、狹縫寬度的選擇：合適的狹縫寬度同樣應通過實驗確定，即將試液噴入火焰中，調節狹縫
熒光測定物理條件的選擇
熒光測定可變因素比較多，只有選好條件才能獲得滿意的激發和發射光譜。由于樣品和儀器各不相同，因此測定條件不能固定不變。應當尋找儀器最佳條件。? 燈電流?光源燈電流不能超過測定范圍，但為了提高測定靈敏度，可以調節燈電流到最大允許值。 波長掃描范圍：?對已知光譜特性的樣品，不需進行廣泛掃描。在測試一個未知
心肌肌原纖維ATP酶的提取和活性測定
心肌肌原纖維是興奮收縮耦聯的重要環節之一, 它直接決定著心肌收縮力的產生和發展。近年來, 隨著分子生物學技術的不斷發展, 使人們對心肌肌原纖維的分子結構有了更深入的了解和認識。 ?
淀粉酶的誘導、提取和活性測定實驗
實驗方法原理大麥（或小麥）種子萌發時，種胚產生GA3擴散到胚乳的糊粉層細胞（被稱為GA3反應的“靶細胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后進入胚乳，使貯藏的淀粉被水解為還原酶，因此，無胚種子不能釋放GA3，也不能形成與激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的釋放作用，從而誘導α-淀粉酶的合成。在一
淀粉酶的誘導、提取和活性測定實驗
實驗方法原理大麥（或小麥）種子萌發時，種胚產生GA3擴散到胚乳的糊粉層細胞（被稱為GA3反應的“靶細胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后進入胚乳，使貯藏的淀粉被水解為還原酶，因此，無胚種子不能釋放GA3，也不能形成與激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的釋放作用，從而誘導α-淀粉酶的合成。在一
淀粉酶的誘導、提取和活性測定實驗
實驗方法原理?大麥（或小麥）種子萌發時，種胚產生GA3擴散到胚乳的糊粉層細胞（被稱為GA3反應的“靶細胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后進入胚乳，使貯藏的淀粉被水解為還原酶，因此，無胚種子不能釋放GA3，也不能形成與激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的釋放作用，從而誘導α-淀粉酶的合成。在
脂肪酶的活性測定
方法：⒈粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的最
淀粉酶活性的測定
一、原理 淀粉酶（amylase）包括幾種催化特點不同的成員，其中α－淀粉酶隨機地作用于淀粉的非還原端，生成麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉漿的粘度下降，因此又稱為液化酶；β－淀粉酶每次從淀粉的非還端切下一分子麥芽糖，又被稱為糖化酶；葡萄糖淀粉酶則從淀粉的非還原端每次切下一個葡萄糖。
脂肪酶的活性測定
方法：⒈粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的最
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的影響
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的影
環境條件對淀粉酶活性的影響
一、目的植物組織中存在有淀粉酶（分α—、β—兩種），能將貯藏淀粉水解成麥芽糖。從而影響種子的萌發或植物的生長。本實驗的目的在于測定淀粉酶活性并觀察環境條件（如溫度、pH）及某些化學物質對淀粉酶活性的影響。二、原理淀粉酶的活性和其他酶一樣，受環境條件的影響，尤其是對溫度及pH的變化非常敏感，表現有最適
亞硝酸還原酶的酶活性測定
NiRs是胞內酶，其氧化還原反應過程中需要供體電子，且大多需要在厭氧條件下進行。因此體外檢測亞硝酸還原酶時需要在密閉無氧且有電子供體的情況下才能進行檢測。電子供體有甲基紫精、連二亞硫酸鈉和硫代硫酸鈉等 。
酶和抗體活性、結合物中酶含量及結合率的測定
? ⑴ 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原與抗體形成沉淀線，經PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時，將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色，如果出現應有的顏色反應，再用生理鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結合物既有酶的活性，也有抗體活性。良好的結合物在顯色后，瓊擴滴度應在1:16以上。另一個測定
鈣離子和鎂離子抑制胰蛋白酶活性的具體條件
鈣離子和鎂離子抑制胰蛋白酶活性的具體條件包括它們的濃度、反應體系的溫度、pH 值以及胰蛋白酶本身的純度和來源等。一般來說，當鈣離子和鎂離子的濃度達到一定水平時（通常較高）會對胰蛋白酶活性產生抑制。然而，確切的抑制濃度閾值會因實驗環境和胰蛋白酶的具體特性而有所不同。在常見的生理條件下（如溫度約 37°
胸腔積液檢查的酶活性測定
1．腺苷脫氨酶（adenosine deaminase, ADA）：在紅細胞和T細胞中ADA含量最豐富，結核性胸膜炎（Tuberculous Pleural Effusion，TPE）時，T細胞活性增強，故胸水ADA多>45 U/L，有助于區別結核性或癌性胸水。我們就此曾進行薈萃分析[1]，旨在
豆粕中尿素酶活性的測定
實驗材料 大豆 試劑、試劑盒 尿素緩沖溶液 鹽酸 氫氧化鈉 蒸餾水
豆粕中尿素酶活性的測定
一、實驗目的掌握測定尿素酶活性的各種方法的基本原理及方法步驟。?二、實驗原理將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合，在30℃保持30min后，尿素酶催化尿素水解產生氨的反應。用過量的鹽酸溶液中和所產生的氨，再用氫氧化標準溶液回滴。?三、實驗設備1、樣品篩：孔徑200μm；2、酸度計：精度0.02pH