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多年來，研究人員和患者一直都希望，胚胎干細胞（ESCs）——可形成體內幾乎任何類型的細胞——能給許多疾病提供見解，甚至被用來治療疾病。 但是，因為無法將來自小鼠ESC的研究和工具轉移到人類研究，因此使這方面的進展受到限制，在某種程度上是因為人類胚胎干細胞是“始發態（primed）”的，塑性略微低于小鼠細胞。 最近，美國Whitehead生物醫學研究所Rudolf Jaenisch實驗室的科學家Thorold Theunissen、Benjamin Powell和Haoyi Wang，發現了如何操控和維持人類ESCs，使其處于一種類似小鼠ESCs的“原態”或基礎多能狀態，而無需使用任何重編程因子。他們的研究結果發表在本周的《Cell Stem Cell》雜志。 原態的小鼠ESCs已經得到了充分的研究，科學家們已經充分了解它們如何起作用并成長為更特化的細胞。但是，這種理解用于人類ESC研究時存在一定的限制，因為人類細胞看起......閱讀全文
8月23日，eLife 期刊在線發表了中國科學院腦科學與智能技術卓越創新中心/神經科學研究所、上海腦科學與類腦研究中心、神經科學國家重點實驗室何杰研究組題為《腦損傷激活斑馬魚視頂蓋放射狀膠質細胞的細胞周期進入隨機性及命運決定機制》的研究論文。該研究回答了兩個關于膠質細胞如何響應腦損傷的關鍵性問題
感受態細胞的制備(一)制備新鮮或冷凍的大腸桿菌感受態細胞 下述操作方案是由Hanahan(1983)提供的，所制備的大腸桿菌DHl、DH5和ＭＭ249感受態細胞培養物能使每微克超螺旋ＤＮＡ以≥5x108轉化菌落的頻率進行轉化，其他大多數大腸桿菌菌株的最高轉化率大約只有前述菌株的1/10
2019年10月21日，北京大學生物醫學前沿創新中心（BIOPIC）、生命科學學院白凡課題組與美國亞利桑那大學姚廣課題組合作在《美國國家科學院院刊》（PNAS）上發表題為“Graded regulation of cellular quiescence depth between prolife
8月23日，eLife 期刊在線發表了中國科學院腦科學與智能技術卓越創新中心/神經科學研究所、上海腦科學與類腦研究中心、神經科學國家重點實驗室何杰研究組題為《腦損傷激活斑馬魚視頂蓋放射狀膠質細胞的細胞周期進入隨機性及命運決定機制》的研究論文。該研究回答了兩個關于膠質細胞如何響應腦損傷的關鍵性問題
腫瘤組織中免疫細胞的組成在免疫治療中起關鍵作用，然而人類腫瘤組織中免疫細胞的異質性和分化途徑還有待研究。李漢杰博士等通過對25名黑色素瘤患者腫瘤中免疫細胞的單細胞轉錄組測序和單細胞TCR測序分析，發現大量的CD8 T細胞的轉錄組呈連續性梯度分布，跨越了從“過渡態”到“功能失調狀態”的分化途徑。相
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
膠質細胞是人腦中數量最多的細胞。但是，在人腦創傷情況下，膠質細胞的潛在反應和作用還很不清楚？中國科學院腦科學與智能技術卓越創新中心何杰研究組開展的研究，回答了兩個關于膠質細胞如何響應腦損傷的關鍵性問題：損傷激活的膠質細胞如何進入細胞周期？損傷激活的膠質細胞如何選擇產生膠質細胞還是神經元？近日，e
實驗概要轉化是將外源基因引入受體細胞，使之獲得新的遺傳性狀的一種手段，它是微生物遺傳、分子遺傳、基因工程等研究領域的基本實驗技術。轉化過程所用的受體細胞經過一些特殊方法處理后，細胞膜的通透性發生了暫時性改變，成為允許外源DNA分子進入的狀態，這種細胞稱為感受態細胞。進入受體細胞的DNA分子通過復制，
一、目的1.了解感受態細胞生理特性及制備條件，掌握大腸桿菌感受態細胞制備方法。2.掌握質粒DNA 轉化大腸桿菌的方法，了解轉化的條件和利用半乳糖苷酶基因插入失活選擇重組質粒DNA 的原理。二、原理（一）大腸桿菌感受態細胞制備的原理所謂感受態，是指細菌生長過程中的某一階段的培養物，只有某一生長階段中的
來自華盛頓大學的研究人員發表了題為“Derivation of na?ve human embryonic stem cells”的文章，報道了非轉基因，初始原態人類多能干細胞的產生，并詳細介紹了兩種實驗方法路徑，這將有助于干細胞多能狀態的基礎研究和臨床研究。這一研究成果公布在《美國國家科學
PCR引物決定PCR的特異性，引物的設計就顯得尤為重要。下面以已知DNA序列設計引物為例介紹設計引物應考慮的幾個方面：1、GC比值：眾所周知,堿基對中的GC之間有三條氫鍵，AT之間有兩條氫鍵，GC和AT在引物序列中的合理比例是設定PCR中退火溫度的重要依據。通常在一個引物中GC和AT各半即可。2、長
實驗概要 獲得感受態細胞；制備含有目的片段的克隆。實驗原理 在自然條件下，很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內，但在人工構建的質粒載體中，一般缺乏此種轉移所必需的mob基因，因此不能自行完成從一個細胞到另一個細胞的接合轉移。如需
第一節 概 述 在自然條件下,很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內,但在人工構建的質粒載體中,一般缺乏此種轉移所必需的mob基因,因此不能自行完成從一個細胞到另一個細胞的接合轉移。如需將質粒載體轉移進受體細菌,需誘導受體細菌產生一種短暫的感受態以攝取外源DNA。轉化(Transfo
近日，來自美國西奈山醫學院的華人科學家Jianlong Wang在國際學術期刊Cell Stem Cell上發表了一項最新研究進展，他們通過研究發現了調節干細胞多能性狀態轉換的關鍵分子，對于未來應用干細胞開展再生醫學治療提供了新基礎。 隨著研究不斷深入，人們對于細胞多能性的認識也不斷增加，根據
摘要： 下文介紹大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化. 1、感受態細胞的概念重組 DNA 分子體外構建完成后,必須導入特定的宿主(受體)細胞,使之無性繁殖并高效表達外源基因或直接改變其遺傳性狀,這個導入過程及操作統稱為重組DNA分子的轉化.
實驗概要大腸桿菌感受態細胞的CaCl2法制備及質粒轉化。實驗原理處于對數生長期的細菌經CaCl2 處理后接受外源DNA的能力顯著增加。細菌處于容易吸收外源DNA的狀態叫感受態。 在自然條件下，很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內，但在人工構建的質粒載體中，一般缺乏此種轉移所必需的m
主要試劑1、LB培養基（滅菌后使用）胰蛋白胨（bacto-tryptone） 10g/L酵母提取液（bacto-yeast extract） 5 g/LNaCl 10g/L用NaOH調pH至7.0。2、LB固體平板每升液體培養基中加入15g瓊脂粉，高壓滅菌后倒入滅過菌的培養皿中。3、SOC培養基20
原始態（Na?ve state）多能性相關研究是近年來干細胞及重編程領域的研究熱點和難點，與傳統的primed狀態相比，Na?ve態捕獲了體內植入前胚胎發育的階段，具有更強的可塑性，在早期胚胎發育研究及未來臨床應用中具有更廣闊的前景。在近10年的研究中，科學家們取得了一系列重要進展，已建立了較為
對于新型冠狀病毒而言，由于缺乏抗病毒的特效藥，而對癥治療（人工肺呼吸、胃腸外營養等）并不直接作用于病毒，機體真正將病毒清除干凈，依靠的是免疫系統對病毒的殺滅，通俗地稱之為“免疫力”。免疫力言之朗朗上口，概括性好，已被普遍接受和廣泛使用。但免疫力這種說法，又極其抽象、模糊，不清楚其背后的物質基礎是
來自中科院上海生科院神經所的研究人員采用活體共聚焦和雙光子成像等多種技術，發現了靜息態小膠質細胞與神經元之間的雙向功能調節，這首次證明了神經元電活動可以調控靜息態小膠質細胞的運動，并揭示了小膠質細胞對神經元活動的穩態調節，為神經-免疫交叉領域提供了新的研究思路。相關成果公布在 Develop
第一節 轉化基因片段在體外只是一段核酸分子，是化學物質，無法表現出遺傳物質的生命活性。只有當其存在于活細胞后，生命的特征才能充分展示出來。在分子克隆實踐中，在體外操作的核酸分子只有進入細胞以后才能達到克隆的目的。一、重組DNA分子轉入原核生物細胞1. 重組質粒DNA分子轉化大腸桿菌轉化（transf
11月29日，Developmental Cell在線發表了中科院上海生科院神經所杜久林研究組題為《靜息態小膠質細胞與神經元之間的雙向功能調節》的研究論文。該工作由博士生李瑩和杜旭飛在杜久林研究員的指導下共同完成。 小膠質細胞是中樞神經系統中重要的免疫效應細胞。在病理狀態下，小
科研人員向細胞中加入“魔法藥水”。中科院廣州生物醫藥與健康研究院供圖 如何又快又好地誘導多能干細胞，最近有了新方法。科研人員們開發了一套“魔法藥水”，用它依次為細胞“洗澡”，便可又快又好地實現多種體細胞類型的“返老還童”。
實驗原理感受態就是細菌吸收轉化因子的生理狀態，只有發展為感受態的細胞才能穩定攝取外來的DNA分子。受體細胞經過一些特殊方法（如：電擊法，CaCl2等化學試劑法）的處理后，細胞膜的通透性發生變化，成為能容許帶有外源DNA的載體分子進入的感受態細胞。 目前常用的感受態細胞制備方法有CaCl2
2017年6月16日，北京大學生命科學學院生物動態光學成像中心湯富酬課題組在《Cell Research》雜志在線發表了題為“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研
2017年6月16日，北京大學生命科學學院生物動態光學成像中心湯富酬課題組在《Cell Research》雜志在線發表了題為“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
高效感受態細胞制作 實驗方法原理 主要原理是通過電擊法或CaCl2、RbCl(KCl)等化學試劑處
根據克隆選擇理論的中心宗旨，T細胞作為機體應對外界病原威脅的關鍵組成部分之一，需要被抗原激活從而發揮作用，然而，機體內絕大多數T細胞在整個生命過程中并非處于激活狀態而是由保持靜默的初始T細胞組成【1】。無論是是克隆選擇理論還是近年基于克隆選擇理論的研究都未指出負調節信號在維持初始T細胞靜默狀態中
實驗概要制備出感受態細胞實驗原理 感受態就是細菌吸收轉化因子的生理狀態，只有發展為感受態的細胞才能穩定攝取外來的DNA分子。受體細胞經過一些特殊方法（如：電擊法，CaCl2等化學試劑法）的處理后，細胞膜的通透性發生變化，成為能容許帶有外源DNA的