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  • 毛細管電泳的分離模式

    (1)毛細管區帶電泳,用以分析帶電溶質(為了降低電滲流和吸附現象,可將毛細管內壁涂層)。 (2)毛細管凝膠電泳,在毛細管中裝入單體,引發聚合形成凝膠,主要用于測定蛋白質、DNA等大分子化合物。另有將聚合物溶液等具有篩分作用的物質,如葡聚糖、聚環氧乙烷,裝人毛細管中進行分析,稱毛細管無膠篩分電泳,故有時將此種模式總稱為毛細管篩分電泳,下分為凝膠和無膠篩分兩類。 (3)膠束電動毛細管色譜,在緩沖液中加入離子型表面活性劑如十二烷基硫酸鈉,形成膠束,被分離物質在水相和膠束相(準固定相)之間發生分配并隨電滲流在毛細管內遷移,達到分離。本模式能用于中性物質的分離。 (4)親和毛細管電泳,在毛細管內壁涂布或在凝膠中加入親和配基,以親和力的不同達到分離目的。 (5)毛細管電色譜,是將HPLC的固定相填充到毛細管中或在毛細管內壁涂布固定相,以電滲流為流動相驅動力的色譜過程,此模式兼具電泳和液相色譜的分離機制。 ......閱讀全文

    毛細管電泳分離因素溫度

    溫度 溫度影響分離重現性和分離效率,控制溫度可以調控電滲流的大小。溫度升高,緩沖液粘度降低,管壁硅輕基解離能力增強,電滲速度變大,分析時間減短,分析效率提高。但溫度過高,會引起毛細管柱內徑向溫差增大,焦耳熱效應增強,柱效降低,分離效率也會降低。

    毛細管電泳影響分離因素

      毛細管電泳影響分離因素  1.緩沖液  緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。  緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電

    高效液相色譜分離模式的選擇

    基于樣品的一般性質選擇分離模式的基本原則。

    毛細管電泳技術的分離因素

    緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層

    分離電壓對毛細管電泳的影響

      在CE中,分離電壓也是控制電滲的一個重要參數。高電壓是實現CE快速、高效的前提,電壓升高,樣品的遷移加大,分析時間縮短,但毛細管中焦耳熱增大,基線穩定性降低,靈敏度降低;分離電壓越低,分離效果越好,分析時間延長,峰形變寬,導致分離效率降低。因此,相對較高的分離電壓會提高分離度和縮短分析時間,但電

    毛細管電泳各類物質的分離要點

    1.陰離子及有機酸: ?此類物質沒有紫外吸收,要采用間接檢測法 ?間接紫外法一般以鉻酸鈉等物質作為背景吸收物 ?CTAB通常用作電滲流反向劑,以加速出峰,提高峰的尖銳度 ?要使用反向極性分離 2.陽離子及金屬離子的分離: ?此類物質沒有紫外吸收,要采用間接檢測法 ?間接紫外法一般以氨基吡啶等物質作為

    高效毛細管電泳的分離原理總結

      1 毛細管區帶電泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE)   分離原理:毛細管區帶電泳出稱為自由溶液毛細管電泳,是毛細管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質的凈電荷與質量之間比值的差異,不同離子按照各自表面電荷密度的差異,以不同的速度在中解質中移動而

    高效毛細管電泳的分離原理總結

    1 毛細管區帶電泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE)分離原理:毛細管區帶電泳出稱為自由溶液毛細管電泳,是毛細管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質的凈電荷與質量之間比值的差異,不同離子按照各自表面電荷密度的差異,以不同的速度在中解質中移動而導致分離,它

    傳統電泳色譜儀分離模式

    傳統電泳色譜儀分離模式有自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-PAGE電泳、瓊脂糖凝膠電泳、等電聚焦電泳和等速電泳等。一、自由界面電泳:1、原理:溶液在U型管中,根據樣品各組分泳動速度的不同進行分離。2、特點:沒有載體,對流比較嚴重,組分不能完全分離,成分相互重疊,檢

    毛細管電泳分離因素進樣

    進樣CE的常規進樣方式有兩種:流體力學和電遷移進樣。電遷移進樣是在電場作用下,依靠樣品離子的電遷移和(或)電滲流將樣品注入,故會產生電歧視現象,會降低分析的準確性和可靠性,但此法尤其適用于粘度大的緩沖液和CGE情況。流體力學進樣是普適方法,可以通過虹吸、在進樣端加壓或檢測器端抽空等方法來實現,但選擇

    毛細管電泳分離因素pH值

    pH值緩沖體系pH的選擇依樣品的性質和分離效率而定,是決定分離成敗的一大關鍵。不同樣品需要不同的pH分離條件,控制緩沖體系的pH值,一般只能改變電滲流的大小。pH能影響樣品的解離能力,樣品在極性強的介質中離解度增大,電泳速度也隨之增大,從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會影響毛細管內壁硅醇基的質

    離子色譜儀的分離模式解析

    離子色譜儀的分離模式有離子交換色譜、離子排斥色譜和離子對色譜等。一、離子交換色譜:離子交換色譜使用的是低交換容量的離子交換劑,交換劑的表面有離子交換基團。帶負電荷的交換基團(如磺酸基和羧酸基)可用于陽離子的分離,帶正電荷的交換基團(如季胺鹽)可用于陰離子的分離。陰離子的分離過程:由于靜電場相互作用,

    如何選擇合適的液相色譜分離模式?

    自 1903 年,俄國植物學家米哈伊爾?茨維特發明色譜算起,色譜已走過 100 余年歷程。從最早正相色譜法,發展至今,諸多液相色譜分離模式:反相分離模式、親水分離模式、離子分離模式、體積排阻分離模式和親合分離模式等。因其具備多功能性和精確性,作為定性和定量的工具,液相色譜分析方法廣泛應用于各行各

    離子色譜儀的分離模式解析

    離子色譜儀的分離模式有離子交換色譜、離子排斥色譜和離子對色譜等。一、離子交換色譜:離子交換色譜使用的是低交換容量的離子交換劑,交換劑的表面有離子交換基團。帶負電荷的交換基團(如磺酸基和羧酸基)可用于陽離子的分離,帶正電荷的交換基團(如季胺鹽)可用于陰離子的分離。陰離子的分離過程:由于靜電場相互作用,

    毛細管電泳儀分離條件的選擇

    毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分離科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分離科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分離成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分離有了新的轉機。一、分離條件的選擇內容:1、毛

    毛細管電泳儀的分離因素介紹

    緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層

    生物親和色譜儀分離模式解析

    生物親和色譜儀是利用蛋白質或生物大分子等樣品與固定相上生物活性配位體之間的特異親和力進行分離的。 一、固定相: 將具有生物活性的配位體以共價鍵結合到不溶性固體基質上制得。 二、生物活性配位體: 1、酶:底物及其類似物。 2、輔酶:類固醇等。 3、抗體:植物激素等。 4、激素:糖和多糖

    常用液相色譜柱按照分離模式

    色譜柱常用液相色譜柱按照分離模式大致可以分為吸附、分配、鍵合相、離子交換、疏水作用、體積排阻(凝膠)、親和及手性等類型,表給出了不同類型色譜柱的分離原理及應用情況。

    生物親和色譜儀分離模式解析

    生物親和色譜儀是利用蛋白質或生物大分子等樣品與固定相上生物活性配位體之間的特異親和力進行分離的。一、固定相:將具有生物活性的配位體以共價鍵結合到不溶性固體基質上制得。二、生物活性配位體:1、酶:底物及其類似物。2、輔酶:類固醇等。3、抗體:植物激素等。4、激素:糖和多糖等。5、抗生素:核苷酸等。三、

    SPE基本原理及分離模式

    基本原理  ?固相萃取的基本原理是樣品在兩相之間的分配,即在固相(吸附劑)和液相(溶劑)之間的分配。  ?固相萃取保留或洗脫的機制取決于被分析物與吸附劑表面的活性基團,以及被分析物與液相之間的分子作用力。  ?洗脫模式有兩種:一種是目標化合物比干擾物與吸附劑之間的親和力更強,因而被保留,洗脫時采用對

    微量制備毛細管電泳實驗——多次分離

    實驗材料多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒血管緊縮素I和血管緊縮素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材75 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 低壓下(0.5 lb/in2

    毛細管電泳根據分離通道形狀分類

    按分離通道形狀分為圓形、扁形、方形毛細管電泳等。

    毛細管電泳分離因素添加劑

    添加劑在電解質溶液中加入添加劑,例如中性鹽、兩性離子、表面毛細管活性劑以及有機溶劑等,會引起電滲流的顯著變化。表面活性劑常用作電滲流的改性劑,通過改變濃度來控制電滲流的大小和方向,但當表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時,將形成膠束。加入有機溶劑會降低離子強度,Zeta電勢增大,溶液粘度降低,改變管壁

    毛細管電泳色譜儀分離類型

    毛細管電泳色譜儀分離類型有電泳型、色譜型、聯用型和其它型。一、電泳型:1、毛細管區帶電泳:毛細管內只填充pH緩沖液。2、毛細管凝膠電泳:毛細管內填充聚丙烯酰胺等凝膠。3、毛細管等電聚焦電泳:毛細管內填充pH梯度介質。4、毛細管等速電泳:通常采用不連續(自由溶液)電泳介質。二、色譜型:1、填充毛細管電

    毛細管電泳色譜儀分離系統

    毛細管電泳色譜儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,毛細管是分離的關鍵。一、毛細管材質:理想的毛細管必須是化學和電惰性,能透過紫外和可見光,有一定的韌性,富有彈性,易于彎曲,耐用而且便宜。目前使用的材質有聚四氟乙烯、玻璃和石英等,其中石英最

    毛細管電泳芯片等電聚焦分離

    芯片等電聚焦分離芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3

    毛細管電泳分離條件選擇流程

    分離條件的選擇是毛細管電泳中最重要但也是最難之處。不同的專業研究工作者可能會有各自不同的選擇策略和流程,我們提出如下九步選擇流程,僅供參考: 第一步,盡可能多地了解分離樣品的類型、來源、組成及其性質; 第二步,根據樣品的可能性質和來源,選擇分離模式,若無樣品信息可先選CZE; 第三步,根據樣品性質確

    影響毛細管電泳儀分離效果的因素

    影響毛細管電泳儀分離效果的因素有電場強度、緩沖液pH、離子強度、溫度和添加劑等。一、電場強度:1、結果:電滲速度與電場強度成正比。2、說明:(1)電場強度降低,分離效率和分辨率降低。(2)電場強度增大,焦耳熱增大。二、緩沖液pH:1、結果:pH增大,電滲速度增大。2、說明:(1)改變電滲速度zui方

    毛細管電泳分離技術的原理與應用

    1 概述  毛細管電泳又稱高效毛細管電泳,包括電泳、色譜及其交叉內容,是一類以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,以樣品的多種特性為根據的液相微分離分析技術。CE 是分析科學中繼高效液相色譜之后的又一重大進展,它使分析科學從微升水平進入納升水平,并使單細胞分析乃至單分子分析成為可能。198

    影響毛細管電泳分離效果的因素介紹

    緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層

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