一文讀懂分子診斷常用技術
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料，用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常，從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常，以確定受檢者有無基因水平的異常變化，對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗簡單的講所有基于分子生物學水平的方法學技術都屬于分子診斷技術，比如PCR技術、基因測序技術等等。 PCR技術即聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，基本原理類似于DNA的天然復制過程，由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性，模板DNA與引物的退火(復性)，引物的延伸。重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。由1983年美國Mullis首先提出設想，......閱讀全文
BRAF突變檢測成為新型PCR分子診斷系統的關鍵
一種基于PCR的全自動實時分子診斷系統和一種識別BRAF致癌基因所致癌癥的專用試劑盒最近通過了歐洲的CE標志認證。比利時梅赫倫的Biocartis公司最近發布的Idylla儀器是該公司旗艦分子診斷系統的主打產品。發布Idylla的同時還發布了Idylla BRAF突變檢驗，用以檢測BRAF致癌基因的
獸醫體外診斷的趨勢——分子診斷
寵物已成為現代人的重要家庭成員，圍繞其吃穿用度、生老病死，形成了一條千億級的“經濟”產業鏈。其中，需求剛性大、消費支出高的寵物醫療更占據了產業鏈中的核心地位，成了寵物消費中的“大頭”。寵物醫療服務包括為寵物提供疾病診療和日常保健服務，是寵物行業中僅次于寵物食品的第二大細分行業。按疾病種類劃分，寵物醫
核酸基因分子探針
從化學和生物學的意義上理解，探針是一種已知特異性的分子，它帶有合適的標記物供反應后檢測。探針和靶的相互反應如抗原-抗體、血凝素-碳水化合物、親合素-生物素、受體和配體，以及核酸與其互補核酸間的雜交等反應均屬此類。用核酸探針與待檢標本中核酸雜交，形成雜交體，再用呈色反應顯示。此方法用于疾病的診斷，稱為
分子診斷前沿科技概述
按照常規分類，分子診斷技術主要分為兩大類：核酸檢測以及生物芯片。核酸檢測技術具體包括聚合酶鏈式反應技術（PCR）、熒光原位雜交技術（FISH）以及基因測序技術；生物芯片主要包括基因芯片和蛋白芯片技術。同時，分子診斷設備已越來越向數字化、自動化、高通量轉型，基于雜交的檢測技術逐漸被數字 PCR、下一代
分子診斷技術大盤點
分子診斷技術盤點分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料，用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常，從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。分子診斷技術為疾病的預測、診斷、預防、治療和轉歸提供了信息和決策依據，已廣泛應用于傳染病的診斷、流行病的調查、食品衛生檢查、腫瘤和遺傳病的早期診斷及法醫
CRISPR分子診斷技術（一）
本篇為“連環畫”系列中的第二篇。“連環畫”中的每一篇都會介紹一個最新生物醫藥技術或趨勢。以圖畫為主，文字為輔。雖然無法做到系統全面，但希望能給讀者帶來一些啟發。每篇文章只代表作者個人的觀點或解讀，與禮來亞洲基金的投資決定無關。1 ???脊椎動物的免疫系統分為先天免疫（或非特異性免疫），和獲得性免疫（
CRISPR分子診斷技術（二）
6 ?? Sherlock和Mammoth兩家公司的技術并非橫空出世，而是源于張鋒和Doudna兩家實驗室于2015-2018年期間在知名期刊上發表的一系列科研成果。這場學術上的比拼猶如兩個武林高手過招，精彩紛呈，讓人目不暇接。兩個團隊互相競爭，也互相學習，開拓了CRISPR分子診斷這一全新
CRISPR分子診斷技術（三）
13 ???或許是因為LbuC2c2的特異性和非特異性剪切活性遠遠高于LshC2c2的相應活性, Doudna團隊意識到LbuC2c2可以被用來構建高特異性、高靈敏度的RNA檢測方法。若想檢測出某一特定序列的RNA分子，先將與其互補的crRNA和LbuC2c2蛋白組裝，再加上一些報告RNA分
CRISPR分子診斷技術（四）
19 ???由于其高靈敏度和特異性，CRISPR診斷技術或CRISPR-Dx可以有很多用途：病毒檢測和病毒亞型區分，病菌識別和耐藥性基因確認，即時檢測（POCT）, 患者基因分型，以及癌癥突變分析和液體活檢。這篇論文也初步展示了CRISPR-Dx在這些方面的應用前景。圖片來源：參考資料320???比
CRISPR分子診斷技術（五）
25 ? DETECTR達到了aM水平的靈敏度和≤7個堿基的特異性。例如，它能準確地檢測出受試者攜帶的是哪種亞型的HPV。圖片來源：參考資料2和1026 ??在同期Science論文中，張鋒團隊從三個方面著手完善SHERLOCK：多重化、定量化和去熒光。先說多重化：他們挑選了來自兩個不同菌株的Cas
CRISPR分子診斷技術（六）
34 ???不是所有的塞卡病毒都一樣。2017年9月， 中科院遺傳所的許執恒團隊和軍事醫學科學院的秦成峰團隊在Science上報導，prM蛋白的一個突變(S139N)增加了塞卡病毒的傳染性，并引起更嚴重的小頭癥和更高的致死率。在該論文發表后一周內，Sabeti團隊和張鋒團隊就設計、開發出幾個能區分出
CRISPR分子診斷技術（七）
39 ??加上Cas9，它們為分子診斷和基因編輯提供了多樣靈活的工具。圖片來源：參考資料240??? CRISPR分子診斷技術并不是只有Doudna和張鋒兩家在開發。2019年3月，在Keck Graduate Institute任職的Kiana Aran博士與合作者在Nature Biomedic
分子診斷常用技術（一）
分子診斷技術即是利用分子生物學方法對人類及病原體的各類遺傳物質進行檢測，以幫助對疾病進行診斷。以技術原理出發對分子診斷技術進行歸類與評價，以對目前臨床常用技術的沿革進行回顧。1961 年Hall 建立的液相分子雜交法標志著人類掌握分子生物學技術對特定核酸序列進行檢測，開啟了對疾病分子診斷的大門。19
分子診斷常用技術（二）
( 五) 生物芯片1991 年Affymetrix 公司的Fordor利用其所研發的光蝕刻技術制備了首個以玻片為載體的微陣列，標志著生物芯片正式成為可實際應用的分子生物學技術。時至今日，芯片技術已經得到了長足的發展，如果按結構對其進行分類，基本可分為基于微陣列( microarray) 的雜交芯片與
分子診斷常用技術（三）
二、核酸序列測定測序反應是直接獲得核酸序列信息的唯一技術手段，是分子診斷技術的一項重要分支。雖然分子雜交、分子構象變異或定量PCR 技術在近幾年已得到了長足的發展，但其對于核酸的鑒定都僅僅停留在間接推斷的假設上，因此對基于特定基因序列檢測的分子診斷，核酸測序仍是技術上的金標準。( 一) 第1 代測序
CRISPR可以做分子診斷
CRISPR-Cas系統背景回放面對噬菌體的威脅，細菌進化出了一套專門針對噬菌體或外源性遺傳物質的CRISPR-Cas免疫系統。CRISPR全稱為“簇狀、規律間隔的、短回文重復序列”（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repe
分子診斷的前生今世
什么是分子診斷狹義上來講是指基于核酸的診斷，即對各種DNA和/或RNA樣本的病原性突變的檢測以便實現對疾病的檢測和診斷。在廣義上包括基因治療和生物治療以及針對某些信號轉導分子的分子靶向治療。在過去的幾十年里，在治療包括某些遺傳性免疫缺陷尤其是腫瘤性疾病方面顯示了獨特的效果。蛋白組學的發展，也成為分子
分子診斷之即時檢驗
????分子診斷越來越受關注，從診斷技術領域細分市場，生化，免疫，微生物，血液和臨檢等來分析，分子診斷的占比約18%，從多渠道的行業報告看趨勢，預計未來5年后將達到30%。當然這部分還不包含POCT的分子診斷。??? 2020年初的新冠疫情以來，為了滿足檢測市場的需要，FDA首次開展EUA緊急情況下
分子診斷的基本流程
多年來，大部分分子診斷實驗室的核心技術都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關的基因，如與癌癥有關的基因。這些檢測的核心是實時定量聚合酶鏈反應（PCR）、轉錄調節擴增（TMA）、靶向擴增和信號擴增等類似技術的應用
血液腫瘤的分子診斷
隨著分子生物學及其相關技術的迅速發展，血液系統腫瘤的診斷已進入“精確診斷”時代。目前血液學實驗室中主要的分子生物學平臺包括聚合酶鏈反應（ＰＣＲ）技術、測序技術和基因芯片等；這些技術具有靈敏度高、特異性強、重復性好等優點，在血液腫瘤的診斷、分型、預后判斷、療效評估、微小殘留病的監測及個體化治療等多個方
基因檢測：盡早診斷兒童遺傳性疾病
“我國開展兒童遺傳病的研究正是最好的時候，由于基因測序技術蓬勃發展，為新生兒遺傳病的檢測提供了簡便有效的手段”。日前，來自復旦大學附屬兒科醫院兒童發育與疾病轉化醫學研究中心、上海市出生缺陷防治重點實驗室的王慧君副研究員在接受科技日報采訪時告訴記者。 為兒童遺傳病提供有效手段 1990年，住在
基因檢測輔助臨床診斷對疾病進行精準治療
諾貝爾生理學獎獲得者，利根進川博士在一項研究中說，除了外傷，一切疾病都與基因有關。基因檢測能夠輔助臨床診斷。由于許多遺傳性疾病表現出相似的癥狀，臨床上很難進行鑒別診斷。通過基因檢測，從基因層面對疾病進行分子診斷，找出真正的致病基因，可以輔助臨床醫生對疾病進行精準診斷。2008年，基因檢測被美國《
融合基因檢測對白血病診斷的意義
通過臨床實踐發現單純細胞形態學分型，檢測者的主觀成分較大，相互間的符合率及正確率有一定限制，隨著細胞和分子生物學技術的迅速發展及對白血病發病機制研究的不斷深入，認識到白血病發病過程中的基因和表型變化對各類白血病的診斷與治療具有重要意義，因此提出了白血病MICM分型。 近兩年白血病分子特征的研究
基因芯片篩選發現大腸癌早期診斷分子標志物
大腸癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，其發病率位居全球惡性腫瘤第三位。2006年國家衛生部的統計數據顯示，我國大腸癌死亡率已位居惡性腫瘤第五位，其發病率在40歲開始上升，至60-75歲時達到高峰。發病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的早期診斷有助于大腸癌的治療，減少病死率。 早期診斷包括兩方面含義：
基因芯片篩選發現大腸癌早期診斷分子標志物
大腸癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，其發病率位居全球惡性腫瘤第三位。2006年國家衛生部的統計數據顯示，我國大腸癌死亡率已位居惡性腫瘤第五位，其發病率在40歲開始上升，至60-75歲時達到高峰。發病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的早期診斷有助于大腸癌的治療，減少病死率。早期診斷包括兩方面含義：早期發現和早
基因芯片篩選發現大腸癌早期診斷分子標志物
大腸癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，其發病率位居全球惡性腫瘤第三位。2006年國家衛生部的統計數據顯示，我國大腸癌死亡率已位居惡性腫瘤第五位，其發病率在40歲開始上升，至60-75歲時達到高峰。發病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的早期診斷有助于大腸癌的治療，減少病死率。 早期診斷包括兩方面含
單分子測序在腫瘤基因檢測中的6大應用
腫瘤是當今導致人類主要死亡的主要疾病之。由于其發病隱匿、治療方法局限、多數預后不良,且分子生物學特征復雜多變,因而腫瘤的預防、早期篩查與診斷、臨床治療、預后評估一直是臨床醫生致力于解決的關鍵問題。隨著現代醫學技術的發展,腫瘤已經進人了個體化治療階段。腫瘤的基因組轉錄組和表觀遺傳特征在探究腫瘤的發
基因診斷介紹
長期以來，單基因遺傳病的診斷主要靠臨床觀察和系列化學檢查，但生化學檢查要求有相應基因表達產物的體液或細胞，并對基因產物或代謝異常機理有所了解，但對絕大多數遺傳病而言，目前還遠未達到這種認識。理想的診斷方法是對患者基因或DNA本身直接進行分析，因為這種分析擺脫了上述各種限制。機體各種組織的核細胞均有全
分子診斷是醫學診斷的發展趨勢
獨立醫學實驗室（ICL）：又稱第三方檢驗，是獨立于醫療機構之外獨立提供醫學檢驗服務的公司。其核心是規模經濟，即通過規模經濟降低單位成本、獲取成本優勢、質量優勢、技術優勢，從而達到多方的共贏，減少醫療費用支出。它的出現不僅解決中小型醫療機構檢驗外包的問題，同時也為大醫院解決因社會需要而不得不開展虧
【硬菜】分子診斷工具介紹
因分子技術具有內在準確性、敏感性、特異性和周轉迅速的特點，帶來了分子診斷行業的快速發展。此外，因為分子診斷技術具有準確性、敏感性和特異性，實驗室人員能夠從很小量的樣本中就可獲得有效的結果。這對法醫檢測領域來說是非常有用的，但同時該技術也可以檢測到目標物質的極低濃度，從而使臨床醫生在極早期階段就能