脂肪干細胞培養和擴增實驗_脂肪干細胞的傳代培養
分離獲得ASC后,可以通過連續傳代使其生長和擴增。原代培養后,傳代2?3次,ASCs呈現單層,大而扁的細胞形態,其直徑在25?30μm。待細胞達到匯合時,它們形態上呈紡錘體形,類似于成纖維細胞。來源:《人干細胞培養》實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒ASC培養基PBSA胰蛋白酶儀器、耗材組織培養瓶 25cm2(T-25)細胞刮實驗步驟(a)細胞達到80%匯合時即可傳代。(b)棄去培養基,加人PBSA洗滌貼壁細胞。(c)加入足量胰蛋白酶,使之覆蓋細胞,將培養瓶中,置于37℃,5% CO2溫箱中。(d)細胞與胰蛋白酶共孵育3 min后,用細胞刮將細胞刮下。(e)加人ASC培養基使胰蛋白酶失活。(f)按照1:2比例,將細胞接種至2個T-25培養瓶中。展......閱讀全文
脂肪干細胞的主要特點
脂肪干細胞特點:1、自體干細胞容易與自身細胞結合;2、有助于網狀成纖維細胞的增殖;3、可按要求誘導組織的生長及自體干細胞的遷移。 研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規模培養,對機體損傷小等優點,而且其來源廣泛,體內儲備量大
脂肪干細胞的基本信息
脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)指從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。其來源豐富、容易獲得,且增值分化能力強,在體內或者體外的特定條件下,可多向分化為神經細胞、血管內皮細胞、心肌細胞、肝臟實質細胞、軟骨細胞、肌肉細胞等。
簡述脂肪干細胞的作用機制
脂肪干細胞來源于中胚層,現已證明其具有向骨、軟疾病種類臨床階段骨、脂肪、肌腱、神經、內皮細胞、肝細胞和造血方向分化的潛能。例如,脂肪干細胞治療心肌梗死的可能機制包括以下幾個方面: ①向心肌細胞、血管內皮細胞分化,直接修復壞死心肌細胞。脂肪干細胞能通過減少心臟重塑,增加血管生成來提高心肌梗死后心
脂肪干細胞成脂誘導對照實驗介紹
將干細胞以1.5×105 每孔的密度接種在六孔板中,以正常培養基培養的樣本為成脂分化實驗陰性對照組,以成脂誘導培養基培養的樣本為陽性對照組。具體方法是:向基礎培養基(DMEM+10%胎牛血清)中加入1 μmol/L 的地塞米松、10 μmol/L 的胰島素、200 μmol/L 的吲哚美辛和0.
關于脂肪干細胞實驗的儀器與材料的介紹
倒置熒光顯微鏡(IX71, Olympus);數字彩色攝像系統(Sony3CCD);圖像分析軟件(Image-pro-plus);離心機(Z23, Herm 德國);Transwell (3450-clear, corning, Costar 美國);純水機(Millipore-Q-Synthe
間充質干細胞的傳代培養實驗方法
試劑和材料:完全培養基:α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經F雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;2.A;3.胰蛋白酶/EDTA;4.聚丙烯離心管,15m
牙髓干細胞的分離培養——DPSCs的傳代培養
實驗材料牙髓組織試劑、試劑盒滅菌PBSAMSC培養基胰蛋白酶-EDTA溶液:0.05%胰蛋白酶0.54mmol L(0.2%)EDTA無Ca2+和Mg2+的Hank’s平衡鹽溶液溶解儀器、耗材培養皿實驗步驟(a)用PBSA洗培養瓶/皿三次。(b)加足夠的胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育。(c)在8
間充質干細胞的傳代培養
間充質干細胞的傳代培養試劑和材料:1.?完全培養基:α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經FBS雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;2.?PBSA;3.?胰
ADSc提純脂肪干細胞移植的簡介
ADSc提純脂肪干細胞移植:2小時之內提純凈化脂肪細胞為高純度的脂肪干細胞(移植后成活率在70%-80%),將這些高純度的脂肪干細胞與脂肪組織混合移植到自體所需要的部位。
ADSc提純脂肪干細胞移植的優勢
1、速效 2小時之內提純凈化脂肪細胞為脂肪干細胞,保證在吸脂塑形手術同時就能做高成活率的脂肪干細胞移植。 2、穩定 因為移植的脂肪干細胞是提純后的高純度脂肪干細胞,術后成活率高可以保持術后效果的穩定。 3、永恒 脂肪干細胞一旦成活,那就永遠跟自身長的正常組織一樣,會永久存在。
概述脂肪干細胞的主要特點
脂肪干細胞特點:1、自體干細胞容易與自身細胞結合;2、有助于網狀成纖維細胞的增殖;3、可按要求誘導組織的生長及自體干細胞的遷移。 研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規模培養,對機體損傷小等優點,而且其來源廣泛,體內儲備量大
關于脂肪干細胞的流式檢測介紹
通過酶消化法將細胞收集到離心管中,細胞懸液調整密度為1×105 mL-1,800r/min(120g),離心5 min,棄掉上清,用4℃的冷D-Hanks 沖洗重懸細胞,再次將細胞懸液以800 r/min,離心5 min,之后棄去上清。然后用D-Hanks 將細胞重懸至1 mL,加入抗體5~10
脂肪干細胞的特點及作用機制
特點 脂肪干細胞特點:1、自體干細胞容易與自身細胞結合;2、有助于網狀成纖維細胞的增殖;3、可按要求誘導組織的生長及自體干細胞的遷移。 研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規模培養,對機體損傷小等優點,而且其來源廣泛,體內
關于自體脂肪干細胞移植的簡介
對于面部的一些凹陷,或者是歲月流逝出現的皮膚皺折,可以選擇注射玻尿酸等和自體脂肪移植來進行容量填充,可以達到明顯“年輕化”的效果。其中填充效果維持最長久的當屬自體脂肪,其取于自身,用于自己,無任何排斥性的特點更是其獨具的優點。
豬脂肪干細胞(永生化)產品的運輸和保存
1)?1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)?T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行
培養脂肪干細胞一定要用無血清培養基嗎
不一定要無血清培養基培養。無血清培養的目的只是適合將來臨床使用或者排除其他不確定成分因子影響基礎研究的判斷。你可以用含10%FBSDMEM:F12培養基培養好原代(0.1%gelatin包被,I型膠原酶至少消化40min以上),然后使用Sciencell的MSCM進行培養,效果還不錯。
Nature:脂肪酸控制干細胞再生
萬一發生骨折,血液中的脂肪酸會向干細胞發出信號,使它們向成骨細胞發展。如果附近沒有血管,則干細胞最終會形成軟骨組織。這一現象表明,血管中特定營養物質直接影響干細胞發育的方向。相關結果由來自哈佛大學的研究者們發表在最近的《Nature》雜志上。 骨折后的修復是由骨骼祖細胞(skeletal pr
豬脂肪干細胞(永生化)細胞詳述
根據不同來源及分化階段,干細胞可分為胚胎干細胞和成體干細胞胚胎干細胞具有分化為多種不同組織的能力,但在倫理上存在爭議。成體干細胞因其來源廣泛、增殖能力強等特點,現已成為組織工程學研究的首選種子細胞。其中,脂肪干細胞作為組織工程修復的種子細胞,因其具有來源豐富、取材容易、增殖能力強等優點,正受到越來越
豬脂肪干細胞(永生化)細胞特性
1)?細胞來源于實驗動物正常脂肪組織。2)?細胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽性。3)?經鑒定細胞純度高于90%。4)?不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。5)?細胞生長方式:長梭狀細胞,貼壁培養。
脂肪間充質干細胞原代分離
實驗概要本實驗方法介紹了脂肪間充質干細胞原代分離所需試劑及操作流程。主要試劑所用試劑盒:小鼠脂肪干細胞分離和培養試劑盒???????????? 貨號:MADS-000-001大鼠脂肪干細胞分離和培養試劑盒???????????? 貨號:RADS-000-001兔子脂肪干細胞分離和培養試劑盒?????
概述自體脂肪干細胞移植的技術特點
1、自體脂肪移植,存活是關鍵 自體脂肪移植臨床應用已經有100多年的歷史,近20年在臨床得到大量應用,自體脂肪移植手術中自體脂肪如何存活率是關鍵。 不同的部位所抽取的脂肪會有不同的吸收率,大腿的脂肪是最優的,一般自體脂肪移植之后有30%-70%可以存活。因此自體脂肪移植往往需要數次的移植手術
關于脂肪干細胞的基本信息介紹
脂肪組織在人體內儲量豐富,通過抽脂從中獲得的大量脂肪干細胞(ADSCs),有自我更新增殖及多向分化潛能,可向脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞、成骨細胞、神經細胞、神經膠質細胞及胰島細胞分化,而且可分泌多種促血管生成因子和抗凋亡因子而抗炎、抗氧化,可抵抗氧自由基的損傷,有望成為修復受損的組織和器官的干細
脂肪干細胞的Hoechst/PI-死活染色介紹
棄掉舊培養基,用D-Hanks 沖洗除去殘留培養基然后向每個Transwell 孔中加入質量濃度為1 mg/mL 的Hoechst 33342 大約10 μL,使其終質量濃度為10 μg/mL,37℃下避光反應10 min。待Hoechst 染色完成后,用D-Hanks 沖洗除凈殘余的Hoech
新型擴增多潛能干細胞的分離、培養和鑒定的實驗方案
小鼠胚胎發育從單個受精卵到8細胞早期具有全能性,即單個卵裂球具有分化為胚胎和胚外組織各種類型細胞的潛能。8細胞后期胚胎開始第一次譜系分離,外層的細胞形成滋養外胚層(TE),以后分化為胎盤的主要細胞成分,滋養層細胞;內在的細胞形成內細胞團(ICM),在囊胚階段,內細胞團進一步分化為上胚層(epib
豬脂肪干細胞(永生化)產品使用和注意事項
1)?本產品僅能用于科研2)?本產品未通過直接用于活體動物和人的審核3)?本產品未通過用于活體診斷的審核注意事項:1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接
全球首例!脂肪干細胞救了這名肺癌患者
詹妮. 里奧格蘭特(Jeneen Leogrande)曾遭遇肺癌術后滲漏并發癥折磨長達3年之久。在幾乎崩潰絕望之際,她利用偶然的一次機會,勇敢嘗試使用干細胞療法來修補術后瘺管,最終成功“死里逃生”。這是干細胞修補肺癌術后瘺管的全球首個成功案例,振奮人心。 2011年平安夜,詹妮正處于肺癌全切術
骨髓間充質干細胞(MSC)原代培養與傳代培養實驗步驟
準備工作(1)試管、試管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、燒杯、橡皮頭、剪刀、鑷子、紗布、棉球、酒精燈、滴管、移液器、細胞計數器、生理鹽水、PBS、雙抗(青鏈霉素)、75%酒精、95%酒精、培養瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周齡,18~22g,雌雄不限)、胎牛血
關于ADSc提純脂肪干細胞移植的出現介紹
“自體脂肪移技術”用于整形已經很多年時間,如今早已發展成自體脂肪干細胞移植,“自體脂肪干細胞移植術”已經是一項很常見的整形手術。但是該術式始終存在著成活率不足的問題,難以保障術后的效果,ADSc提純脂肪干細胞移植的出現完全打破了這種局面。
關于ADSc提純脂肪干細胞移植的弊端介紹
決定“自體脂肪干細胞移植”術后效果穩定的因素是脂肪干細胞的成活率,而影響其成活率的就是脂肪干細胞的純度,可見在“自體脂肪干細胞移植”時提純的重要性。現在很多整形機構也都會涉及到脂肪干細胞移植,但是所涉及到的僅僅是移植,根本沒有提純的步驟。正常吸出的脂肪都會有干細胞的存在,但未經提純這些脂肪中干細
乳腺干細胞的培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織標本試劑、試劑盒 無菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸鹽CMD3培養基膠原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培養瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2儀器、耗材 搖床離心管實驗步驟 (a)手術后,立即將組織標本轉移至DMEM