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  • 腎小管細胞氧化性損傷模型

    材料:DMEM培養基(Gibco BRL Co生產), 無糖DMEM培養基(Gibco BRL Co生產),NRKSIE 鼠。腎小管細胞株(購于華西醫科大學內科實驗室),乳 酸鈉(國產分析純試劑)。 方法 腎小管細胞培養 NRKSIE鼠腎小管細胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,將小管細胞分離成單個細胞懸液,用含100 mL/L 胎牛血清的DMEM培養基,于37℃5%(體積分數)CO2 孵箱中培養。每 24 h更換培養液一次,培養2~3 d,待細胞生長成片備用。實驗 將細胞轉種于96孑L板,細胞密度 為lO ·mL ,孵育24 h。培養液中加入 H 20 2,濃度為5mmol/L ,作用 30 min。討論:腎小管氧化性損傷在腎臟的缺血一再灌注損傷和中 毒性損傷中起著重要作用。為了從細胞水平闡明活 性氧自由基對。腎小管細胞的作用,本實驗用5 mmol/L H2 0 2建立了腎小管氧化性損傷模型。H2 0 2雖 不是自由基,......閱讀全文

    腎小管細胞氧化性損傷模型

    材料:DMEM培養基(Gibco BRL Co生產), 無糖DMEM培養基(Gibco BRL Co生產),NRKSIE 鼠。腎小管細胞株(購于華西醫科大學內科實驗室),乳 酸鈉(國產分析純試劑)。?方法 腎小管細胞培養 NRKSIE鼠腎小管細胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,將小管細胞分離成單個細胞

    內皮細胞損傷模型

    一、細胞因子損傷模型將內皮細胞鋪板后待即將單層融合時,換無血清或低血清培養基,加入細胞因子如IL-2,TNF-alpha、IFN等,共同孵育一段時間,或者加入藥物與之共孵育,或者加細胞因子之前先加入藥物孵育后,再加細胞因子,結束后測一些指標如MTT、LDH、NO、等等看藥物對細胞因子損傷的保護作用。

    常見體外肝細胞損傷模型

    1.四氯化碳體外損傷肝細胞模型原代培養的正常大鼠肝細胞培養24h(貼壁良好)后,置培養皿于一密閉的塑料盒,內置四氯化碳0.4M容積,37度90min,造成肝細胞損傷的模型,后轉入正常培養,進行下一步實驗。(即熏蒸法)肝細胞培養12h后,吸棄上清,更換培養液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

    Aβ損傷模型

    取出生1-2d的乳鼠,用麻醉劑處死。在D-hanks液中取大腦并分離海馬組織,胰蛋白酶消化,獲得細胞懸液,胎盤藍染色進行死活細胞記數,將細胞以5×105/ml的密度接種于預先經L-多聚賴氨酸處理的96孔和24孔培養板,其中24孔板中預先放置有蓋玻片。細胞維持在培養液中,置入5%CO2,飽和濕度的培養

    骨骼肌細胞損傷模型的建立

    1  材料 地塞米松磷酸鈉注射液(江蘇第三制藥廠,批號000706) ;RPMI - 1640 培養基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、鏈霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

    骨骼肌細胞損傷模型的建立

    1  材料 地塞米松磷酸鈉注射液(江蘇第三制藥廠,批號000706) ;RPMI - 1640?培養基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、鏈霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

    視神經損傷模型實驗

    實驗方法原理 作為中樞神經的重要組成部分,視神經及其胞體已成為中樞神經損傷修復的重要研究對象。中樞神經損傷修復研究中的許多重大發現,最初都是以視神經損傷為模型開展的。其中最為著名的,是蘇國輝和Aguayo采用周圍神經移植誘發視網膜神經節細胞(以下簡稱節細胞)再生的開拓性研究。視神經由眾多神經纖維組成

    體內肝損傷模型(酒精)

    一、材料 純系SD雄性大鼠,體重180g~200 g,由浙江大學醫學院實驗動物中心提供。食用酒精選用北京釀酒總廠出品的56度紅星二鍋頭。二、方法 將大鼠隨機分成5組,飼養在23℃~25℃室內,自由進食、進水;根據大鼠體重,A、B、C、D組每日用56°紅星二鍋頭白酒以10ml/1Kg分別灌胃 0、4周

    視神經損傷模型實驗

    視神經橫斷模型及熒光金逆行標記 坐骨神經移植及熒光金逆行性標記 熒光金逆行性標記(上丘及外側膝狀體) ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 作為中樞神經的重要組成

    脊髓星形膠質細胞機械性損傷的體外培養模型

    1.材料與方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培養液終止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的單個細胞,進行細胞計數,按5 ×105 個Pcm2 密度進行接種。培養至第10天時加10mM Leu2methy12ester 除殺小膠質細胞。于16d

    臭氧損傷衰老動物模型

    實驗材料2-3月靈小鼠20月齡大鼠試劑、試劑盒水混合飼料墊料儀器、耗材木制臭氧發生柜鼠籠飲水壺衰老的自由基學說認為:衰老與自由基引起的生物膜脂質過氧化導致膜結構損傷和功能失活有密切關系。生理情況下,自由基不斷產生,也不斷被機體內防御自由基的酶系統消除,從而維持生理性低水平、有利無害、穩定平衡的自由基

    肝損傷動物模型介紹

    這真是一個可怕的事實:同為黃種人,生長在中國的肝病發病率卻是生活在歐美的3倍!中國無疑成為了“肝病大國”,約12個人就有1人患肝病。面對如此嚴峻的現狀,對肝相關疾病機制研究和藥物開發就變得極為迫切。肝臟是人體重要的器官,執行合成代謝、解毒和免疫防御等許多功能。外界環境各類因素常導致肝損傷,長期的肝損

    培養乳鼠心肌細胞的缺氧損傷模型和缺氧預處理(APC)模型

    原代心肌細胞培養及APC模型的制作參照先前報道的方法[2]。即取出生后1-2 d乳鼠心尖部組織, 胰酶消化, 離心后用含20%小牛血清的DMEM培養基制成細胞懸液, 過濾, 按差速貼壁分離法純化心肌細胞, 以1×105 cells/cm2接種于24孔板, 每24 h更換培養液。貼壁生長2 d, 于實

    研究揭示腎小管損傷的線粒體穩態失衡新分子機制

    急性腎損傷(Acute kidney injury,AKI)是一種急性腎功能紊亂,以血漿肌酐和尿素氮明顯增加,同時尿輸出量明顯降低為特點。AKI已成為世界范圍內的公共衛生問題,薈萃分析表明全球成人住院患者急性腎損傷的發生率頗高,面對嚴峻的AKI流行病學現狀,尚沒有可明顯改善AKI,或增強腎臟修復功能

    研究揭示腎小管損傷的線粒體穩態失衡新分子機制

      急性腎損傷(Acute kidney injury,AKI)是一種急性腎功能紊亂,以血漿肌酐和尿素氮明顯增加,同時尿輸出量明顯降低為特點。AKI已成為世界范圍內的公共衛生問題,薈萃分析表明全球成人住院患者急性腎損傷的發生率頗高,面對嚴峻的AKI流行病學現狀,尚沒有可明顯改善AKI,或增強腎臟修復

    UVB致皮膚角質形成細胞的損傷模型的制作方法

    材料和方法1 試劑:胎牛血清(北京軍醫獸醫防治中心) ,DMEM培養液(GIBCO ,美國) ,碘化丙啶PI(Sigma) ,Triton2X100 (BDH) ,Hoechst33342(Sigma) ,RNase (Sigma) 。2 細胞及實驗分組:人角質形成細胞株Colol6 (由北京師范大

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗——大鼠脊髓NYU模型

    實驗方法原理脊髓挫傷是臨床最常見的脊髓損傷類型(交通事故、高空墜物、運動損傷等造成),NYU模型是應用最廣泛的鼠類脊髓挫傷模型,該模型可以很好地模擬臨床,適用于病理和脊髓再生等多方面研究。雙側椎板(T8)去除術后,使用脊髓撞擊儀(NYU大鼠脊髓撞擊儀I型),以不同重量的下落重物撞擊脊髓,造脊髓撞擊傷

    新模型研究血管損傷影響脊髓損傷后的結局恢復

      顯微注射技術   中樞神經系統不具有像周圍神經系統一樣的可塑性,并且外傷是一種不可逆損傷。除了最初的機械性損傷,還將伴隨長期持久的級聯性損傷,即繼發性損傷,繼發性損傷發生后會引起進一步的軸突損傷和神經元死亡。繼發性損傷機制包括出血、組織缺血、血脊髓屏障破裂、炎癥、谷氨酸鹽毒性,以及脫髓鞘,細胞

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗

    實驗前的準備及暴露脊髓 大鼠脊髓NYU模型 大鼠脊髓擠壓傷模型 大鼠脊髓半橫斷模型 大鼠脊髓全橫切模型 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗

    實驗方法原理 對于各種大鼠或小鼠脊髓損傷模型而言,前提都是要去除相應節段椎板,清晰暴露需要損傷的脊髓節段,因此本節所有大、小鼠損傷模型中都是以打開飛節段椎板為前提進行的進一步損傷。實驗材料 實驗動物試劑、試劑盒 1%戊巴比妥鈉碘伏儀器、耗材 手術刀眼科攝(2個)眼科剪乳突撐開器小型咬骨鉗針持線剪縫針

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗——大鼠脊髓擠壓傷模型

    實驗方法原理脊髓夾傷模型可模擬臨床上脊柱移位所致脊髓持續受壓損傷,同樣是應用較多的模型。該類模型可獲得相對穩定的脊髓損傷,適用于病理和脊髓再生等多方面研究,尤其是脊髓受損程度(擠壓強度和/或持續時間)與所導致的神經病理損傷后果的關系。現有脊髓夾傷模型種類較多,分別應不同造模目的而設計。其中應用較多的

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗——大鼠脊髓半橫斷模型

    實驗方法原理半橫斷及全橫斷損傷在臨床上較為少見,但其為干細胞移植、神經纖維再生及功能修復等方面的研究提供了良好的研究模型,使之也成為較為常用的模型。實驗原理主要采用手術刀或刀片切斷脊髓,使損傷部位的脊髓失去解剖連續性及生理上的聯系而制作成的脊髓損傷模型。實驗材料實驗動物試劑、試劑盒1%戊巴比妥鈉碘伏

    脊髓機械性損傷模型的制作實驗——大鼠脊髓全橫切模型

    實驗方法原理行椎板去除術后,用11-0線從腹側穿過,然后用刀片切斷脊髓。實驗材料實驗動物試劑、試劑盒碘伏儀器、耗材11-0絲線實驗步驟①脊髓暴露后,用立體定向儀將大鼠固定;②用顯微外科攝將硬脊膜輕輕提起,用眼科剪將硬膜剪開;③再提起硬脊膜然后用三角針將11-0線從硬膜的腹側面穿過;④用刀片橫切大鼠脊

    Neat1促進腎小管上皮細胞凋亡促慢性腎臟疾病急性腎損傷

      慢性腎臟病(CKD)是腎功能下降到一定閾值以下后的進展性和不可逆轉的疾病,目前還沒有決定性的治療方法。進行性腎小管間質纖維化是CKD導致終末期腎病(ESRD)的共同特征。急性腎損傷(AKI)是一種以腎功能迅速下降為特征的臨床癥狀,長期以來一直被認為是完全可逆的。  然而,最近的研究表明,在AKI

    視神經損傷模型實驗——視神經橫斷模型及熒光金逆行標記

    實驗方法原理作為中樞神經的重要組成部分,視神經及其胞體已成為中樞神經損傷修復的重要研究對象。中樞神經損傷修復研究中的許多重大發現,最初都是以視神經損傷為模型開展的。其中最為著名的,是蘇國輝和Aguayo采用周圍神經移植誘發視網膜神經節細胞(以下簡稱節細胞)再生的開拓性研究。視神經由眾多神經纖維組成,

    125IUdR致C6膠質瘤細胞損傷的模型

    一、材料:125I-UdR購自中科院北京原子能所,放化純度>95%。脫氧腺苷(AdR)、脫氧鳥苷(GdR)、脫氧胞苷(CdR)、脫氧尿苷(UdR)均為Sigma公司產品。 二、方法 1、細胞培養:當癌細胞貼壁生長超過瓶壁的70%,用胰蛋白酶消化30-40s,傳代培養。腫瘤細胞每3-4d傳代1次。

    體外肝細胞損傷模型建立(CCl4和H2O2)

    1 大鼠肝細胞的分離和培養 大鼠4%戊巴比妥麻醉,門靜脈插管,先以無鈣灌流液灌流,繼以37℃通入O2的Ⅳ型膠原酶灌流液繼續循環灌流15 min。將肝臟移至一平皿內,輕輕撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成單個肝細胞懸液,200目尼龍網過濾,低速離心(500 r·min-1,1 mi

    人類外傷性腦損傷的果蠅模型

      一項研究說,科研人員建立了一種果蠅模型用于研究外傷性腦損傷(TBI)的直接和長期后果。找到外傷性腦損傷(TBI)的有效療法具有挑戰性,這部分是由于治療結果因為損傷的位置和嚴重程度以及遺傳和環境因素而有很大不同。為了解決這個問題,David Wassarman及其同事開發了一種外傷性腦損傷(T

    腎小管細胞受損后炎癥的原因

      是對藥物治療的過敏毒性與大多數病例有關的僅是少數藥物(在80多種相關藥物中)藥物相關性病因的識別很重要因為嚴重的腎臟損害經常可預防或逆轉結節病軍團菌病鉤端螺旋體病鏈球菌病毒感染和某些中草藥亦可能有關。常見抗生素類藥物(如氨基糖苷類、青霉素類、頭孢菌素類、兩性霉素、四環素族、磺胺類、阿霉素、抗結核

    腎小管細胞受損后炎癥的檢查

      腎活檢是明確診斷的唯一方法指征。包括診斷不能肯定或腎衰進展腎小球通常是正常的最早期表現是間質水腫典型的隨后出現間質淋巴細胞漿細胞嗜酸性細胞和少量嗜中性白細胞浸潤嚴重病例中可見炎性細胞侵入襯在小管基底膜的細胞間空隙(小管炎)在其他標本中可能見到繼發于甲氧苯青霉素磺胺類藥分枝桿菌和真菌的肉芽腫反應非

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