用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ 利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ 試劑、試劑盒 酪氨酸激酶分析緩沖液 酪蛋白激酶肽底物溶液 實驗步驟 1. 在離心管里配制 50 μl 反應混合物:5X 酪氨酸激酶分析緩沖液 &nbs......閱讀全文
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗
利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ試劑、試劑盒反應緩沖液儀器、耗材磷酸纖維素濾紙離心管實驗步驟1. 準備 P81 磷酸纖維素濾紙。(1) P81 磷酸纖維素濾紙切成 2cmX2cm 的方塊,折起一個角,用鉛筆在這里做個記號。(2) 將膜塊放在一大張非吸收性材料上,如有機玻璃或者蓋著鋁箔的纖維板。2. 設置
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ 利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酪氨酸激酶分析緩沖液
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗1
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ試劑、試劑盒酪氨酸激酶分析緩沖液酪蛋白激酶肽底物溶液實驗步驟1. 在離心管里配制 50 μl 反應混合物:5X 酪氨酸激酶分析緩沖液?????????????????????????? 10 μl10 mmol/L 酪蛋白激酶肽底物溶液??????????????? 5
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—蛋白質激酶C
試劑、試劑盒PKC 分析緩沖液組蛋白 HI 儲存液磷脂酰絲氨酸甘油二油酸脂實驗步驟1. 在冰浴的離心管內配制如下 20 μl 反應混合物:5X PKC 分析緩沖液??????????????????????????????????????? 4 μl10 mg/ml 組蛋白 HI 儲存液 ?????
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析
試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料:SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl,室溫(pH 8.0),1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍,50 mmol/L Tris-HCl,室溫(p
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——酪氨酸激酶
試劑、試劑盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析緩沖液實驗步驟1. 制備酸變性的烯醇化酶從兔肌肉中純化的烯醇化酶通常以硫酸銨沉淀或者懸液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶,于 4℃ 全速離心 5 分鐘。(2) 去上清,加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——酪蛋白激酶
試劑、試劑盒酪蛋白激酶分析緩沖液β-酪蛋白β-酪蛋白儲存液實驗步驟1. 在置于冰上的離心管內配制含下列成分的 20 μl 反應混合物:5X 酪蛋白激酶分析緩沖液? ????????????????????????? 4 μl ?β-酪蛋白?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??????
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
試劑、試劑盒 ATP儲存液實驗步驟 一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多數激酶需要 ATP 鎂鹽作為高效底物。有時可以用錳代替鎂。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合這兩種溶液,測 pH 值。慢慢將
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制 依賴環核苷酸的蛋白質激酶 蛋白質激酶C 酪蛋白激酶 酪氨酸激酶 凝膠蛋白質激酶分析 ? ? ? ? ? ?
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制依賴環核苷酸的蛋白質激酶蛋白質激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝膠蛋白質激酶分析試劑、試劑盒ATP儲存液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?實驗步驟一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多
MAPK激酶活性檢測
實驗概要本實驗提供了一個MAPK激酶活性的檢測方法。主要試劑1uM f1g22,10uM flg220.02% Silwet L-77液氮蛋白提取緩沖液(100 mM Hepes, pH 7.5,5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 10mM DTT, 10 mM Na3VO4, ?10 mM
內源性激酶活性檢測和外源性激酶活性檢測的區別
內源性與外源性凝血過程區別: 在于內源性凝血系統中所需的磷脂來自血小板,而外源性凝血系統中所需的磷脂是組織因子本身所提供的。 另外,內源性凝血系統形成活化的Xa過程較為緩慢,約需數分鐘之久.而外源性凝血系統形成活化的xa可繞過很多內源性
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—依賴環核苷酸
試劑、試劑盒激酶分析緩沖液組蛋白 2B 儲存液環核苷酸依賴的蛋白質激酶分析緩沖液環核苷酸儲存液實驗步驟1. 在置于冰上的離心管內配制含下列成分的 20 μl 反應混合物:5X 激酶分析緩沖液 4 μl,10 mg/ml 組蛋白 2B 儲存液 1 μl,[γ-32P] ATP(終濃度為 5 μCi/5
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——ATP儲存液的配制
試劑、試劑盒ATP儲存液實驗步驟一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多數激酶需要 ATP 鎂鹽作為高效底物。有時可以用錳代替鎂。1. 20 mmol/L MgCl2?或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合這兩種溶液,測 pH 值。慢慢將 p
活性肽種類
免疫活性肽、神經活性肽、其他活性肽等。 其他活性肽包括:膽固醇肽、促進礦物質吸收的肽(CPPS)、酶調節劑(如促胰酶肽)、激素肽如生長激素釋放因子(GRFS)、白蛋白胰島素增效肽、抗菌多肽(如乳酸鏈球菌素、橡膠素)、抗癌多肽(如腫瘤細胞壞死因子、環已肽)、抗艾滋病肽(如GLQ蛋白)等。
磷酸化位點分析實驗磷酸肽的分離
實驗方法原理磷酸化分析的原理研究的最常見的磷酸化類型是絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知發生的磷酸化還有精氨酸、組氨酸和賴氨酸的亞酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。這些修飾中的其中一些是化學不穩定的,通常觀察不到,除非采取特殊的保護措施防止他們在蛋內質分離過程中消失。舉例來說,組氨酸磷酸化是一
磷酸化位點分析實驗磷酸肽的分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 磷酸化分析的原理研究的最常見的磷酸化類型是絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知發生的磷酸化還有精氨酸、組氨酸和賴氨酸的亞酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。這些修飾中的其中一些是化學不穩定的,通常觀察不到,除非采取特殊的保護措
肽的應用抗菌活性肽
當昆蟲受到外界環境刺激時會產生大量具有抗菌活性的陽離子多肽,2013年已從中篩選出百余種抗菌肽。體內外實驗證實,很多抗菌肽不僅有很強的抗菌、殺菌能力,而且還能殺死腫瘤細胞。
肽、多肽、活性肽與大肽如何劃分?
分子量段在50~5000之間的才能稱為肽。分子量段在5000~10000之間的稱為大肽。分子量段在50~2000之間的稱為小肽、寡肽、低聚肽,也稱為小分子活性多肽。生物學家將肽稱為“氨基酸鏈”,將小分子活性多肽統稱為“生物活性肽”。常見的有二肽(Dipeptide),三肽(Tripeptide),甚
活性肽的作用
活性肽主要控制人體的生長、發育、免疫調節和新陳代謝,它在人體處于一種平衡狀態,若活性肽減少后,人體的機能發生重要變化,對于兒童來說,他的生長、發育變得緩慢,甚至停止,長久下去就形成了侏儒,對成年人或老年人,缺少活性肽后,自身的免疫力就會下降,新陳代謝紊亂,內分泌失調,引起各種疾病的產生,如失眠、
生物活性肽簡介
生物活性肽(Bioactive Peptides ,BAP)是蛋白質中20種天然氨基酸以不同組成和排列方式構成的從二肽到復雜的線性、環形結構的不同肽類的總稱,是源于蛋白質的多功能化合物。 [1] 生物活性肽具有多種人體代謝和生理調節功能,易消化吸收,有促進免疫、激素調節、抗菌、抗病毒、降血壓、降
活性肽的作用
活性肽主要控制人體的生長、發育、免疫調節和新陳代謝,它在人體處于一種平衡狀態,若活性肽減少后,人體的機能發生重要變化,對于兒童來說,他的生長、發育變得緩慢,甚至停止,長久下去就形成了侏儒,對成年人或老年人,缺少活性肽后,自身的免疫力就會下降,新陳代謝紊亂,內分泌失調,引起各種疾病的產生,如失眠、
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測法
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?VIP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的VIP與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠VIP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Strept
酪蛋白激酶分析實驗_用多肽底物
實驗方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 進行分析,最近釀蛋白激酶 II 也已被特異性的多肽底物分析,如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu(下劃線殘基是磷酸受體)。兩個多肽均可通過精氨酸殘基結合到 P81 磷酸纖維
蛋白質磷酸化的蛋白磷酸激酶的純化與活性分析
蛋白磷酸激酶是能催化磷酸基團從磷酸供體轉移到受體蛋白的酶,通常ATP的γ位磷酸(或其它三磷酸核苷)為供體。國際生物化學聯合會根據受體氨基酸的特異性,將蛋白激酶分為以下幾類: ①以蛋白乙醇基作為受體的磷酸轉移酶稱為蛋白絲氨酸或蘇氨酸激酶; ②以苯基為磷酸受體的磷酸轉移酶稱為蛋白酪氨酸激酶;
大連化物所團隊開發出一種檢測酪氨酸磷酸化的新方法
近日,我所生物分離與界面分子機制創新特區研究組(18T7組)卿光焱研究員與中藥科學研究中心(2800組)梁鑫淼研究員合作,在蛋白質磷酸化研究方面取得新進展,開發出一種智能聚合物功能化的仿生離子通道器件,實現了酪氨酸磷酸化的實時感知與測量,并在酪氨酸激酶抑制劑篩選中展現出較好的應用潛力。 蛋白酪
如何檢測血液中的葡萄糖激酶活性?
樣本收集:從患者那里收集血液樣本。 預處理:將血液樣本進行預處理,以分離血清或血漿。 酶活性測定:使用生化分析儀器,如分光光度計,來測定葡萄糖激酶的活性。這通常涉及到在含有足夠底物(如葡萄糖)的溶液中孵育血清或血漿樣本,并在一定時間內測量產物(如葡萄糖-6-磷酸)的生成量。 結果計算:根據
精準檢測去泛素化酶活性新型雙泛素底物的使用
?? ???泛素-蛋白酶體(ubiquitin-proteasome system,UPS)途徑介導的蛋白降解是機體調節細胞內蛋白水平與功能的一個重要機制。負責執行這個調控過程的組成成分包括泛素及其啟動酶系統和蛋白酶體系統。泛素啟動酶系統負責活化泛素,并將其結合到待降解的蛋白上,形成靶蛋白多聚泛
活性肽的主要應用
1.功能性食品:具有一定功能的肽類食品,目前是國際上研究的熱點。日本、美國、歐洲已捷足先登,推出具有各種各樣功能的食品和食品添加劑,形成了一個具有極大商業前景的產業。 2.肽類試劑:純度非常高,主要應用在科學試驗和生化檢測上,價格十分昂貴。 3.肽類藥物。 活性肽分子結構復雜程度不一,可從
活性肽種類的簡介
免疫活性肽、神經活性肽、其他活性肽等。 其他活性肽包括:膽固醇肽、促進礦物質吸收的肽(CPPS)、酶調節劑(如促胰酶肽)、激素肽如生長激素釋放因子(GRFS)、白蛋白胰島素增效肽、抗菌多肽(如乳酸鏈球菌素、橡膠素)、抗癌多肽(如腫瘤細胞壞死因子、環已肽)、抗艾滋病肽(如GLQ蛋白)等。