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    降低上皮細胞培養過程中的污染

    實驗方法原理上皮細胞易存在纖維細胞污染,其污染程度能夠采用特異的中等纖維蛋百亞基波形蛋內(vimentin,作為成纖維細胞的標記)和角蛋白(作為上皮細胞的標 記)抗體進行雙重免疫熒光染色。關于如何降低污染的方法前面已述及;另一種用來降低貼壁上皮細胞群屮成纖維細胞數量的方法是采用不同濃度的胰蛋白酶化。實驗步驟過程1) 用含 0.53 mmol/LEDTA,0.05% 胰蛋白酶的 HBSS 洗滌培養物一次。2) 加入同樣濃度的新配制的胰蛋白酶于培養物中,室溫放置 4 分鐘。3) 用吸管吸取胰蛋白酶上下吹打細胞以清洗培養物。在吹打過程中變圓的成纖維細胞漸被去除,只留下的上皮細胞。4) 再加人新鮮培養液以滅活殘留的胰蛋白酶。 注意事項注意事項若有必要,上述......閱讀全文

    痰液細菌學檢驗的標準化操作程序(SOP)

    1前言         眾所周知,傳統習慣程序的痰標本細菌學檢驗其臨床符合率并不高,其原因是多方面的。除了痰標本采集不規范導致的不合格標本帶來的培養結果與病人感染不相符外,還因為微生物和人體的相關性本身就具有復雜性:源自細菌的致病與條件致病

    幽門螺桿菌研究進展

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    原代細胞的培養與建系-1

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    實用哺乳動物細胞培養手冊(中)

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    實驗方法原理上皮細胞易存在纖維細胞污染,其污染程度能夠采用特異的中等纖維蛋百亞基波形蛋內(vimentin,作為成纖維細胞的標記)和角蛋白(作為上皮細胞的標 記)抗體進行雙重免疫熒光染色。關于如何降低污染的方法前面已述及;另一種用來降低貼壁上皮細胞群屮成纖維細胞數量的方法是采用不同濃度的胰蛋白酶化。

    細胞培養技術-3

    ◇水解乳蛋白  水解乳蛋白為淡黃色粉末,雖易潮解結塊,但不影響使用。  不同批號和牌號質量有差異。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解后的產物,含有豐富的氨基酸。開始時它是專為猴腎細胞培養設計的,而實際上它對許多細胞系(株),如Hela細胞和原代細胞都是一種優良培養基。使用時用Hanks液配制成0

    幽門螺桿菌研究進展--幽門螺桿菌及其感染

    總論篇1.幽門螺桿菌研究進展幽門螺桿菌及其感染1 概述  胃細菌學的研究,長期來是一個被忽視的領域。1983年Marshall和Warren從慢性活動性胃炎患者胃粘膜活檢標本中分離到幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是對這一領域重要的突破。此后不久即在國際消化病學界引起了巨大

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    實驗概要    經歷了天然培養基、合成培養基后,無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。 實驗原理    無血清培養基(serum free  medi

    無血清培養基

       細胞培養(cell culture)就是從機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的培養基 中,讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養最常見的是合成培養基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清進行培養;但是大量使用牛血清制品有許多缺陷,如,動物源成分,

    無血清培養基

    細胞培養(cell culture)就是從機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的培養基 中,讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養最常見的是合成培養基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清進行培養;但是大量使用牛血清制品有許多缺陷,如,動物源成分,無法用于臨床研究;成分復雜

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    實驗概要了解傳代細胞的傳代方法及操作過程,學習觀察體外培養細胞的形態及生長狀況。實驗原理傳代培養是指細胞從一個培養瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養瓶的培養。這種培養,第一步也是制備細胞懸液,當細胞長成致密單層時,它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破壞。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(

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    細胞培養技術

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    近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。

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    把細胞消化下來(同5)并離心。用配好的凍存液把細胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管里,4℃冰箱30min,-20℃30min,-80℃過夜,寫明細胞種類,凍存日期。然后放到液氮灌中保存。 凍存液的配制:50%的完全培養基+40%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。 培養細

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