干細胞培養制造技術新進展（一）
干細胞是一種能夠長期存活，且具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能，幾乎存在于所有組織中的原始細胞。近年來隨著科學家們研究的深入，干細胞在血液系統疾病、神經系統疾病、心血管疾病、自身免疫系統疾病以及內分泌疾病等各種疾病的治療上讓人們看到了希望。干細胞技術是當今醫學研究最前沿也是最熱門的方向之一，近年來發展迅猛，也取得了令人興奮的成果；同時科學家們在干細胞的培養制造上也取得了巨大的成就，近日刊登在Cell Stem Cell上的一項研究報告中，來自麻省總醫院的科學家就開發出了一種新程序，該程序或許會徹底改變成人干細胞的培養程序。本文中，小編就對干細胞制造培養的新技術或進展進行了盤點，與大家一起分享。【1】SCTM：首次開發出生產成體干細胞的方法澳大利亞昆士蘭大學科學家在世界上首次開發出生產成體干細胞的方法，這一研究成果將深刻影響著患有一系列嚴重性疾病的病人。這項研究是包括昆士蘭大學澳大利亞生物工程和納米技術研究所在內的多家研究機構合......閱讀全文
牙髓干細胞的分離培養——牙髓干細胞/乳牙干細胞原代培養
實驗材料牙髓組織試劑、試劑盒滅菌PBSAMSC培養基膠原酶中性蛋白酶免疫磁珠分選時所需試劑：含1%BSA的PBSA與DPSC反應的一抗用STRO-I(小鼠抗人MSC;IgM)CC9(小鼠抗人CD146 MUC-18;IgG2a)或3G5(小鼠抗人外膜細胞；IgM)儀器、耗材羊抗小鼠IgG-結合或大鼠
脂肪干細胞培養
吸脂術時用無菌針管從臀上方吸取深層脂肪組織20 mL. 在1 h內將其移至離心管內，加入等量PBS緩沖液，充分振蕩后低速離心800 r/min×10 min. 反復沖洗3次后加入等量15 g/L I型膠原酶. 37℃水浴中充分振蕩30 min，再加入等量胎牛血清（FBS）中止. 低速離心10
脂肪干細胞培養和擴增實驗_脂肪干細胞的原代培養
實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒ASC培養基儀器、耗材組織培養瓶 25cm2實驗步驟(a)待細胞貼壁生長2?4天后換液。(b)換液時通過棄去培養基，從而去除未貼壁的細胞。(c)以后每周更換培養基2次。
乳腺干細胞的培養實驗
實驗材料組織標本試劑、試劑盒無菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸鹽CMD3培養基膠原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培養瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2儀器、耗材搖床離心管實驗步驟(a)手術后，立即將組織標本轉移至DMEM/F12(1:1)。(
乳腺干細胞的培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織標本試劑、試劑盒 無菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸鹽CMD3培養基膠原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培養瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2儀器、耗材 搖床離心管實驗步驟 (a)手術后，立即將組織標本轉移至DMEM
培養干細胞的凍存
干細胞低溫凍存是培養室常規工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。?1． 凍存細胞?（1）選對數增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前1d換液。?（2）按常規方法把培養細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達5×10 7 ／ml左右密度，離心，去
毛囊干細胞的分類培養
毛發的周期性自我更新以及生長依賴于毛囊干細胞（hair follicle stem cells，HFSCs）周期性增殖和分化。目前研究認為HFSCs 定位于毛囊外根鞘的隆突區，大致是毛囊外根鞘最外層靠近立毛肌附著點處。研究HFSCs 對于禿發的發病機制、毛囊組織工程以及干細胞或基因治療禿發方面均
胚胎干細胞培養
Media and Solution required for ES Cell Culture?(Bowtell Lab)???Routine Culturing of ES Cells?(Bowtell Lab)??Routine Splitting and freezing of cells?(
乳腺干細胞的培養實驗
乳房縮小整形術組織標本中上皮細胞的制備IrECM三維培養乳腺干細胞實驗方法原理實驗材料組織標本試劑、試劑盒無菌DMEM F12 ?50:50 ?加人1.2 mg ml重碳酸鹽 CMD3培養基 膠原酶 ?900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培養瓶 625px2 Vitrogen包被 ?8μg
脂肪源干細胞的培養
（1）吸脂術時用無菌針管從臀上方吸取深層脂肪組織20 mL。（2） 在1 h內將其移至離心管內，加入等量PBS緩沖液，充分振蕩后低速離心800 r/min×10 min。（3）反復沖洗3次后加入等量15 g/L I型膠原酶，37℃水浴中充分振蕩30 min，再加入等量胎牛血清（FBS）中止。（4）低
牙髓干細胞的分離培養
牙隨組織的分離 牙髓干細胞DPSCs/乳牙干細胞SHED的原代培養 DPSCs的傳代培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
牙髓干細胞的分離培養
實驗方法原理 實驗材料 牙試劑、試劑盒 滅菌無Ca2+和Mg2+的PBS(PBSA)MSC培養基消毒液（如聚維酮碘）儀器、耗材 非滅菌使用高速牙科鉆時的裝備（如空氣壓縮機）培養皿精細鑷（小號和大號）牙科碳化鉆頭牙挖器高速牙科鉆實驗步驟 (a)用PBSA洗三遍，充分清潔牙齒表面。(b)用消毒液消毒，然
神經干細胞的培養
神經干細胞的培養可以用于（1）使其特定分化為神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞；（2）其可以自我更新并能提供大量腦組織細胞的細胞群。來源：《神經生物學實用實驗技術》第四軍醫大學出版社實驗方法原理由于神經干細胞(Neural Stem Cell)具有自我更新和多向分化的潛能，因此，可以采用懸浮神經球培
神經干細胞的培養
一、 ?神經干細胞的分離無菌條件下取新生SD大鼠（出生48h內）腦組織，D-Hanks液充分漂洗后，在解剖顯微鏡下剝離腦膜，準確分離海馬，用眼科剪將海馬剪碎后，再轉移到DMEM/F12（1:1）加B27 和bFGF（20ng/ml）的無血清培養基，吸管吹打機械分離制作單細胞懸液，臺盼藍染色后
神經干細胞的培養
神經干細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由于神經干細胞(Neural Stem Cell)具有自我更新和多向分化的潛能，因此，可以采用懸浮神經球培養的方法來獲得和研
脂肪干細胞培養和擴增實驗_脂肪干細胞的傳代培養
分離獲得ASC后，可以通過連續傳代使其生長和擴增。原代培養后，傳代2?3次，ASCs呈現單層，大而扁的細胞形態，其直徑在25?30μm。待細胞達到匯合時，它們形態上呈紡錘體形，類似于成纖維細胞。來源：《人干細胞培養》實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒ASC培養基PBSA胰蛋白酶儀器、耗材組織培養瓶 25
培養人角膜間質干細胞實驗
實驗材料 完整的人角膜 試劑、試劑盒 CMF-SaIineG中性蛋白酶IIL型膠原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶DMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB GASP:DME
培養人角膜間質干細胞實驗
實驗方法原理實驗材料完整的人角膜試劑、試劑盒CMF-SaIineG 中性蛋白酶II L型膠原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中 CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶 DMEM ?F-12 GASP DMEM F-12 2FB GASP:DMEM F
小鼠胚胎干細胞的培養
完全培養基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巰基乙醇(GIBCO 21985); 1
培養人角膜間質干細胞實驗
實驗方法原理實驗材料完整的人角膜 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒CMF-SaIineG ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
膠質瘤干細胞培養
膠質瘤是顱內最常見的腫瘤，病因不清。切除后容易復發，放射治療和化療效果不理想。近年來從成年的腦組織中可以培養出神經干細胞，傳統的觀點認為，膠質瘤中只含有膠質細胞，沒有神經元。近期的研究證明，膠質瘤在體外分化為神經元和星形膠質細胞，證明了膠質瘤中存在干細胞的可能性。這種細胞能夠同時表達神經元和星形膠質
小鼠胚胎干細胞的培養
實驗概要了解小鼠胚胎干細胞的培養方法。主要試劑1. 貯存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺（200mM） MEM NEAA（10mM） HEPES（1M） β-巰基乙醇（55Mm） 轉鐵蛋白50mg/ml 胰島素5mg/ml 亞硒酸鈉300μM 黃體酮（20μM） 腐
培養干細胞，原來還能這樣操作
“設備為我國全自主知識產權，首次實現了以機器學習及人工智能算法為邏輯判定的細胞重編程命運的自動化誘導。設備的成功研制，改善了我國高端生命科學儀器裝備幾乎依靠歐美進口的局面，其成果展示了我國在細胞制備領域高端科研裝備的先進性；為降低細胞的生產成本、提高細胞制備質量、更廣泛地服務臨床奠定了裝備基礎。
小鼠精原干細胞分離培養
實驗概要小鼠精原干細胞分離培養主要試劑0.1%明膠、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目細胞篩、精原干細胞培養液、1 mg/mL膠原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、細胞基礎培養液、DMEM-C、精原干細胞凍存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)（4℃條件下可
牙髓干細胞的分離培養——DPSCs的傳代培養
實驗材料牙髓組織試劑、試劑盒滅菌PBSAMSC培養基胰蛋白酶-EDTA溶液：0.05%胰蛋白酶0.54mmol L(0.2%)EDTA無Ca2+和Mg2+的Hank’s平衡鹽溶液溶解儀器、耗材培養皿實驗步驟(a)用PBSA洗培養瓶/皿三次。(b)加足夠的胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育。(c)在8
胚胎干細胞培養技術大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURE Routine Culturing of ES Cells ISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTS MITOM
Nature子刊：低價干細胞培養
人類多能干細胞（human pluripotent stem cells，hPSCs）可無限自我更新、發育成人體所需的所有細胞類型。這種細胞的大量培育成本較高。日本京都大學與印度和伊朗的科學家同事開發出了一種更劃算的干細胞培養基。 現在的培養系統包括維持hPSCs自我更新、阻止它們分化為其他細
干細胞培養傳統方法受質疑
人類干細胞通常是在一層飼養細胞上培養的，據認為，這可為細胞提供必需的營養物質，并有助于防止細胞分化。最近，一項新的研究對這種根深蒂固的做法提出了挑戰。延伸閱讀：更安全的干細胞培養新方法。 眾所周知，干細胞是很難維持和培養。像所有的真核細胞一樣，它們對養分的有效性、pH值、溫度、氧氣和二氧化碳的
神經干細胞的建系培養
實驗概要神經干細胞的建系培養主要試劑神經干細胞培養液主要設備移液槍、3.5 cm細胞培養皿實驗步驟（1）分離、分選得到的細胞用神經干細胞培養液培養，每2 d予以半量換液一次。注意換液時動作要輕，不要吸到神經球。（2）培養2～4 d后可觀察到神經球在培養液中呈懸浮生長，每次分離得到的神經球記為一個系。
日研發出大量培養干細胞新法
誘導多功能干細胞(iPS細胞)能發育成多種細胞和組織，在再生醫療領域有廣闊應用前景，但卻面臨難以大量生產和培養成本高等難題。日本京都大學的研究小組開發出一種新方法，有望實現批量生產。 研究人員曾發現，利用培養皿增殖iPS細胞時，每個培養皿中新生的iPS細胞數量很有限。如果在底部很深的容器中