ADC單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(三)
經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子量分布圖如下所示(圖 4),根據單抗的氨基酸理論序列分子量進行計算,將觀察到的質譜峰進行歸屬,從圖中我們觀察到,該 ADC 單抗分子之間存在 956 Da 左右的質量增加,由此推斷該單抗分子結合了不同數目的分子量在 956 Da 左右的藥物小分子,并且最多可以檢測到 6 個藥物小分子的結合。同時還觀察到 160 Da 左右的質量增加,這主要是由于連接基團的存在引起的。從而初步推斷該 ADC 單抗藥物主要結合了 6 個 ADC 小分子藥物,該結果與理論值基本一致,同時根據質譜峰的峰強度信息,我們還可以計算得到該藥物的 ADR 值,該數值對于 ADC 藥物的有效性評估至關重要。 圖 4. Q-Exactive 質譜采集的 ADC 單抗原始質譜圖經過 ProteinDeconvolution 2.0 軟件去卷......閱讀全文
ADC-單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(三)
經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子量分布圖如下所示(圖 4),根據單抗的氨基酸理論序列分子量進行計算,將觀察到的質譜峰進行歸屬,從圖中我們觀察到,該 ADC 單抗分子之間存在 956 Da 左右的質量增加,由此推斷該單抗分子結合了不同數目的
ADC-單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(二)
2.1.3 數據分析方法采用 Protein Deconvolution 2.0 軟件對原始質譜圖進行去卷積處理,得到完整的蛋白質分子量信息。?2.2 氨基酸序列、糖基化位點和 ADC 藥物結合位點測定?2.2.1 儀器和試劑質譜儀器:Q-Exactive(賽默飛世爾科技,美國);色譜儀器:Acce
ADC-單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(一)
ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以及ADC 藥物結合位點鑒定1. 前言單克隆抗體藥物是具有高度特異性的靶向藥物,能夠特異性作用于腫瘤細胞,被譽為治療惡性腫瘤的“生物導彈”。ADC 抗體藥,則是在抗體蛋白的特定天然氨基酸上非定點偶聯具有抗腫瘤作用的化療藥物(或稱小分子藥物),以增加
ADC-單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(四)
3.2 糖基化位點確定ADC 單抗蛋白與其他單抗蛋白相同,也都包含 N-糖基化修飾,一般發生在保守序列 NXS 或 NXT 中(X 為除脯氨酸外的任意氨基酸)。在糖鏈完整的情況下,直接進行 trypsin 酶解,我們在搜庫時進行 G0F 糖基化可變修飾設定,可以直接獲得該 N 糖基化位點:重
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定-三
經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子質量分布圖(圖 3),根據單抗的氨基酸序列理論分子質量進行計算,將觀察到的質譜峰進行歸屬,可以初步推斷該單抗藥物存在多種形式的糖鏈結構,主要包括 G0、G0F、G1F 和 G2F,該結論與常見的單抗組成基本
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定-一
1. 前言單抗藥物主要是由兩條重鏈和兩條輕鏈通過鏈內和鏈間二硫鍵以及非共價鍵組成,分子質量大約在 150 kD 左右,每條重鏈和輕鏈在 N 端都包含一個可變區域,在 C 端都包含一個恒定區域,并且在每條重鏈上還存在一個 N 糖基化位點,該位點含有不同的糖鏈結構,如圖 1 所示。目前,在生
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定-二
質譜分析條件:具體見表 4;?表 3. 氨基酸序列測定的色譜分析條件表 4. 氨基酸序列測定的質譜分析條件?2.2.3 數據分析方法采用 Proteome Discoverer 1.3 軟件對原始譜圖進行數據庫搜索,具體搜庫參數為:包含單抗氨基酸序列的數據庫;半胱氨酸(C)烷基化(+57.021
質譜技術在抗體藥物分析中的應用
質譜技術是抗體藥物分析最重要的技術手段之一。本文簡述了抗體藥物的發展和質譜技術的原理。對于質譜技術在抗體藥物的分析中應用進行了歸類整理,主要分為在一級結構和高級結構分析中的應用。抗體類藥物是指含有抗體片段的蛋白類藥物,所以在惡性腫瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快
質譜技術在抗體藥物分析中的應用
質譜技術是抗體藥物分析最重要的技術手段之一。本文簡述了抗體藥物的發展和質譜技術的原理。對于質譜技術在抗體藥物的分析中應用進行了歸類整理,主要分為在一級結構和高級結構分析中的應用。抗體類藥物是指含有抗體片段的蛋白類藥物,所以在惡性腫瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快
序列標簽位點的定義
序列標簽位點(sequence-tagged site),是已知核苷酸序列的DNA片段,是基因組中任何單拷貝的短DNA序列,長度在100~500bp之間。
序列標簽位點的簡介
任何DNA序列,只要知道它在基因組中的位置,都能被用作STS標簽。作為基因組中的單拷貝序列,是新一代的遺傳標記系統,其數目多,覆蓋密度較大,達到平均每1kb一個STS或更密集。這種序列在染色體上只出現一次,其位置和堿基順序都是已知的。在PCR反應中可以檢測出STS來,STS適宜于作為人類基因組的一種
什么是序列標簽位點?
序列標簽位點(sequence-tagged site),是已知核苷酸序列的DNA片段,是基因組中任何單拷貝的短DNA序列,長度在100~500bp之間。
序列標簽位點圖的定義
中文名稱序列標簽位點圖英文名稱sequence tagged site map定 義標明序列標簽位點在基因組上位置的物理圖。應用學科遺傳學(一級學科),基因組學(二級學科)
關于糖基化的基本概念介紹
指在糖基轉移酶作用下,非糖生物分 子與糖共價結合的過程或反應。根據連接方式可將 糖基化分為D連接糖基化和Ⅳ-鏈糖基化。上市的重組單克隆抗體(單抗)藥物除不含Fc段的 5個片段抗體為非 糖基化抗體外,其余全部為N-連接糖基化單抗,Fc 融合蛋白(如Etanercept等)還存在有連接糖基 化。N-
糖基化的概念和舉例
指在糖基轉移酶作用下,非糖生物分 子與糖共價結合的過程或反應。根據連接方式可將 糖基化分為D連接糖基化和Ⅳ-鏈糖基化。上市的重組單克隆抗體(單抗)藥物除不含Fc段的 5個片段抗體為非 糖基化抗體外,其余全部為N-連接糖基化單抗,Fc 融合蛋白(如Etanercept等)還存在有連接糖基 化。N-糖基
解析糖基化修飾及位點分析
經常聽到糖基化修飾,今天帶大家一探究竟。什么是糖基化修飾呢?糖基化是在糖基轉移酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網和高爾基體。糖基化修飾是一類非常重要的翻譯后修飾,大部分膜蛋白和分泌蛋白均為糖蛋白,糖基化修飾不僅影響蛋白質的空間構象、活性、運輸和定位,同時在信號轉導、分子識別,
解析為何純化蛋白與人血清蛋白分子量不一樣
蛋白質作為生命活動中起重要作用的生物大分子,與一切揭開生命奧秘的重大研究課題都有密切的關系。蛋白質是人類和其他動物的主要食物成分,高蛋白膳食是人民生活水平提高的重要標志之一。以下針對純化蛋白與人血清蛋白分子量不一樣作分析:客戶問:用大腸桿菌表達純化的蛋白,和人血清中這種蛋白的分子量不同,wester
《自然·癌癥》重磅綜述:抗體靶向藥物全攻略!
提問:對抗癌癥的第一種精準靶向藥物,屬于哪一類藥物呢?答案:1997年進入臨床的利妥昔單抗。自此之后的二十多年里,憑借高特異性、高親和力、長半衰期和強力殺傷等眾多優勢,基于單克隆抗體的靶向藥物一個接一個問世,變革了許多癌癥的治療,用“豐功偉績”來夸贊,似乎都略顯蒼白了。而且最近幾年,基于抗體的靶向新
液相色譜耦聯Q-Exactive-臺式軌道阱質譜儀分析利...(七)
??圖 11. 將利妥昔抗體還原、烷基化、胰蛋白酶切后,酶切后肽段的基峰色譜圖。??圖 12. 利妥昔單抗輕鏈和重鏈的氨基酸序列。黑色字母顯示的氨基酸代表通過二級質譜圖鑒定到的部分。綠色顯示的序列是僅通過完整肽段一級全掃描數據鑒定到的。紅色顯示的是重鏈部分的兩個氨基酸(AK),他們既不能用一級也
操縱MCU-SPI接口以訪問非標準SPI-ADC(三)
MCU固件開發注意事項當軟件處于中斷模式時,DCLK運行速率可以高達4 MHz,實現8 kSPS的ODR。軟件應進入中斷處理程序,在一個半DCLK周期(375 ns)內啟動SPI。為使軟件更輕松地進入中斷例程,MCU可以在DCLK上升沿讀取數據,從而提供額外的半個DCLK周期時間。但是,t5
血凝素的生物組成
病毒基因組片段4編碼流感病毒的主要膜蛋白血凝素(HA),各型及亞型病毒的HA基因長度略有不同,從1742~1778核苷酸不等。HA蛋白的命名來源于病毒顆粒通過HA蛋白與特異性含唾液酸的受體結合,凝集血紅細胞。其合成是首先在細胞內質網合成分子量為 76 kD、含有 562~566個氨基酸的 HA蛋白前
血凝素的生物組成
病毒基因組片段4編碼流感病毒的主要膜蛋白血凝素(HA),各型及亞型病毒的HA基因長度略有不同,從1742~1778核苷酸不等。HA蛋白的命名來源于病毒顆粒通過HA蛋白與特異性含唾液酸的受體結合,凝集血紅細胞。其合成是首先在細胞內質網合成分子量為 76 kD、含有 562~566個氨基酸的 HA蛋白前
簡述血凝素的生物組成
病毒基因組片段4編碼流感病毒的主要膜蛋白血凝素(HA),各型及亞型病毒的HA基因長度略有不同,從1742~1778核苷酸不等。HA蛋白的命名來源于病毒顆粒通過HA蛋白與特異性含唾液酸的受體結合,凝集血紅細胞。其合成是首先在細胞內質網合成分子量為 76 kD、含有 562~566個氨基酸的 HA蛋
α微管蛋白:新的藥物結合位點
微管(Microtubule)是抗腫瘤藥物研發的重要靶點。微管是“細胞的骨架”主要成分之一,在許多細胞重要事件中起著關鍵作用。微管是由α-和β-微管蛋白(Tubulin)異二聚體可逆地組裝成而成的線性管裝結構(圖1)。 圖1:微管蛋白已知的六個結合位點及微管蛋白組裝形成微管示意圖 目前,微管
新一代抗體藥物大盤點
抗體藥物已成為整個制藥行業中發展最快的領域之一,目前,基于新一代技術平臺,有70只產品正在進行臨床開發。本文盤點了新一代抗體藥物,包括ADC、工程抗體、多特異性抗體、非免疫球蛋白配體等。 新一代抗體藥物盤點 目前,基于新一代技術平臺,有70只產品正在進行臨床開發,絕大多數都處于Ⅰ期研究中。腫
上海交大朱建偉:自主創新是生物藥物研發的根本道路
生物類藥物發展現狀 自2000年以來,生物藥物市場平均每年以10%以上的增長率發展,這一趨勢將持續到2020年甚至到更長的時間。最近生物藥物市場最暢銷的前10種藥物中,大概有7~8個是生物類藥物,其中大部分是抗體藥物。由此可知,生物類藥物(抗體藥物)主導了藥物發展趨向。 從最近15年中國單抗
白血病抑制因子的分子結構和基因
人和小鼠LIF基因分別定位于第22號和第11號染色體,基因長度分別人6.0kb和6.3kb,均含有3個外顯子和2個內含子,基因編碼區域具有高度的保守序列,其同源性在78~94%。LIF為180個氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個糖基化位點,6個Cys,分子內部二硫鍵對于維持LIF分子的結構和
白血病抑制因子的分子結構和基因
人和小鼠LIF基因分別定位于第22號和第11號染色體,基因長度分別人6.0kb和6.3kb,均含有3個外顯子和2個內含子,基因編碼區域具有高度的保守序列,其同源性在78~94%。LIF為180個氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個糖基化位點,6個Cys,分子內部二硫鍵對于維持LIF分子的結構和
關于白血病抑制因子的結構和基因介紹
人和小鼠LIF基因分別定位于第22號和第11號染色體,基因長度分別人6.0kb和6.3kb,均含有3個外顯子和2個內含子,基因編碼區域具有高度的保守序列,其同源性在78~94%。LIF為180個氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個糖基化位點,6個Cys,分子內部二硫鍵對于維持LIF分子的結
關于LIF的分子結構和基因的介紹
人和小鼠LIF基因分別定位于第22號和第11號染色體,基因長度分別人6.0kb和6.3kb,均含有3個外顯子和2個內含子,基因編碼區域具有高度的保守序列,其同源性在78~94%。LIF為180個氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個糖基化位點,6個Cys,分子內部二硫鍵對于維持LIF分子的結