從臍靜脈分離干細胞
試劑和材料：1. 培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4. 膠原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培養瓶；6. 導管；實驗方法：1. 在正常分娩后6-12h內收集和處理臍帶；2. 在臍靜脈內插入導管，用PBSA完全地洗2次；3. 夾住遠端臍帶；4. 用0.1%膠原酶溶液充滿靜脈；5. 夾住近端臍帶；6. 將臍帶在37℃孵育20min；7. 輕輕按摩臍帶，收集含有內皮和內皮下層細胞的懸浮液，600g離心10min；8. 用培養基重懸細胞；9. 計數后，按1×103個細胞/cm2的密度將細胞接種到75cm2的培養瓶中；10. 3天后更換培養基，除去未貼壁細胞，保留貼壁的細胞繼續生長，每3天更換一次新鮮培養基，至大約2周后可見成纖維樣細胞生長；11. 在這種情況下，用0......閱讀全文
從臍靜脈分離干細胞
試劑和材料：1. 培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4. 膠原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培養瓶；6. 導管；實驗方法：1.
從臍靜脈分離干細胞操作步驟
從臍靜脈分離干細胞試劑和材料：培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2.A；3.胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4.膠原酶A，0.1%用A配制；5.培養瓶；6.導管；實驗方法：在正常分娩后6
臍帶和臍血來源干細胞的培養實驗_從臍靜脈分離干細胞
實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶培養基儀器、耗材導管實驗步驟(a)在正常分娩后6?12h內收集和處理臍帶。(b)在臍靜脈內插入導管，用PBSA完全地洗2次。(c)夾住遠端臍帶。(d)用0.1%膠原酶溶液充滿靜脈。(e)夾住近端臍帶。(f)將臍帶在37℃孵育20min。(g)輕輕按摩臍帶，收集含有內皮和
臍血臍帶中干細胞分離實驗—臍血來源胚胎樣干細胞分離
實驗材料臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)試劑、試劑盒滅菌培養基TPOFLK細胞因子混合物（10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配體和20 ng mL c-kit配體）ACD-A緩沖液小鼠抗人CD45CD33CD47單克隆抗體抗血型糖蛋白A抗體2%人丙種球蛋白（HAG。用P
臍血臍帶中干細胞分離實驗
非限制性體干細胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分離臍血來源胚胎樣干細胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分離臍血來源多能前體細胞（cord blood-derived multip
臍血臍帶中干細胞分離實驗
非限制性體干細胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分離 臍血來源胚胎樣干細胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分離 臍血來源多能前體細胞（cor
臍血臍帶中干細胞分離實驗
實驗方法原理 實驗材料 臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)試劑、試劑盒 滅菌起始培養基擴增培養基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材 T25培養瓶實驗步驟 (a)制備和分離臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分
臍血臍帶中干細胞分離實驗—臍血來源多能前體細胞分離
實驗材料臍血來源的MNCs。試劑、試劑盒滅菌培養基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材T25培養瓶實驗步驟(a)分離和制備臍血來源的MNCs。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。(c)細胞復蘇后在30 min內，用臺盼藍染色進行活細胞計數。(d)
臍血臍帶中干細胞分離實驗—非限制性體干細胞的分離
實驗材料臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)試劑、試劑盒滅菌起始培養基擴增培養基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材T25培養瓶實驗步驟(a)制備和分離臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。(c)用起始培
血管內皮細胞的分離和培養_分離人臍靜脈內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改寫的。實驗材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內酶H冷的新生小牛血試劑、試劑盒Hank平衡鹽溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生長培養液儀器、耗材培養瓶手術刀和22號刀片手術針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁箔塑料
人臍靜脈內皮細胞分離培養儀器試劑和操作步驟
溶液以及器材：1、用RPMI-1640配I型膠原酶 0.1g/100ml2、配三抗：青霉素：100ku/L鏈霉素：100ku/L慶大霉素：100ku/L3、培養液（M199＋ECGS[3ug/ml]＋15％胎牛血清）有EGF可以適當加點10ng/ml4、大瓶生理鹽水5、廣口瓶（臍帶數＋1）6、止血鉗
采用密度梯度離心法分離臍血干細胞
? ? 利用 3 種質量濃度的聚蔗糖泛影葡胺分離液分離臍血單個核細胞，用細胞計數法、活細胞染色法及流式細胞計數儀分析單個核細胞的表面標志，以探討密度梯度離心法分離人臍血干細胞分離介質的zui佳濃度，建立臨床級干細胞分離應用方案，使用的離心機設備為冷凍離心機? ? 臍血由于其來源容易，所含細胞種類和數
采用密度梯度離心法分離臍血干細胞
?利用 3 種質量濃度的聚蔗糖泛影葡胺分離液分離臍血單個核細胞，用細胞計數法、活細胞染色法及流式細胞計數儀分析單個核細胞的表面標志，以探討密度梯度離心法分離人臍血干細胞分離介質的zui佳濃度，建立臨床級干細胞分離應用方案，使用的離心機設備為冷凍離心機? ? 臍血由于其來源容易，所含細胞種類和數量比較
臍血MSCs的分離
試劑和材料：?1.?培養基；2.?0.05%胰蛋白酶，含EDTA；3.?PBSA；4.?T25；實驗方法：1.?為了獲得新鮮制備的CB-MNCs，按密度梯度分離法分離單個核細胞（MNCs）；2.?用培養基重懸新鮮分離或凍存的MNCs。凍存的MNCs在鋪板前要37℃迅速復蘇并用培養基洗一遍；3.?將重
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）可用于：（1）作為體外實驗模型細胞；（2）研究血管內皮細胞的生物學特性及其與各種疾病的關系。實驗方法原理本實驗采用新鮮的健康產婦新生兒臍帶，采用膠原酶Ⅰ型用消化分離得到臍靜脈內皮原代細胞。膠原酶是最理想的血管內皮細胞分離酶，對細胞間質有較強的消化作用，能使上皮細胞與膠原
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養
1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。（注：4℃下最多貯存 24 小時，室溫下不超過 6 小時，否則廢棄）2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中，用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次，將污血沖洗干凈為止。3. 用手術鉗夾緊臍帶下端，加入 15ml 的膠原酶（1mg
人臍靜脈內皮細胞的介紹
人臍靜脈內皮細胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在進行血管內皮細胞實驗時，通常選用的細胞模型為人臍靜脈內皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells，簡稱HUVECs)。而不是直接采用靜脈血管內皮細
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養
實驗材料 新生兒臍帶試劑、試劑盒 PBS膠原酶M199培養基胰酶EDTADMEM培養基儀器、耗材 針頭手術鉗離心管低溫離心機彎管明膠恒溫培養箱顯微鏡實驗步驟1. 將15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的PBS 溶液中儲存。（注：4℃下最多貯存24 小時，室溫下不超過6 小時，否則廢棄）2. 用一個
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養1 ).?將15-20cm長的新生兒臍帶放入無菌的PBS溶液中儲存。（注：4℃下最多貯存24小時，室溫下不超過6小時，否則廢棄）2 ).?用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中，用無菌的PBS溶液沖洗3-5次，將污血沖洗干凈為止。3 ).?用手術鉗夾緊臍帶下端，加入15m
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養
人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養?1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。（注：4℃下多貯存 24 小時，室溫下不超過 6 小時，否則廢棄）?2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中，用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次，將污血沖洗干凈為止。?3. 用手術鉗夾緊臍帶
臍靜脈內皮細胞培養方法1
一、試劑和緩沖液配制1、胎牛血清（氯化十六烷基吡啶）（1）解凍胎牛血清（2）在56℃加熱30分鐘（脫補體作用，蓋上瓶）（3）取25ml上述液體放在無菌的50ml的falcon里分餾（4）在-20℃冰凍餾份2、磷酸鹽緩沖液（PBS）（1）無鈣鎂離子的100ML的PBS（10×）（生命技術）（2）900
臍靜脈內皮細胞培養方法2
（2）術前準備取一根臍帶（離體3個小時內，平均1小時，剪去夾傷部位）2個50ML注射器，1個30ML注射器和1個10ML注射器1個止血鉗，2根插管，14號線2CM長，消毒巾，消毒手術刀和無菌手套手術區域準備：一塊床單和無菌手套封套3 臍帶手術操作和培養（1）用手術刀整齊切斷臍帶兩端（2）靜脈（口徑最
人臍靜脈細胞HUVEC該如何分析檢測？
? 人臍靜脈細胞HUVEC是從臍靜脈分離的原代細胞，這些細胞是用于研究內皮細胞的模型系統。它們用于研究缺氧，炎癥，氧化應激，感染，正常和與腫瘤相關的血管生成。細胞因子（例如TNF-α和IFN-γ）誘導內皮細胞激活（炎癥反應）并導致細胞粘附分子（例如VCAM-1/CD106）的上調，可以通過熒光標記的
正常人臍靜脈內皮細胞的培養
正常人臍靜脈內皮細胞的培養 實驗材料： 1. 嬰兒臍帶； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2； 3. 培養用液：M199培養液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:
正常人臍靜脈內皮細胞的培養
實驗材料：1.?嬰兒臍帶；2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2；3.?培養用液：M199培養液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:1，V：V）混合消化液；D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年，HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現，HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時，24-27代的倍增時間為67個小時，27-30代的倍
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年，HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現，HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時，24-27代的倍增時間為67個小時，27-30代的倍
臍靜脈內皮細胞傳代培養方法
Sciencell公司的人臍靜脈內皮細胞（貨號#8000、HUVEC）是科研實驗中常用到的內皮細胞，當人臍靜脈內皮細胞達到80-90%融合時，需要對人臍靜脈內皮細胞進行傳代培養。傳代培養方法：1.準備培養瓶：用纖維粘連蛋白（貨號#8248、BPF）以2ug/cm2包被培養瓶，包被時間為37度一小時或
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年，HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現，HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時，24-27代的倍增時間為67個小時，27-30代的倍
臍帶和臍血來源干細胞的培養實驗_臍帶和臍血的準備
實驗材料臍帶試劑、試劑盒培養基：臍帶運輸培養基：Eagle基礎培養基（EBM)添加300 U mL青霉素300 μg mL鏈霉素150μg mL慶大霉素和lμg mL兩性霉素B。 MSCs培養基：含2 mmol L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM(LG-DMEM)添加10% 熱滅活胎牛血清（FBS)10