實驗材料 小鼠IL-4試劑、試劑盒 FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥收起 注意事項 ①取生長旺盛的D36細胞用IMDM培養液洗滌2次,懸于20%FCS-IMDM培養液,并調制濃度為2×104/ml。②~⑥參考IL-4測定。......閱讀全文
實驗方法原理白細胞介素1是一種重要的細胞因子,主要由單核-巨噬細胞產生,IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能,而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性 小鼠胸腺細胞
人類唾液中富含多種成分,如免疫球蛋白、激素、游離氨基酸、無機離子等,這些成分很好地反映了機體生物學功能及狀態。除此之外,經口服或注射的藥物亦可發現于其中。然而,這些成分并非是一成不變的,機體在受到疾病的侵擾下,體內免疫水平發生改變,分泌到唾液中的物質種類和含量發生相應改變,唾液用于疾病的診斷越來
隨著免疫學理論研究的深入,發現的細胞因子日益增多,并在免疫應答的調節和效應中起著重要作用,其在體內水平的高低直接反映機體的免疫狀況。細胞因子檢測的方法主要分三類:①細胞生物學活性檢測法。②免疫學標記技術,常用ELISA。③分子生物學方法,常用逆轉錄PCR檢測細胞因子的mRNA轉錄的情況。現以生物活性
實驗概要IL-1主要由活化的單核/巨噬細胞產生,具有廣泛的生物學活性。IL-1包括IL-1α和IL-1β,兩者分子量相近,且均能與IL-1R結合,故具有相似的生物學活性,常用的IL-1生物活性檢測法對兩者均適用。常用的IL-1生物活性檢測法包括:小鼠胸腺細胞增殖法、L929細胞增殖法、D10G4.1
白細胞介素-1(IL-1)主要是由活化的單核-巨噬細胞合成和分泌的一種細胞因子,具有活化淋巴細胞、協同刺激胸腺細胞增殖、參與抗體產生和促炎癥反應等多種生物學功能。IL-1有IL-1α和IL-1β構成,結合同種受體,表現相同的生物學活性。實驗方法原理IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠
(一)原理白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物
白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性,可
實驗概要IL-2主要由活化的CD4 T細胞產生,主要是促進T淋巴細胞的增殖與分化。IL-2是機體免疫網絡中最重要的細胞因子,因此IL-2的檢測已成為評價機體免疫功能狀態的重要指標之一。但由于IL-2是通過自分泌或旁分泌方式發揮其生物學效應的,在生理性免疫應答過程中,IL-2不出現于血液等體液中,故體
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用,生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中,我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用,以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用,生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中,我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用,以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的
根據特定疾病的分子標記選擇相應的治療方法和使用劑量是精準醫學的本質,在未來的歲月里這是一個重大的研究計劃。通過Schukur等人本月18日發表在Science上的研究表明在這一領域中,特別是在治療慢性炎癥性疾病方面,提供了一個重大的概念性進展。研究表明,合成生物學可用于生成和選擇性結合細胞因子信
為了進一步提高檢測基因的效率,我們對螢光素酶基因序列的密碼子進行了優化,使得它在多種哺乳細胞中的表達水平提高了5~10倍;同時,為了減少對基因的非特異性調控,我們也對螢光素酶的載體進行了優化,去除了載體上哺乳動物轉錄因子結合序列的保守序列,從而大大降低了實驗的本底,顯著提高了實驗的相對信號強度。優化
5月份即將結束了,5月份Science期刊又有哪些亮點研究值得學習呢?小編對此進行了整理,與各位分享。 1.Science:重磅!開發出延緩癌細胞生長的新方法 doi:10.1126/science.aai9372 癌癥是一種非常復雜的疾病,但是它的定義是相當簡單的:細胞發生異常和不受控制
1. Sci Sig:炎癥機制研究新突破 炎癥反應是機體應對損傷或者感染時發生的免疫反應,然而這一過程如果失控之后將導致疾病的發生。最近,來自莫納什生物醫學研發研究所的研究者們發現了炎癥反應過程中的關鍵生物學事件。該發現或許能夠促進新的治療炎癥疾病的療法的開發,例如動脈粥樣硬化、中風以及II型
(一)原理IL-8對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理鹽水溶液。 (2)淋巴細胞分層液比重為1.077+(-)0.001。 (3)2%瓊脂糖:稱取2g瓊脂糖,加入到10
IL-8中對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。實驗材料IL-8的誘生試劑、試劑盒右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材潔凈載玻片打孔器離心機培養箱實驗步驟一、IL-
1.重組蛋白表達體系MCE 重組蛋白表達體系主要有:大腸桿菌,酵母細胞,昆蟲細胞和哺乳動物細胞。2.重組蛋白純度和濃度測定重組蛋白純度測定方法:a. SDS-PAGE 測定法;b. HPLC 測定法;c. 銀染測定法。重組蛋白濃度測定方法:a. Bradford 蛋白定量測定法;b. BCA 蛋白定
二、細胞因子對神經內分泌系統的影響 細胞因子作為免疫遞質可影響神經內分泌的各項機能,其作用的生物學基礎有以下幾方面:(1)循環血中可檢測到IL-1、IL-6、TNF、IL-2等細胞因子,且在一定條件下濃度有較大波動;(2)神經細胞及神經內分泌細胞可穩定或受誘導而合成IL-1、IIL-
白細胞介素,簡稱白介素,是指在白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子,它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協調,相互作用,共同完成造血和免疫調節功能。白細胞介素在傳遞信息,激活與調節免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。 IL-6屬
用體外或體內試驗對機體的各種參與免疫應答的細胞進行鑒定、計數和功能測定,藉以了解機體的免疫狀態,并對某些臨床疾病的診斷,預后及療效觀察等也具有一定意義。一、免疫細胞的分離體外測定免疫細胞首先要從外周血或淋巴組織中分離所需的細胞。其主要方法是根據細胞的表面標記、理化性狀及功能等方面的差別進行設計。
一、NALP3炎性體的結構和分布 NALP3炎性體是一類分子量約為700kDa的大分子蛋白復合體,由核苷酸結合寡聚化結構域樣受體(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族成員NALP3、銜接蛋白ASC
白細胞介素(interleukins, ILs),簡稱白介素,最初是指由白細胞產生并在白細胞之間起調節作用的細胞因子,均為小分子多肽或糖蛋白類物質。1979年,第二屆國際淋巴因子專題會議將免疫應答過程中白細胞間相互作用的細胞因子統一命名為白細胞介素,并規定其命名規則。目前至少發現了38個白細胞介
實驗材料IL-4誘生試劑、試劑盒生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材細胞培養板培養箱實驗步驟一、IL-4生物學活性測定 CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算
細胞因子具有非常廣泛的生物學活性,包括促進靶細胞的增殖和分化,增強抗感染和細胞殺傷效應,促進或抑制其它細胞因子和膜表面分子的表達,促進炎癥過程,影響細胞代謝等。 一、免疫細胞的調節劑 免疫細胞之間存在錯綜復雜的調節關系,細胞因子是傳遞這種調節信號必不可少的信息分子。例如在T-B細胞
1 CAR-T細胞療法的生物學毒性 CAR-T細胞療法毒性反應的主要潛在機制包括:CAR-T細胞攻擊共表達腫瘤抗原的正常組織或器官,例如抗CD19的CAR-T細胞攻擊損傷正常B細胞,甚至可導致B細胞耗竭。[10-11]在某些不可預知的情況下,即使未表達CAR-T細胞的靶抗原,若正常組織所帶細
肺癌是全球最常見癌癥之一,也是癌癥相關死亡的主要原因。肺癌的兩種組織學亞型為NSCLC和SCLC,其中NSCLC包含80%以上的肺癌,如腺癌,鱗狀細胞癌和大細胞癌。外泌體是起源于大多數細胞的小囊泡,廣泛分布于生物體液,如唾液,血漿,尿液和母乳中。外泌體能夠通過轉移其內含物,如RNA(mRNA和非
感染一直是臨床各科醫師所面臨的重大課題,盡管監測手段多,但仍缺乏敏感而特異的動態監測指標?雖然血細胞分析可反應患者細菌感染的情況,但在創傷?應激時也會升高; 血菌培養只在大量細菌入血時才能獲陽性結果; 急性期反應蛋白( C-reactive protein,CRP) 在嚴重細菌感染時表現為血漿濃度明
第一節 免疫細胞的分離 一、外周血單個核細胞的分離 將2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液與1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液混合,其比重為1.077±0.002,可作為常規的淋巴細胞分離液,即Ficoll分離液。 主要用于分離外周血中單個核細胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要