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  • IL1生物學活性檢測

    實驗方法原理 IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠胸腺細胞增殖。進一步通過3H-TdR摻入法或染料攝入法判定小鼠胸腺細胞增殖量,推定IL-1的生物學活性。通過檢測IL-1的生物學活性,可了解單核-巨噬細胞等的功能。實驗材料 小鼠胸腺細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液LPS刀豆蛋白A3H-TdR實驗步驟 1. 小鼠巨噬細胞產生IL-1的誘導(1)常規收集小鼠腹腔巨噬細胞,10%FCS-IMDM培養液懸浮細胞2×106/ml,接種于24孔培養板,0.5 ml/well。(2)每孔加20 ug/ml LPS 0.15 ml,37度,5%CO2孵育36~48小時。 (3)此時培養上清內含巨噬細胞分泌的高水平IL-1,收集培養上清,12000 r/min 離心15分鐘,將上清移入新的1.5 ml 試管中,-20℃凍存。 2. IL-1的生物學活性測定(1)胸腺細胞......閱讀全文

    IL1生物學活性檢測

    實驗方法原理 IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠胸腺細胞增殖。進一步通過3H-TdR摻入法或染料攝入法判定小鼠胸腺細胞增殖量,推定IL-1的生物學活性。通過檢測IL-1的生物學活性,可了解單核-巨噬細胞等的功能。實驗材料 小鼠胸腺細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液L

    IL1生物學活性檢測實驗——小鼠胸腺細胞增殖法

    白細胞介素-1(IL-1)主要是由活化的單核-巨噬細胞合成和分泌的一種細胞因子,具有活化淋巴細胞、協同刺激胸腺細胞增殖、參與抗體產生和促炎癥反應等多種生物學功能。IL-1有IL-1α和IL-1β構成,結合同種受體,表現相同的生物學活性。實驗方法原理IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠

    TNFα生物學活性檢測方法

    光密度法 實驗材料 小鼠L929細胞 試劑、試劑盒 TNF標準品

    細胞因子生物學活性檢測

    實驗方法原理 白細胞介素1是一種重要的細胞因子,主要由單核-巨噬細胞產生,IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能,而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原

    TNFα生物學活性檢測方法

    基本原理TNF的生物學活性之一是能直接殺傷腫瘤細胞。TNF與相應受體結合后向細胞內移,被靶細胞溶酶體攝取導致溶酶體穩定性降低,各種酶外泄,引起細胞溶解。腫瘤細胞株對TNF-α的敏感性有很大的差異,用放線菌素D、絲裂酶素C、放線菌酮等處理腫瘤細胞,可明顯增強TNF-α殺傷腫瘤細胞活性。材料和試劑1,完

    干擾素生物學活性檢測

    實驗方法原理干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺單層細胞)產生抗病毒蛋白,從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊,根據待測樣品不同稀釋度的保護能力,計算出干擾素生物學活性單位。實驗材料VSVWISHHeP-2細胞株試劑、試劑盒MTT二甲亞

    表達蛋白的生物學活性的檢測

    一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理??? 活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、???青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于10

    表達蛋白的生物學活性的檢測

    一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2

    表達蛋白的生物學活性的檢測

    一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2

    IL1-8-的檢測

    新合成的IL-18是無信號肽的前體分子,被酶解后才能活化。在 本 E L I S A 方法中,為了 只 檢 測 成 熟 (活化)的 IL-18,包被抗體必須對活化的IL-18具有特異性。一些細胞 (如 人 P B M C ) 在正常條件下也可以分泌IL-18前體,這些細胞的培養上清液可以被用來檢測一

    IL1-5-的檢測

    實驗步驟基本方案材 料線或用簡單的圖形軟件繪制標準曲線,根據標準曲線確定待測樣品中IL- 1 5 的濃度展開

    L929細胞增殖MTT比色法檢測IL1的生物活性

    實驗概要IL-1具有刺激多種來源的成纖維細胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性檢測。目前國內外大多數實驗室常用L929細胞株(小鼠成纖維細胞瘤細胞)作為檢測IL-1生物活性的靶細胞或反應細胞。本實驗利用L929細胞增殖MTT比色法IL-1的生物活性進行了檢測。實驗原理MTT比色法的原理是利用四甲基偶

    腫瘤壞死因子α生物學活性檢測

    實驗方法原理TNF-α受體廣泛地分布于多種腫瘤細胞和血細胞,根據TNF-α與相應靶細胞結合后引起不同的生物學效應,建立了多種檢測TNF-α生物學活性方法。某些腫瘤細胞膜表面的TNF-α受體與TNF-α結合后,可導致這些腫瘤細胞的死亡,可通過檢測對腫瘤細胞的殺傷能力,來反映TNF-α的生物學活性。若這

    檢測細胞生物學活性有哪些方法

    根據每細胞定重量設計用于單細胞、細胞及絲狀體微物測定定體積品通離或濾菌體離經洗滌再離直接稱重求濕重絲狀體微物濾用濾紙吸菌絲間自由水再稱重求濕重論細菌品絲狀菌品放已知重量平皿或燒杯內于一05℃烘干至恒重取放入干燥器內冷卻再稱量求微物干重 要測定固體培養基放線菌或絲狀真菌先加熱至50℃使瓊脂熔化濾菌絲體

    IL8生物學活性檢測

    (一)原理IL-8對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理鹽水溶液。 (2)淋巴細胞分層液比重為1.077+(-)0.001。 (3)2%瓊脂糖:稱取2g瓊脂糖,加入到10

    IL10生物學活性檢測

    實驗材料 小鼠IL-4試劑、試劑盒 FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥

    IL4生物學活性檢測

    實驗材料 IL-4誘生試劑、試劑盒 生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材 細胞培養板培養箱實驗步驟 一、IL-4生物學活性測定?CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待

    IL1-0-的檢測實驗

    本方案在E LISA方法中釆用小鼠IL- 1 0特異性的抗體檢測小鼠IL- 1 0 , 不能檢測人或病毒的IL-10。 使用針對其他種屬的抗IL- 1 0 的抗體按照相同的操作流程可以檢測其他種屬的IL-10。 本方法具有高度特異性,對測定樣品中存在的其他細胞因子不敏感。實驗步驟基本方案材 料包被抗

    IL1-0-的檢測實驗

    基本方案材 料包被抗體:純化的抗 IL-10 M A b (JES-5-2A 5 鼠 IgGl 抗鼠IL-10; Phamiingen)PBS已知濃度的純化的小鼠 IL-10 標準品R P M M O 完全培養基待測樣品封閉液: 1 0 % (W V ) F C S , P B S 配制,無菌過濾,

    TNFα生物學活性檢測方法——光密度法

    TNF的生物學活性之一是能直接殺傷腫瘤細胞。TNF與相應受體結合后向細胞內移,被靶細胞溶酶體攝取導致溶酶體穩定性降低,各種酶外泄,引起細胞溶解。腫瘤細胞株對TNF-α的敏感性有很大的差異,用放線菌素D、絲裂酶素C、放線菌酮等處理腫瘤細胞,可明顯增強TNF-α殺傷腫瘤細胞活性。實驗材料小鼠L929細胞

    IL4生物學活性檢測實驗

    實驗材料IL-4誘生試劑、試劑盒生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材細胞培養板培養箱實驗步驟一、IL-4生物學活性測定?CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的

    IL10生物學活性檢測實驗

    實驗材料小鼠IL-4試劑、試劑盒FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥展開?注

    IL6生物學活性檢測實驗

    實驗材料IL-6的誘生試劑、試劑盒FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材離心機培養箱搖床實驗步驟?1. ?IL-6的誘生:誘生過程與IL-2基本相同。用于誘導產生IL-6的細胞可用PBMC。誘生劑用PHA。2. ?IL-6的生物學活性測定:采用MH60

    IL2生物學活性檢測實驗

    白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性,可

    IL8生物學活性檢測實驗

    IL-8中對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。實驗材料IL-8的誘生試劑、試劑盒右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材潔凈載玻片打孔器離心機培養箱實驗步驟一、IL-

    IL6生物學活性檢測實驗

    實驗材料 IL-6的誘生試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材 離心機培養箱搖床實驗步驟 1. ?IL-6的誘生:誘生過程與IL-2基本相同。用于誘導產生IL-6的細胞可用PBMC。誘生劑用PHA。2. ?IL-6的生物學活性測定:采用M

    IL2生物學活性檢測實驗

    實驗方法原理實驗材料 人外周血T細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 一、人外周血T細胞分泌IL-2的誘生1. ?人PBMC分離:采用常規淋巴細胞分層液濃度梯度離心法分離PBMC,用10%FCS-RPM

    IL8生物學活性檢測實驗

    實驗材料 IL-8的誘生試劑、試劑盒 右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材 潔凈載玻片 打孔器離心機培養箱實驗步驟 一、IL-8的誘生1. ?常規分離PBMC,洗滌后,調細胞濃度為5×106/ml。2. ?將細胞接種于24孔細胞培養板,每孔0

    小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性

    實驗概要IL-1可協同有絲分裂原(如ConA或PHA)刺激的T細胞或胸腺細胞發生增殖反應,通過3H-TdR DNA摻入法,即可測定IL-1生物活性。此法是目前測定IL-1活性常用而簡便的方法,其敏感度達10-50pg/ml。但本法缺乏特異性,因為IL-1亦可刺激T細胞或胸腺細胞產生一些細胞因

    小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性

    實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品:倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1.?3H-TdR、β-液閃汁數儀,微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器,不誘鋼網或者毛玻璃片

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