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三、端粒克隆DNA的抽提1.準備含特定抗生素50μg/mL氨芐青霉素、35μg/mL卡那霉素或12.5μg/mL氯霉素）的LB平板。2.從-70℃取出甘油保存管，放在干冰上。3.取甘油保存的菌種在LB平板劃線后，37℃細菌培養箱培養過夜。4.加100mL 2×YT培養基到500mL離心管中，按步驟1所示濃度加抗生素。5.從平板上挑選單克隆接種到2×YT培養基，37℃搖床中培養過夜。6.取700μL細菌培養物加300μL100%甘油混合均勻，分裝在兩個Eppendorf管中，標記好，-70℃條件下保存。7.剩余的細菌培養物350g離心15min。8.棄上清，將離心管倒扣在紙上瀝干。9.用30mL冷的細胞重懸液懸起沉淀，劇烈混勻和抽吸幾次，使得小細胞團塊徹底懸起10.加30mL細胞裂解液，上下輕輕顛倒一次。11.室溫放置5min(不要延長時間）。12.立即加30mL冷的中和液，上下輕輕顛倒混勻。13.冰上放置15min，每5min上......閱讀全文
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年，由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增，人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現，為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數，具有速度快、精度高、準確性好的優點，是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成
內容：一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來，植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的，當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時，表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀，如
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
熒光原位雜交體植入的應用實驗PBl、PB2 標本的制備 1.在 50 mL 培養瓶準備新鮮固定液（甲醇：冰乙酸=3:1)，在冰柜中保存備用。 2.將毛細吸管在小型噴燈的火焰上拉出內徑約 50pm 的尖，內徑太大可能會丟失極體。 3.加幾滴固定液再處理預先處理過的玻片以清
6月30日，國家食品藥品監督管理總局在網站上發布新聞，表示以2014年第30號公告形式頒布了《子宮刮匙》等120項推薦性醫療器械行業標準。這是今年6月1日起新修訂的《醫療器械監督管理條例》施行后頒布的第一批醫療器械行業標準。標準的正式頒布將推動醫療器械監督管理，對保障醫療器械安全有效、促進醫療器
四維核酸雜交技術[ 1 ]（4DH），即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ：表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧核糖核酸
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ]（4DH），即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ：表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑 （江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所， 江西 南昌 330029） [摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點，目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用，但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量P
PCR-SSCP法 PCR-SSCP法是在非這性聚丙烯酰胺凝膠上，短的單鏈DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同構象，一個堿基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈DNA在中性條件下會形成二級結構，這種二級結構依賴于其堿基組成，即使一個堿基的不同，也會形成不同的二
基因芯片 技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門，曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交 為基本原理，基于A和T、G和C的
2 植物發育與生殖的遺傳調控 頂端分生組織的遺傳調控 頂端分生組織是植物胚后發育的關鍵，研究其遺傳調控機理對了解植物生長和農作物生產具有重要意義。中國科學院植物研究所劉春明研究員與國外科學家合作研究證明了擬南芥 CLAVATA3 (CLV3) 編碼一個多肽配體，它通過與
近幾年來端粒酶由于與長壽、癌癥等的研究相關聯而備受關注，而端粒酶活性檢測具體方法又有那些呢?小編整理了端粒酶活性檢測的原理、基本操作技巧 、結果判斷、擴增片段檢測等方面內容，以饗讀者。端粒酶 (Telomerase)是由RNA和蛋白質組成的一種核糖核蛋白酶。人端粒酶RNA組分(hTR)于1995年被
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
DNA重組技術（或基因工程）是20世紀生物學的偉大成就，并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域，為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用，著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分
分子診斷——監管與分類 監管體系 根據下游應用領域的不同，分子診斷監管分為醫療器械和藥品兩種。臨床分子診斷產品按照第三類醫療器械(共三類，第三類是最嚴格的一類)監管。用于紅十字血液中心血源篩查的產品按照藥品監管。預計未來衛計委在應用層面逐漸推開LDT模式。 產品分類分子診斷(基因診斷)從技
PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織
PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR
4月7日，《細胞研究》發表了中國科學院生物物理研究所劉光慧課題組和徐濤課題組，以及中科院動物研究所曲靜課題組合作的題為Visualization of Aging-Associated Chromatin Alterations with an Engineered TALE System的研究
1月31日，中科院生物物理研究所劉光慧課題組和徐濤課題組，以及中科院動物研究所曲靜課題組合作，研究發現了一種新型三維基因組活細胞成像工具，利用此工具實現了對衰老伴隨的端粒縮短和著絲粒異染色質改變的精準成像。更為有趣的是，該研究發現了核仁區核糖體DNA拷貝數的減少可以作為人類衰老的新型標志物,人類
來自中科院生物物理研究所，中科院動物研究所等處的研究人員發展了一種新型三維基因組活細胞成像工具TTALE，并利用該系統實現了對端粒縮短和著絲粒構象變化等衰老伴隨的染色質結構改變的精準成像。此外，該研究發現了核仁區核糖體DNA拷貝數減少可以作為人類衰老的新型分子標志物。上述成果為在遺傳和表觀遺傳水
4月7日，《細胞研究》發表了中國科學院生物物理研究所劉光慧課題組和徐濤課題組，以及中科院動物研究所曲靜課題組合作的題為Visualization of Aging-Associated Chromatin Alterations with an Engineered TALE System的研究
常用分子生物學和細胞生物學實驗技術介紹！ 核酸分子雜交技術 由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定
八十年代以來由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其嚴重的危害性而受到人們高度重視，力爭早期診斷和尋求有效治療是防止其廣泛傳播的關鍵所在.聚合酶鏈反應(PCR)具有敏感、特異和快速的特點，是檢測病毒、評價病情進展和探討發病機理的有效工具.一、HIV的基因結構 HIV的基因
脫氧次黃嘌呤（deoxyInosine，dI）： 脫氧次黃嘌呤是一個自然存在的堿基， 雖然不是真正意義上的通用堿基但當與其它堿基結合時會比其它堿基錯配相對更穩定。 脫氧次黃嘌呤與其它堿基的結合能力為dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下，脫氧
脫氧次黃嘌呤（deoxyInosine，dI）：脫氧次黃嘌呤是一個自然存在的堿基， 雖然不是真正意義上的通用堿基但當與其它堿基結合時會比其它堿基錯配相對更穩定。 脫氧次黃嘌呤與其它堿基的結合能力為dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的
根據肺部腫瘤、炎性細胞等組織的顏色及形態學特性，對無特殊染色標記的組織病灶及結構進行識別，并用不同顏色標記以便進行后續的定量分析。TissueFAXS Cytometry技術支持超大組織樣本切片全景掃描和定量分析，協助科研工作者們突破從分子水平、細胞水平、組織水平直至器官水平的數據瓶頸，分析
在論壇上看到不停地有人在問RT-PCR的問題，實際上在以前的帖子中各位香主和eeflying（我為什么總是提他們？因為還是很佩服的哦，生怕自己說錯了，被他們指出來哦）都談到了很多，鄙人也充大頭答了一些問題，但是還是有各種問題，由于的基因表達還有點實戰經驗（但也技止此而），所以想些點東西給大家參考，計
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體，采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板，可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已