蛋白質沉淀(ProteinPrecipitation)濃縮方法原理及詳細解析1
在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑：1．鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2．有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化，有時也用于蛋白質沉淀。3．等電點沉淀法用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少，多與其它方法結合使用。4．非離子多聚體沉淀法用于分離生物大分子。5．生成鹽復合物沉淀用于多種化合物，特別是小分子物質的沉淀。6．熱變性及酸堿變性沉淀法用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。第一節鹽析法一般來說，所有固體溶質都可以在溶液中加入中性鹽而沉淀析出，這一過程叫鹽析。在生化制備中,許多物質都可以用鹽析法進行沉淀分離，如蛋白質、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白質沉淀最為常見，特別是在粗提階段。鹽析法分為兩類，第一類叫Ks分段鹽析法，在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現，用于早期的粗......閱讀全文
蛋白質沉淀(Protein－Precipitation)濃縮方法原理及詳細解析1
在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑：1．鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2．有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化，有時也用于蛋白質沉淀。3．等電點沉淀法用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物
蛋白質沉淀(Protein－Precipitation)濃縮方法原理及詳細解析2
二．硫酸銨的使用硫酸銨中常含有少量的重金屬離子，對蛋白質巰基有敏感作用，使用前必須用H2S處理：將硫酸銨配成濃溶液，通入H2S 飽和，放置過夜，用濾紙除去重金屬離子，濃縮結晶，100℃烘干后使用。另外，高濃度的硫酸銨溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸調節至所需PH。硫酸
蛋白質沉淀(Protein－Precipitation)濃縮方法原理及詳細解析3
二．生成鹽復合物沉淀法1．金屬復合鹽法許多有機物質包括蛋白在內，在堿性溶液中帶負電荷，能與金屬離子形成沉淀。根據有機物與它們之間的作用機制，可分為羧酸、胺及雜環等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如概鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。蛋白質-金屬離子復合物的重要性質是它們的溶解度對溶液的
蛋白質沉淀濃縮方法原理及詳細解析
在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑：1．鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2．有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化，有時也用于蛋白質沉淀。3．等電點沉淀法用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物
Acetone－precipitation－of－protein
This procedure is suitable for recovering proteins from most aqueous solvents and from SDS containing buffers. It is not recommended for proteins diss
蛋白質沉淀濃縮方法
在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑： 1．鹽析法 多用于各種蛋白質和酶的分離純化。 2．有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化，有時也用于蛋白質沉淀。 3．等電點沉淀法 用于氨基酸、
沉淀反應技術(Precipitation－reaction－technique)（1）
一、 概述可溶性抗原（如細菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他來源的蛋白質、多糖質、類脂體等）與其相應的抗體相遇后，在電解質參與下，抗原抗體結合形成白色絮狀沉淀，出現白色沉淀線，此種現象稱為沉淀反應。沉淀反應中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,與沉淀原發生反應的抗體稱為沉淀素（pre
蛋白濃縮（protein－concentration）基本方法
蛋白濃縮方法基本有：丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法：得有特異性抗體！ 3.硫酸銨沉淀法
蛋白濃縮(protein－concentration)方法詳解
1，透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋（無透析袋可用玻璃紙代替），結扎，把高分子（6000－12000）聚合物如聚乙二醇（碳蠟）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%－40%濃度的溶液，將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用
關于免疫診斷方法—沉淀反應(precipitation)概述
可溶性抗原與相應抗體在有適量電解質存在下，出現肉眼可見的沉淀現象，稱為沉淀反應。參與反應的抗原稱沉淀原(precipitinogen)，抗體稱沉淀素(precipitin)。沉淀原可以是多糖、蛋白質、類脂等，由于其體積小，相對反應面積大，故試驗時需對抗原進行稀釋，以避免后帶現象。應用較早的沉淀反
沉淀反應技術(Precipitation－reaction－technique)
一、???? 概述?可溶性抗原（如細菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他來源的蛋白質、多糖質、類脂體等）與其相應的抗體相遇后，在電解質參與下，抗原抗體結合形成白色絮狀沉淀，出現白色沉淀線，此種現象稱為沉淀反應。沉淀反應中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,與沉淀原發生反應的抗體稱為沉淀
沉淀反應技術(Precipitation－reaction－technique)（2）
2．取試管5支（5mm×50mm）置于試管架上，編號。第1、2試管內加炭疽沉淀血清，第3、4試管內加正常血清，第5管內加待檢抗原，分別用毛細滴管加至4mm～5mm。3．第1、4、5試管輕輕疊加等量緩沖液，第2、3試管輕輕疊加等量待檢抗原。為防止上下兩界面破壞，可將小試管從試管架取出，微傾斜，沿試管壁
蛋白質的沉淀方法及常見沉淀劑
名稱??上清液?0.5ml血漿中不同沉淀劑使蛋白沉淀的%?PH值?0.20.4?0.60.8?1.0?1.5??2.03.0???4.0?10%三氯醋酸?1.4-2.0?99.7?99.3?99.6?99.5?99.5?99.7?99.8?99.8?99.8?6%高氯酸?
蛋白質分析技術(Analytical－Techniques－for－Protein)1
第一節 蛋白質分離純化與鑒定的基本原理一、蛋白質的理化性質（一）蛋白質的兩性電離 pI：當蛋白質溶液處于某一pH時，蛋白質解離成正、負離子的趨勢相等，即成為兼性離子，凈電荷為0，此時的溶液的pH稱為~。 體內大多數蛋白質：pI≈pH 5.0。在pH 7.4，大多數蛋白質解離成陰離子。少數蛋白
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
三氯醋酸沉淀法 丙酮沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 含蛋白質的樣品
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋白質
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
免疫沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 實驗材料?含蛋白質的樣品試劑、試劑盒?100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟 1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮（或其他有機溶劑如乙醇或甲醇）儀器、耗材Eppendorf 管（小塑料離心管）Eppendorf 管離心機（小型臺式離心機）混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 樣品溶液，混勻。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型臺式離
蛋白質提取與制備(Protein－Extraction－and－Preparation)1
蛋白質提取與制備蛋白質種類很多，性質上的差異很大，既或是同類蛋白質，因選用材料不同，使用方法差別也很大，且又處于不同的體系中，因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質的分離。但多數分離工作中的關鍵部分基本手段還是共同的，大部分蛋白質均可溶于水、稀鹽、稀酸或稀堿溶液中，少數與脂類結合的蛋白質溶于乙醇、
蛋白質純化(protein－purification)實用技術1
研究的最后還是要看基因表達產物,無論是用于檢測還是用于棉衣保護,都需要將表達出的蛋白質分離和純化,然而蛋白質性質各異,故純化方法不同,現共享一些基本的純化方法,以饗讀者:蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
有機溶劑沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min （或在冷凍
蛋白質的濃縮方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段，現介紹幾種常用的濃縮技術。（一）透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋（無透析袋可用玻璃紙代替），結扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蠟）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑
蛋白質的濃縮方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段，現介紹幾種常用的濃縮技術。（一）透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋（無透析袋可用玻璃紙代替），結扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蠟）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
硫酸銨沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低，形成沉淀的子衡時間短等特點，使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30％ 時，蛋白質就能夠達到最大量沉淀。實驗材料蛋
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
聚乙二醇法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散