酶活力測定常用的方法
酶活力測定常用的方法有終點法和動力學方法兩類。終點法測定完成一定量反應所需的時間,如α-淀粉酶的活力測定。因為碘對淀粉呈現藍色反應,當淀粉溶液中加入淀粉酶后,碘的藍色反應消失而呈現紅棕色;碘對淀粉顏色反應消失的時間可表示淀粉酶活力的大小。碘對淀粉顏色反應消失花的時間越短,表示酶的活力越高。動力學方法測定一定時間內所起的化學反應量。①比色法 如果酶反應的產物可與特定的化學試劑反應而生成穩定的有色溶液,且生成顏色的深淺與產物的濃度在一定的范圍內有線性關系可用此法。如蛋白酶的活力測定:蛋白酶可水解酪蛋白,產生的酪氨酸可與福林試劑反應生成穩定的藍色化合物,在一定的濃度范圍內,所生成藍色化合物顏色的深淺與酪氨酸的量之間有線性關系,可用于定量測定。②量氣法 主要用于有氣體產生的酶促反應。如氨基酸脫羧酶、脲酶的活力測定。產生的二氧化碳量可用特制的儀器如瓦氏呼吸儀測定之。根據氣體變化和時間的關系,即可求得酶反應的速度。③滴定法&nbs......閱讀全文
酶活力測定常用的方法
酶活力測定常用的方法有終點法和動力學方法兩類。終點法測定完成一定量反應所需的時間,如α-淀粉酶的活力測定。因為碘對淀粉呈現藍色反應,當淀粉溶液中加入淀粉酶后,碘的藍色反應消失而呈現紅棕色;碘對淀粉顏色反應消失的時間可表示淀粉酶活力的大小。碘對淀粉顏色反應消失花的時間越短,表示酶的活力越高。動力學方法
酶活力的測定方法
一般采用測定酶促反應初速度的方法來測定活力,因為此時干擾因素較少,速度保持恒定。反應速度的單位是濃度/單位時間,可用底物減少或產物增加的量來表示。因為產物濃度從無到有,變化較大,而底物往往過量,其變化不易測準,所以多用產物來測定。
酶活力測定的方法
酶活力測定的方法很多,如化學測定法、光學測定法、氣體測定法等。酶活力測定均包括兩個階段:首先是在一定條件下,酶與底物反應一段時間,然后再測定反應體系中底物或產物的變化量。一般經過以下幾個步驟:(1)根據酶催化的專一性,選擇適宜的底物,并配制成一定濃度的底物溶液。所用的底物必須均勻一致,達到酶催化反應
酶的活力測定方法介紹
國內飼料酶的活力測定方法較為混亂,除淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果膠酶國家有輕工部標準外(植酸酶測定也有農業部標準),其它酶類測定各公司各行其是。國際生物化學聯合會酶委員會對于酶活力一個單位(U)的定義是:在規定的條件下每分鐘催化1μmol的底物使之轉化生成反應產物所需的酶的量。而國內酶活的表示方法不一
堿性卵白酶活力測定方法
酶活力是指酶催化某些化學反映的能力。酶活力的巨細可以用在一定條件下它所催化的某一化學反映的速率來表現。測定酶活力現實就是測定被酶所催化的化學反映的速率。酶促反映的速率可以用單元時間內反映底物的淘汰量或產物的增加量來表現,為了敏捷起見,通常是測定單元時間內產物的天生量。由于酶促反映速率可隨時間的推移而
蛋白酶的活力測定方法介紹
蛋白酶的種類繁多,不同的蛋白酶的性質和催化反應條件各不相同,無法規定一個統一的測定方法,使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1福林酚法蛋白酶催化蛋白質水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)與福林試劑反應,生成藍色復合物,藍色深淺與含酚基氨基酸的多少成正比
蛋白酶的活力測定方法介紹
蛋白酶的種類繁多,不同的蛋白酶的性質和催化反應條件各不相同,無法規定一個統一的測定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白質水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)與福林試劑反應,生成藍色復合物,藍色深淺與含酚基氨基酸的多少
酶的純化與活力測定
在酶學和酶工程的生產和研究中,經常需要進行酶活力的測定,以確定酶量的多少以及變化情況。酶活力測定是在一定條件下測定酶所催化的反應速度。在外界條件相同的情況下,反應速度越大,意味著酶的活力越高。1 酶活力測定的方法酶活力測定的方法很多,如化學測定法、光學測定法、氣體測定法等。酶活力測定均包括兩個階段:
淀粉酶的活力測定
原理淀粉被淀粉水解,切斷淀粉鏈的α-1,4糖苷鍵,對碘呈藍紫色的反應消失,這種呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取試管1支,加20毫升2%淀粉,混勻,在30℃水浴中,使管內溫度達到30℃。2、將淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混勻,在30℃水浴中保溫,自加入記時
酶活力測定的影響因素
影響酶活性的因素包括底物的濃度、酶濃度、酶反應的最適pH、最適溫度、酶的激活劑、抑制作用,另外還包括試劑中表面活性劑的作用等因素。1.反應速度:大多數酶促反應是可逆反應,其速度既受底物濃度的影響,也受產物生成量的影響。酶反應動力學中所指速度是反應的初速度。當底物濃度較高時,在反應的初期,其濃度變化甚
酶的純化與活力測定
酶的純化與活力測定在酶學和酶工程的生產和研究中,經常需要進行酶活力的測定,以確定酶量的多少以及變化情況。酶活力測定是在一定條件下測定酶所催化的反應速度。在外界條件相同的情況下,反應速度越大,意味著酶的活力越高。1 酶活力測定的方法酶活力測定的方法很多,如化學測定法、光學測定法、氣體測定法等。酶活力測
蛋白酶的活力測定
蛋白酶的種類繁多,不同的蛋白酶的性質和催化反應條件各不相同,無法規定一個統一的測定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白質水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)與福林試劑反應,生成藍色復合物,藍色深淺與含酚基氨基酸的多少
果膠酶的固定化及活力測定方法
一、實驗目的:果膠酶(EC.3.2.1.15)廣泛存在于植物界,參與果實的成熟及其它代謝過程。在果品加工業中,果膠酶主要用于果汁的澄清和提高榨汁率。果膠酶的固定化將有助于提高酶的利用率,同時還可減少外源物質對果制品的污染。果膠酶需求量大,且多為一次性使用,既造成了很大的浪費,又大大提高了產品生產成本
豬胰蛋白酶酶活力的測定
實驗原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動物胰臟中,在Ca2+的存在下,被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開,失去一段六肽,分子構象發生一定改變后轉變為有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量約為24000,其等電點約為pH8.9,胰蛋白酶的分子量與其酶原接
酶活力測定的注意事項
(1)酶促反應過程中,要用初速度表示酶促反應速度。(2)要規定時間、溫度、pH等反應條件,并在酶測定過程中保持這些反應條件的恒定。(3)配制的底物濃度應準確且足夠大,底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中,以防止底物被分解。(4)標本要新鮮,應保存于冰箱中。用血漿時,應考慮到抗凝劑對酶反
植物組織中脂肪氧化酶活力的測定方法
脂肪氧化酶(LOX)是一種含非血紅素鐵的蛋白質,專一催化具有順、順-1,4-戊二烯結構的多元不飽和脂肪酸加氧反應,氧化生成具有共軛雙鍵的過氧化氫物。它廣泛存在于高等植物 ?體內,與植物的生長發育、植物的衰老、脂質過氧化作用和光合作用、傷反應及其他脅迫反應等有關。 【原理】 根據基質濃度一
琥珀酸脫氫酶活力測定方法簡介
1、硫酸甲酯吩嗪(PMS)反應法 琥珀酸脫氫酶能通過一系列人工電子受體,如與PMS(吩嗪二甲酯硫酸鹽),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等發生反應催化琥珀酸的氧化,而借助這些中間產物的顏色變化,通過分光光度計檢測即可加以定量反映,其反應式為:①Succinate+PMS→Fumarate+PM
酶的提取、分離、純化及其活力測定
一、實驗目的酶是植物體內具有催化作用的蛋白質,植物體內的生化反應,一般都是在酶的作用下進行的,沒有酶的催化反應,植物的生命也就停止了,因此對酶的研究是闡明生命現象本質中十分重要的部分。為要研究酶首先要將酶從組織中提取出來,加以分離、純化,不同的研究目的對酶制劑的純度要求也不相同,有些工作只需要粗的酶
琥珀酸脫氫酶活力測定方法MTT法
MTT法MTT是一種黃顏色的染料。活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT,同時在細胞色素C的作用下生成藍色(或藍紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),經異丙醇作用顆粒溶解顯色。在通常情況下,甲臜生成量與活細胞數成正比,因此可根據光密度570nm處OD值推測出活細胞的數目。
酶活性測定法的常用方法介紹
常用的測定方法有取樣法和連續法。 取樣法是在酶反應開始后不同的時間,從反應系統中取出一定量的反應液,并用適當方法停止其反應,再根據產物和底物在化學性質上的差別進行分析,求得單位時間內酶促反應的變化量。 連續法則是基于底物和產物在物理化學性質上的不同,在反應過程中對反應系統添加酶的變性劑以終止
果膠酶活力檢測方法
掌握可靠的酶分析定量方法是開展果膠酶研究工作的重要前提。果膠酶的測定方法很多,各具特點,且酶活單位的定義不同,要根據不同情況加以選擇對比。常用的酶活力測定方法有:1 滴定法滴定法主要用于測定果膠酯酶的活力,根據該酶作用機制,采用滴定羧基來評價酶活。果膠酯酶的活力還有一種測定方法,即,通過氣相色譜或液
種子活力測定方法
(一)紅四氮唑( TTC)染色法1.將種子用溫水(約30℃)浸泡2--6小時,使種子充分吸脹。2.隨機取種子100粒,紅花、蓖麻等具有外殼的需要去掉外殼,豆類種子要去皮。然后沿種胚中央準確切開,取一半備用。3.將準備好的種子浸于2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中,于恒溫箱( 30~35℃)
果膠酶的固定化及其活力測定
一、實驗目的:果膠酶(EC.3.2.1.15)廣泛存在于植物界,參與果實的成熟及其它代謝過程。在果品加工業中,果膠酶主要用于果汁的澄清和提高榨汁率。果膠酶的固定化將有助于提高酶的利用率,同時還可減少外源物質對果制品的污染。果膠酶需求量大,且多為一次性使用,既造成了很大的浪費,又大大提高了產品生產成本
硝酸還原酶活力的測定(離體法)
一、原理硝酸還原酶(NR)是植物氮素同化的關鍵酶,它催化植物體內的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,產生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸(或對–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性條件下定量生成紅色偶氮化合物。其反應如下:生成的紅色偶氮化合物在540nm波長下有最大吸收峰,可用分光光度法測定。硝酸還原酶活
硝酸還原酶活力測定(活體法)
實驗材料 小麥、玉米等植物材料試劑、試劑盒 亞硝酸鈉標準液磷酸緩沖液對-氨基苯磺酸溶液α-萘胺溶液三氯乙酸溶液異丙醇磷酸緩沖液KNO3儀器、耗材 分光光度計真空抽氣泵天平單面刀片保溫箱刻度試管移液管
硝酸還原酶活力測定(活體法)
一、原理硝酸還原酶(NR)是植物氮素同化的關鍵酶,它催化植物體內的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,產生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸(或對–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性條件下定量生成紅色偶氮化合物。其反應如下:?生成的紅色偶氮化合物在540nm波長下有最大吸收峰,可用分光光度法測定。硝酸還原酶
硝酸還原酶活力測定(活體法)
一、原理硝酸還原酶(NR)是植物氮素同化的關鍵酶,它催化植物體內的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,產生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸(或對–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性條件下定量生成紅色偶氮化合物。其反應如下:生成的紅色偶氮化合物在540nm波長下有最大吸收峰,可用分光光度法測定。硝酸還原酶活
抗壞血酸氧化酶活性常用的測定方法
酶活性以酶活單位(酶活單位為lmin氧化1 g還原性抗壞血酸的酶量)表示,即酶活單位/g鮮重。常用的測定方法是碘量法,這是一種經典的方法,所用儀器簡單,準確性高;二是分光光度法,這種方法靈敏度和準確性高,重演性好,用途廣,選擇性好;三是氧電極分析法,該法靈敏度高,準確性好,但是氧電極對溫度變化非
酶的活力定義
酶的活力由多種定義方式,常用的有以下兩種:1、在一定的條件下(溫度、PH),單位時間內催化轉化一定量的底物生成特定產物所需的酶量;當測定酶系活力時,如果在特定條件下,采用每1分鐘催化1μmol的底物轉化為產物的酶量的表達形式時,該酶活力值即為國際單位(IU)。2、在一定的條件下(溫度、PH),單位時
酶的活力單位
開特(英文:Katal,符號:kat)是一個量度酶的催化活動的國際單位,定義為每秒能轉化多少摩爾的濃度,例如1開特等于每秒能轉化1摩爾的濃度。這個單位于1972年開始被使用,并于1999年正式成為國際單位的衍生單位。