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  • RNA探針的簡介

    許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優點,又具有許多DNA單鏈探針所沒有的優點,主要是: RNA:DNA雜交體比DNA:DNA雜交體有更高的穩定性,所以在雜交反應中RNA探針比相同比活性的DNA探針所產生信號要強。 RNA:RNA雜交體用RNA酶A酶切比S1酶切DNA:RNA雜交體容易控制,所以用RNA探針進行RNA結構分析比用DNA探針效果好。 噬菌體依賴DNA的RNA聚合酶所需的rNTP濃度比Klenow片段所需的dNTP濃度低,因而能在較低濃度放射性底物的存在下,合成高比活性的全長探針。 用來合成RNA的模板能轉錄許多次,所以RNA的產量比單鏈DNA高。并且用來合......閱讀全文

    分子雜交RNA探針的技術特點及應用介紹

    RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩

    簡介手動探針臺用途

      探針臺主要應用于半導體行業、光電行業、集成電路以及封裝的測試。 廣泛應用于復雜、高速器件的精密電氣測量的研發,旨在確保質量及可靠性,并縮減研發時間和器件制造工藝的成本。  手動探針臺的主要用途是為半導體芯片的電參數測試提供一個測試平臺,探針臺可吸附多種規格芯片,并提供多個可調測試針以及探針座,配

    Northern雜交試驗指導手冊(5)-RNA探針制備

    五、RNA探針制備(根據the DIG system user's guide)A. 地高辛標記的體外轉錄試劑及其配制(試劑盒提供):10× NTP標記混合物:in Tris-HCl (pH 7.5)10mmol ATP10mmol CTP10mmol GTP6.5mmol UTP3.5mm

    關于RNA沉默的簡介

      基因沉默是指在真核生物(植物、動物、真菌)中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。  RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是廣泛存在于植物、動物、線蟲和真菌等真核生中的一種高度保守的、序列特異的 RNA 降

    關于轉運RNA的簡介

      轉運RNA(Transfer RNA),又稱傳送核糖核酸、轉移核糖核酸,通常簡稱為tRNA,是一種由76-90個核苷酸所組成的RNA,其3'端可以在氨酰-tRNA合成酶催化之下,接附特定種類的氨基酸。轉譯的過程中,tRNA可借由自身的反密碼子識別mRNA上的密碼子,將該密碼子對應的氨基酸

    關于RNA剪接的簡介

      大多數脊椎動物基因的編碼序列,無論是編碼多肽的基因還是編碼除mRNA以外的RNA分子的基因,都是由非編碼的間隔序列(內含子)分隔為各個外顯子部分。這些基因的外顯子和內含子都轉錄在一條初級RNA轉錄分子中,接下來,此初級RNA轉錄分子要經過RNA剪接,此過程包括一系列的加工反應:RNA的內含子部分

    關于衛星RNA的簡介

      衛星RNA是一類小的非編碼RNA,基因組大小為200-1500nt,通常不編碼蛋白,完全依賴于輔助病毒來完成復制、包被、移動和傳播,且和其輔助病毒的基因組不存在序列同源性。部分衛星RNA可以影響輔助病毒在寄主植物上誘發的癥狀,多數為減輕,少數會加重寄主癥狀。傳統理論認為衛星RNA是通過與輔助病毒

    小分子RNA的簡介

      MicroRNA (miRNA) 是一類內生的、長度約為20-24個核苷酸的小RNA,其在細胞內具有多種重要的調節作用。每個miRNA可以有多個靶基因,而幾個miRNA也可以調節同一個基因。這種復雜的調節網絡既可以通過一個miRNA來調控多個基因的表達,也可以通過幾個miRNA的組合來精細調控某

    關于RNA復制的簡介

      RNA復制是以RNA為模板合成RNA的過程,是除了逆轉錄病毒以外的其他RNA病毒的復制方式。有些生物,像某些病毒的遺傳信息貯存在RNA分子中,當它們進入宿主細胞后,靠復制而傳代,當它們以RNA模板時,在RNA復制酶作用下,按5'→3'方向合成互補的RNA分子,但RNA復制酶中缺乏

    轉運RNA的功能簡介

      主要是攜帶氨基酸進入核糖體,在mRNA指導下合成蛋白質。即以mRNA為模板,將其中具有密碼意義的核苷酸順序翻譯成蛋白質中的氨基酸順序(見蛋白質的生物合成、核糖體)。tRNA與mRNA是通過反密碼子與密碼子相互作用而發生關系的。在肽鏈生成過程中,第一個進入核糖體與mRNA起始密碼子結合的tRNA叫

    寡核苷酸探針的簡介

      基因探針,即核酸探針,是一段帶有檢測標記,且順序已知的,與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結合,產生雜交信號,能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件:①應是單鏈,若為雙鏈,必須先行變性處理。②應帶有容

    關于Southern雜交的探針標記簡介

      用于Southern印跡雜交的探針可以是純化的DNA片段或寡核苷酸片段。探針可以用放射性物質標記或用地高辛標記,放射性標記靈敏度高,效果好;地高辛標記沒有半衰期,安全性好。人工合成的短寡核苷酸可以用T4多聚核苷酸激酶進行末端標記。探針標記的方法有隨機引物法、切口平移法和末端標記法。

    簡介手動探針臺的使用方式

      1.將樣品載入真空卡盤,開啟真空閥門控制開關,使樣品安全且牢固地吸附在卡盤上。  2.使用卡盤X軸/Y軸控制旋鈕移動卡盤平臺,在顯微鏡低倍物鏡聚焦下看清楚樣品。  3.使用卡盤X軸/Y軸控制旋鈕移動卡盤平臺將樣品待測試點移動至顯微鏡下。  4.顯微鏡切換為高倍率物鏡,在大倍率下找到待測點,再微調

    以-RNA-為靶目標-FISH-探針的標記實驗

    標記的 RNA、DNA 或者核酸類似物可以通過熒光原位雜交(FISH) 的方法檢測細胞標本內的 RNA。目標 RNA 通常是由基因組 DNA 轉錄來的信使 RNA(mRNA)。由于髙特異的核酸堿基互補配對原則,特定的 RNA 分子可以從眾多共表達的 mRNA 分子中篩選出來。對選擇的 mRNA 分子

    以-RNA-為靶目標-FISH-探針的標記實驗

    標記的 RNA、DNA 或者核酸類似物可以通過熒光原位雜交(FISH) 的方法檢測細胞標本內的 RNA。目標 RNA 通常是由基因組 DNA 轉錄來的信使 RNA(mRNA)。由于髙特異的核酸堿基互補配對原則,特定的 RNA 分子可以從眾多共表達的 mRNA 分子中篩選出來。對選擇的 mRN

    RNA探針的合成方法和合成效率檢測

    在RNA的雜交檢測實驗中,應用標記的RNA 探針將獲得高靈敏度的雜交檢測結果,與DNA 探針相比,檢測靈敏度提高10-100倍。因為對于不同的雜交體類型來說,RNA-RNA雜交體的結合強度高于RNA-DNA和DNA-DNA雜交體。對于通過Northern blots檢測低濃度mRNA,以及原

    遺傳編碼熒光RNA探針研究獲新進展

    原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/6/503155.shtm

    掃描探針顯微鏡簡介

      掃描探針顯微鏡(Scanning Probe Microscope,SPM)是掃描隧道顯微鏡及在掃描隧道顯微鏡的基礎上發展起來的各種新型探針顯微鏡(原子力顯微鏡AFM,激光力顯微鏡LFM,磁力顯微鏡MFM等等)的統稱,是國際上近年發展起來的表面分析儀器,是綜合運用光電子技術、激光技術、微弱信號檢

    離子探針分析儀簡介

      離子探針分析儀,即離子探針(Ion Probe Analyzer,IPA),又稱二次離子質譜(Secondary Ion Mass Spectrum,SIMS),是利用電子光學方法把惰性氣體等初級離子加速并聚焦成細小的高能離子束轟擊樣品表面,使之激發和濺射二次離子,經過加速和質譜分析,分析區域可

    單鏈DNA探針技術簡介

    用雙鏈探針雜交檢測另一個遠緣DNA時,探針序列與被檢測序列間有很多錯配。而兩條探針互補鏈之間的配對卻十分穩定,即形成自身的無效雜交,結果使檢測效率下降。采用單鏈探針則可解決這一問題。單鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:(1) 以M13載體衍生序列為模板,用Klenow片段合成單鏈探針; (2)

    關于丙型肝炎RNA的簡介

      丙型肝炎病毒(hepatitis virus C,HCV)是一小的有囊膜的單股正鏈RNA病毒,屬黃病毒科丙型肝炎病毒屬。HCV基因組為一長的開放讀碼框架(ORF),在其兩側的5′和3′均有非編碼區,從5′端開始,編碼區由7個基因區組成,即C、E1、E2、NS1、NS2,NS3、NS4和NS5,C

    核糖體RNA的簡介

      rRNA的分子量較大,結構相當復雜,目前雖已測出不少rRNA分子的 一級結構,但對其二級、 三級結構及其功能的研究還需進一步的深入。 原核生物的rRNA分三類:5SrRNA、16SrRNA和23SrRNA。 真核生物的rRNA分四類:5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA

    關于小干擾RNA的簡介

      小干擾RNA(siRNA),有時稱為短干擾RNA或沉默RNA,是一類雙鏈RNA分子,長度為20-25個堿基對,類似于miRNA,并且在RNA干擾(RNAi)途徑內操作。它干擾了表達與互補的核苷酸序列的特定基因的轉錄后降解的mRNA,從而防止翻譯。  siRNA由雙鏈RNA (double str

    關于掃描探針顯微鏡的簡介

      掃描探針顯微鏡(Scanning Probe Microscope,SPM)是掃描隧道顯微鏡及在掃描隧道顯微鏡的基礎上發展起來的各種新型探針顯微鏡(原子力顯微鏡,靜電力顯微鏡,磁力顯微鏡,掃描離子電導顯微鏡,掃描電化學顯微鏡等)的統稱,是國際上近年發展起來的表面分析儀器,是綜合運用光電子技術、激

    同步輻射X射線微探針的簡介

      是隨著同步輻射光的應用而發展起來的一種新的微區痕量無損分析技術。它是利用同步加速器電子儲存環中產生的具有奇異特性(頻帶寬且連續可調;通量大亮度高;準直性好;高度偏振;具有特定時間結構)的電磁波(通稱為同步輻射或同步輻射光),再經準直、聚焦或單色化而形成高亮度的X射線微探針進行樣品分析。

    開爾文探針力顯微鏡的簡介

      開爾文探針力顯微鏡(Kelvin probe force microscope、KPFM)是一種原子力顯微鏡,于1991年問世。開爾文探針力顯微鏡利用微懸臂感受和放大懸臂上尖細探針與受測樣品原子之間的作用力,從而達到檢測的目的,具有原子級的分辨率。

    用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖

    核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理核糖核酸酶保護分析用于度量特

    小分子RNA(miRNA)簡介

    一、什么是小分子RNA( MicroRNA)?? ? MicroRNA (miRNA) 是一類長度約為20-24個核苷酸長度的具有調控功能的非編碼RNA。 miRNA 主要參與基因轉錄后水平的調控。這些miRNA基因首先在細胞核內轉錄成原始miRNA轉錄本(primary transcrip

    原子力顯微鏡探針簡介

      原子力顯微鏡(AFM),是一種具有原子分辨率的表面形貌、電磁性能分析的重要儀器。首臺原子力顯微鏡在1985年研發成功,其模式可分為接觸模式和輕敲模式等多種模式。AFM探針由于應用范圍僅限于原子力顯微鏡,屬于高科技儀器的耗材,應用領域不廣,全世界的使用量也不多。主要的生產廠家分布在德國,瑞士,保加

    高低溫真空探針臺簡介

      高低溫真空探針臺,是一款為晶片、器件和材料(薄膜、納米、石墨烯、電子材料、超導材料、鐵電材料等)提供真空和高低溫測試條件下進行非破壞性的電學表征和測量平臺。  高低溫真空探針臺在不同測試環境、不同溫度條件下可對微結構半導體器件、微電子器件及材料進行電學特性表征測試。  SCG系列高低溫真空探針臺

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