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來自俄亥俄州立大學綜合癌癥中心，四川大學華西醫院的研究人員公布的一項最新研究表明，肺癌中的microRNA-486是一種強效的抑癌分子，有助于調節肺癌細胞的增殖和遷移，并且誘導這些癌細胞程序性細胞死亡或細胞凋亡。 研究人員證實microRNA-486(miR-486)能直接靶向胰島素生長因子途徑，這一途徑對于細胞的存活和增殖具有重要意義，并且研究也表明這一途徑發生改變，對于早期腫瘤的發生和發生具有影響。 研究人員還發現，miR-486本身也受腫瘤抑制基因p53的調控，后者是人類癌癥中出現變異最頻繁的基因，而這項研究發現的miR-486的活性也部分依賴于功能性p53。 這項研究成果公布在《美國國家科學院院刊》(PNAS)雜志上，研究表明miR-486可能可以作為對胰島素生長因子抑制劑治療有反應的肺癌患者的生物標志物。 文章共同通訊作者，俄亥俄州立大學Patrick Nana-Sinkam表示，“此前......閱讀全文
重組蛋白純化基本原則蛋白的分離純化是生物工程下游階段一個比較重要的部分，尤其在基因工程重組蛋白的分離純化中，上游過程的許多因素會直接影響到下游蛋白的分離，充分利用上游對下游的影響，對蛋白的純化做一個全面的考慮和整體的設計。是否帶有親和標簽，His標簽，GST標簽等，不同的親和標簽選擇不同的純化方案；
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
重組蛋白是研究生物學過程的重要工具。需要使用表達系統來對其進行制備。合適表達系統的選擇取決于重組蛋白的特性、重組蛋白的預期應用以及該系統能否生產足夠量的蛋白質。作者： 伯吉斯等,主譯：陳薇，本實驗來自「蛋白質純化指南」實驗步驟一、引言選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及
實驗步驟 一、引言 選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及 時 獲 取 所 需 數 量 和 質 量 的 重z組蛋白非常關鍵。選 擇 了 錯 誤 的表達宿主可 能 導 致 蛋 白 質錯 誤 折 疊 或
活細胞通過分子組件來跟蹤時間，盡管這些分子組件極易受到不可避免的隨機波動影響，但活細胞對時間的追蹤非常精確。例如，單細胞藍細菌中，自然晝夜鐘可以追蹤一天24小時。這些生物時鐘的準確性經過了進化的考驗，可以被認為是生物學家Richard Dawkin形容的“盲眼鐘表匠”的杰作——Dawkins用這
圖1. 與細胞內蛋白表達相比，無細胞蛋白表達系統能夠顯著地節約時間。 與基于細胞的蛋白表達系統相比較，無細胞蛋白表達系統具有獨特的優勢，包括節約時間、提高具有功能的、可溶的、全長蛋白的總體產量。本文介紹了根據模板類型、期望產率以及下游實驗等因素來選擇無細胞蛋白表達系統的標
五、哺 乳 動 物 細 胞以前通常認為哺乳動物表達方法是重組蛋白表達效率最低的方法。然 而 ，最近的研究進展已經極大地提高了哺乳動物細胞系的表達水平(詳 見 第 15章)。例如, 有報道稱利用穩定轉染的中國倉鼠卵巢(Chinese hamster ovary,C H O )細胞，重組抗體的表
在當今社會，腰痛（LBP）患者數量龐大，LBP患者也因此飽受病痛折磨，椎間盤退變（IDD）作為LBP的最主要病因，其發病機制十分復雜，目前已知的就有基因、年齡和包括職業因素、吸煙、酗酒在內的一些不良生活習慣等因素。據統計，作為腰痛的主要病因的IDD疾病一年會給全球的經濟造成超過700億歐元的損失
通過外源DNA的重組、克隆、以及鑒定，可以獲得所需的特異DNA克隆。外源克隆基因在某種表達載體及適宜的宿主細胞中可表達為相應的蛋白質，這就組成了外源基因的蛋白表達系統。表達后的蛋白質必須具有原來的生物學活性，這是基于正確的基因轉錄、轉錄后加工、mRNA翻譯及翻譯后修飾，同時與表達載體的結構和表達體系
研究者們在分離到某一基因后，要對其編碼蛋白質進行研究最理所當然的工作就是表達——即：有目的性地合成外源基因產物。在重組DNA技術的發展早期，人們認為在基因的前面有一個強啟動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨后，認識到獲得有效的翻譯所需的條件要復雜得多，除了要有強啟動子
細菌表達系統有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時間短, 不僅便于快速評價實驗結果，而且降低了技術和設備無菌要求的嚴格性。經過簡單的調整, 許多在實驗室規模下具有的這些內在優點在大規模的自動生產過程中也具有 。實驗步驟一、使用大腸桿菌生產外源蛋白有越來越多的細菌表達系統可用于外源蛋白
治療性重組蛋白或單克隆抗體是影響細胞、組織、器官乃至生命的外源性重組蛋白，在細胞內成熟過程中幾乎均會發生蛋白質糖基化修飾，而糖基化修飾的質和量的差異，可能會影響相關重組蛋白表達水平、結構及功能。重組蛋白表達服務可以幫助研發人員研發高效、高質量的蛋白質。在生物體中50%以上的蛋白質存在糖基化現象，
實驗方法原理 實驗步驟 一、使用大腸桿菌生產外源蛋白 有越來越多的細菌表達系統可用于外源蛋白的生產。影
無細胞蛋白表達技術是指用含有蛋白合成必需的組分（核糖體，轉運RNA，氨酰合成酶，啟動/延伸/終止因子，三磷酸鳥苷，ATP，Mg2+和K+）的細胞裂解物在體外進行蛋白合成。與傳統的基于細菌或真核細胞的蛋白表達系統相比較，無細胞蛋白表達系統具有獨特的優勢，包括節約時間、提高具有功能的、可溶的、全長蛋白的
影響E.coli 中蛋白表達量的因素除載體啟動子結構以外，還有質粒拷貝數、質粒穩定性、mRNA結構、密碼子的偏愛性和宿主菌的生長狀態等因素[58]。由于Vector NTI suitor7.0軟件模擬表達，可知mRNA結構和密碼子的偏愛性兩個影響因素不會造成表達困難，所以本實驗的工作主要
轉錄后基因沉默，也稱為RNA干擾，是指雙鏈RNA分子阻斷或者降低同源基因的表達的現象。這種現象可能是作為一種抑制病毒感染和轉座子跳躍的細胞防御機制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratc
環狀RNA作為研究持續火熱的明星分子，不同于對其豐富的表達譜研究，環狀RNA功能機制研究還僅僅處在起步階段。環狀RNA研究多為miRNA海綿機制，部分circRNA可競爭性結合miRNA，解除miRNA對靶基因的抑制作用，上調靶基因的表達。其實，環狀RNA可以通過結合不同種類的功能蛋白，分別在轉
RNA甲基化領域是當前最耀眼的國際科研明星，也是國自然申請的大熱點；究其原因，是因為最近一兩年，RNA甲基化的功能與分子機制方面取得了巨大的進展。RNA甲基化已被證實在癌癥發生發展，病毒感染，神經發育，干細胞分化等過程中發揮著關鍵作用。今天，我們承接上一期的癌癥篇，為您帶來病毒領域的RNA甲基化
RNA甲基化領域是當前最耀眼的國際科研明星，也是國自然申請的大熱點；究其原因，是因為最近一兩年，RNA甲基化的功能與分子機制方面取得了巨大的進展。RNA甲基化已被證實在癌癥發生發展，病毒感染，神經發育，干細胞分化等過程中發揮著關鍵作用。今天，我們承接上一期的癌癥篇，為您帶來病毒領域的RNA甲基化研究
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。 目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。 目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用。在這里，我
原位分子雜交和免疫組化SP法對PTEN的檢測 【摘要]目的：研究原位分子雜交和免疫組化sP法檢測PTEN mRNA及其蛋白在HCC中的表述隋況。方法：56例肝細胞肝癌組織、17例肝硬化組織手術切除標本，經40g／L福爾馬林固定，4 m厚連續切片，HE染色，病理診斷證實。結果：HCC組織中，
1 植物群體遺傳蛋白質組學 1.l 遺傳多樣性蛋白質研究基于基因組學的一些遺傳標記，如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen
軸突是神經沖動傳遞過程中結構與功能的基本單位。無論在中樞抑或是周圍神經系統損傷后，誘導有效的軸突再生過程是改善神經功能的基礎。現已證實，脊髓損傷后軸突能否再生不僅取決于其固有的生長能力，還取決于軸突所處的環境。神經系統損傷后，神經細胞對軸突再生相關基因的表達動員能力及細胞骨架原料的形成能力是決定
近日，《植物細胞》在線發表中國農業科學院生物技術研究所與華南農業大學合作研究成果。他們揭示了自然界光信號途徑與植物內部的生物鐘互作協同調控生物鐘關鍵基因CCA1節律性表達的分子機理。FHY3 和FAR1蛋白促進CCA1的表達，而PIF5 和TOC1蛋白抑制CCA1表達。進一步，PIF5與TOC1
1 甲醇酵母表達系統的特點 1.1 宿主 七十年代巴斯德畢赤酵母曾被用于生產單細胞蛋白（SCP），有很好的發酵基礎，菌體密度可達100g/L干重。其生長培養液的組分包括無機鹽、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉價而無毒。它能在以甲醇為唯一碳源的培養基中快速生長，其中醇氧化酶AOX——甲醇代謝途徑
（3）CHO細胞穩定表達系統：動物細胞瞬時表達系統中外源基因沒有穩定地整合到宿主細胞染色體中，一染色體外DNA的形式存在。因而只能瞬時表達。要使外源基因在宿主細胞中高效、穩定地表達，必須建立一個穩定表達系統，包括適宜的表達載體、有效的基因轉染、標記基因和目標基因的選擇與共擴增、受體適當的受體細胞和培
在基因表達研究中，研究者比較注意選擇合適的表達載體和宿主系統，而往往忽視基因本身是否與載體和宿主系統為最佳匹配這樣一個實質性問題。基因的最佳化表達可以通過對基因的重新設計和合成來實現，如消除稀有密碼子而利用最佳化密碼子，二級結構最小化，調整GC含量等。以下就密碼子最佳化、翻譯終止效率和真核細胞
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題，包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸，關于包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化，內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌？ 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎