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    PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究

    基因芯片技術具有快速多樣、微型化和自動化等特點在生物醫學領域廣泛的應用。但由于其基本原理是基于核酸雜交技術,有著內在的缺陷,實驗的敏感性和重復性都存在一定問題。核酸雜交較適合于檢測基因的表達,不易檢測基因組DNA的基因的重排,突變和缺失。而大多數腫瘤性疾病和一些遺傳變異和表型的改變與后者有關。為了解決上述問題,我們將芯片技術與熒光PCR技術相結合,設立設計一種含有大量微反應池的PCR基因芯片,以期能快速、準確的對基因的重排,突變和缺失等基因變異進行檢測。常規PCR反應產物的檢測是電泳后觀察獲得基因片段的大小,PCR基因芯片的關鍵問題是如何檢測出來在微反應池內獲得的極其微量PCR產物。本文應用一些臨床病例的實例標本,觀察能否在基因芯片上進行不同的熒光PCR反應,如何根據基因芯片上熒光的變化判斷基因的變異。1、病例、材料與方法1.1 基因組DNA標本健康成年人外周血DNA,正常臍血DNA,X連鎖遺傳性鐵粒幼細胞貧血(XLSA)家系成......閱讀全文

    PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法

     簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備

    熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用

    劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術,該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針,具有可實時監測,高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,極大地克服了原有PCR儀技術的不足,擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr;熒光;基因Flu

    定 量 P C R

    定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指

    感染性疾病基因診斷進展

    感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( PCR )

    PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究(三)

    2.2 PCR-SSCP并測序分析發現X連鎖遺傳性鐵幼粒細胞貧血家系ALAS2基因第5外顯子基因異常 分析兩兄弟及其父母、外祖父母的ALAS2基因,兩兄弟ALAS2基因第5外顯子的PCR擴增產物有與正常臍血不同的單鏈電泳條帶,他們的父親和外祖父有與正常臍血相同的單鏈電泳條帶,而他們的母親和外祖母同時

    數字PCR的前世今生:特點、優勢和局限性

    數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值(Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度

    PCR儀的分類及各自的介紹

     PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,它是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”一樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。 PCR儀也叫基因擴增儀,它是利用PCR技術對特定基因做

    PCR儀的分類及各自的介紹

    PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,它是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”一樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。 PCR儀也叫基因擴增儀,它是利用PCR技術對特定基因做試管內的大量

    多重PCR-基因芯片檢測新研究

      來自中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所傳染病診斷室的研究人員建立并初步評價了一種針對重要腸道病原菌的多重PCR基因芯片檢測方法,這一方法具有較高的特異性,并且混合PCR可以分別按照種屬內和種屬間的引物組合方案用于多病原的篩檢。   感染性腹瀉在我國發病率居各類傳染病之首,長期以來嚴重危害人民

    十九大!看看分子病理領域,未來發展方向!

      今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展!  其實相對于其

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    來自疾病預防控制中心傳染病預防控制所傳染病診斷室的研究人員建立并初步評價了一種針對重要腸道病原菌的多重PCR基因芯片方法,這一方法具有較高的特異性,并且混合PCR可以分別按照種屬內和種屬間的引物組合方案用于多病原的篩檢。 感染性腹瀉在我國發病率居各類傳染病之首,長期以來嚴重危害人民健康。其中絕大

    梯度PCR儀的概述

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    轉基因食品的檢測

    摘要:本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞:轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Genetically modifi

    基因芯片的必備知識和操作流程

    基因芯片  技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門,曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交  為基本原理,基于A和T、G和C的

    轉基因食品的檢測(二)

    (1) 定性PCR法定性PCR可直接檢測啟動子、終止子、標記基因片斷、目的基因片斷。為使目的基因很好的進行表達,在構建基因表達載體時常在目的基因的5’和3’端分別加上啟動子和終止子。當前大約75%的轉基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S啟動

    梯度PCR儀的簡介

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    梯度PCR儀的應用

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    液相芯片技術的原理與應用進展

       液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原 抗體、酶 底物、配體 受體的結合

    液相芯片技術的原理與應用

    液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原抗體、酶底物、配體

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    一般情況下PCR基因擴增儀使用狀況

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    李金明:我國臨床分子診斷試劑發展歷史、問題及思考

      引言  一提到分子診斷,人們自然會想到核酸和基因。的確,分子診斷技術的發展與分子生物學的研究是分不開的,自1953年Watson和Crick發現DNA雙螺旋結構以來,一系列分子生物學新技術相繼出現,如Sanger測序、放射性核素和非放射性核素標記技術、電泳、層析、核酸純化、核酸液相和固相雜交、基

    我國臨床分子診斷試劑發展歷史、問題及思考

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    基因多態性的檢測方法概述

    多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性

    基因多態性的檢測方法

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    lncRNA在農業領域的研究成果

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