新型單細胞擴增技術有助避免遺傳病
中美研究人員在新一期美國《科學》雜志上報告說，他們研制出一種新型單細胞全基因組擴增技術，在此基礎上不僅有望避免許多遺傳性疾病遺傳給后代，從基因組角度更深入地認識癌癥也將成為可能。 單細胞研究是當前生命科學研究的重要方向之一。許多關鍵的生命活動都和細胞間個體差異密切相關；許多重要的生命科學和醫學問題所能依賴的樣品往往也是極少數細胞。但在相關研究中，由于單個細胞中的ＤＮＡ（脫氧核糖核酸）的含量極少，先需要通過全基因組擴增技術將ＤＮＡ進行擴增，從而便于單細胞測序。 最新單細胞擴增技術名為ＬＩＡＮＴＩ，由美國科學院院士謝曉亮教授領導的研究團隊經４年努力研發而成。謝曉亮同時在哈佛大學和北京大學任職。他告訴新華社記者，跟以前技術相比，新技術“在所有指標上都有大幅度提高，讓單細胞擴增與測序更加精準”。 首先，單細胞基因組經ＬＩＡＮＴＩ技術放大后，“噪音”非常小，這使測量基因拷貝數的精確度非常高。拷貝數是指某基因在基因組中的個數。人的......閱讀全文
單細胞分離用于單細胞基因擴增
單細胞分離連接不同管徑大小的毛細玻璃針，可分離捕獲各種非貼壁狀態的單細胞和微粒等，如細菌、酵母、藻類細胞、植物花粉、原生動物單細胞、懸浮細胞、血液細胞、免疫細胞、卵細胞、各種懸液中單細胞及特殊標記的單細胞等。 單細胞分離用于各種類型的細胞分離培養、純化、檢測；獲得單克隆細胞；用于單細胞基因擴增，
單細胞的可靠全基因組擴增
目前多種新型分析技術，如新一代測序和芯片，都是為細胞群體而設計的，需要一定的樣本量。對于一些臨床或法醫樣本，如腫瘤細胞或循環胎兒細胞等，它們的細胞數量有限，直接限制了其下游應用。例如，在分析腫瘤細胞中的體細胞DNA突變或單個細菌基因組時，單細胞中的DNA無法滿足測序的mg級樣品量需求。為了從少量樣品
新型單細胞擴增技術有助避免遺傳病
中美研究人員在新一期美國《科學》雜志上報告說，他們研制出一種新型單細胞全基因組擴增技術，在此基礎上不僅有望避免許多遺傳性疾病遺傳給后代，從基因組角度更深入地認識癌癥也將成為可能。 單細胞研究是當前生命科學研究的重要方向之一。許多關鍵的生命活動都和細胞間個體差異密切相關；許多重要的生命科學和醫學
單細胞基因組擴增法的定量評估
近日， Nature出版集團旗下刊物Scientific Reports刊發南方科技大學副教授賀建奎課題組最新研究成果《單細胞基因組擴增法的定量評估及其在檢測單個海馬神經元基因拷貝數變異的應用》，從多個角度評估了三種最常用的單細胞基因組擴增方法。經過細致比較發現，MALBAC和GenomePle
單細胞全基因組擴增技術大比武
2013年，權威技術期刊《Nature Methods》將年度技術授予了單細胞測序。正如社論中所說，每個細胞都是獨一無二的--它占據了獨特的空間位置，它的復制基因組中攜帶了獨特的錯誤。然而，過去以細胞群體為對象的研究只獲得了平均值，而忽略了異質性。目前多種新型分析技術，如NGS，都是為細胞群
2017單細胞擴增測序技術的最新進展
細胞是構成生命體的結構和功能的基本單位，不同類型的細胞形態迥異，功能也各不相同。即使是同類細胞間看似相同，相互間也存在著廣泛的細胞異質性。傳統的群體細胞分析檢測能更快速方便的獲得大量數據并利于進行有效的統計學分析，但是隨著研究的深入，這種基于群體細胞分析所獲得的平均性數據，往往忽略了細胞個體間的
單細胞水平揭示造血干細胞擴增的動態圖譜
造血干細胞具有自我更新和分化的生物學特征，既可以維持其自身在造血組織中的恒定數量，又能向紅系、粒系、巨核系和淋巴系等多種血細胞分化。造血干細胞移植廣泛應用于白血病、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征等臨床血液系統惡性腫瘤的治療，然而，造血干細胞來源不足，限制其廣泛應用。因此，如何模擬體內造血干細
謝曉亮教授Science報道新型單細胞基因組線性擴增法
謝曉亮教授在4月14日的Science上發表文章報道了實驗室的最新研究：一種新型的單細胞基因組線性擴增的方法——轉座插入（LIANTI,Linear Amplification with Transposon Insertion）。LIANTI法在檢測拷貝數目變異和單核苷酸變異上的準確度都優于以
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
Namocell單細胞分離儀應用——單細胞測序
2018年11月，Namocell與CZ-Biohub（Chan Zuckerburg Biohub）合作，在單細胞測序領域做出了新的嘗試。CZ-Biohub利用Namocell單細胞分離儀分選出目的B細胞，并且將其進行單細胞測序，為抗體新藥的發現邁出了重要一步。單細胞RNA測序（scRNA-s
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術，其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子，被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA，然后與引物2退火，通過反轉錄合成雙鏈DNA，在T7 RN
CloneSelect?單細胞分離系統?OR?傳統單細胞克隆方法
CloneSelect??Single-Cell?Printer??f.sight??（?f.sight?）被開發用于滿足這些需求，?它可以柔和地接種單個細胞至微孔，同時記錄整個細胞接種過程，提供單克隆性的圖像證據以及優異的接種后細胞生長用于細胞株開發在這個研究中，我們開展了六組實驗，用無血清培養基
基因擴增PCR的擴增與克隆方法介紹
①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性 ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。 ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%
單細胞凝膠電泳法檢測單細胞DNA損傷
單細胞凝膠電泳（single-cell gel eiectrophoresis，SCGE）又稱慧星試驗（comet assay）是一項較新的電泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于檢驗DNA單鏈斷裂以來，經過不斷的改進，已成為一種快速、靈敏、簡便的檢測DNA損傷的方法，廣泛地應用
Namocell單細胞分離儀應用介紹——藻類單細胞分離
Namocell單細胞分離儀最新應用：隨著人們對環境研究的不斷深入，研究人員逐漸將目光轉向藻類的單細胞層面：有些需要對藻類進行單細胞級別的分析（如藻類單細胞測序等），也有需要對單細胞藻類進行培養。這樣就面臨一個棘手的問題，那就是如何獲取藻類的單個細胞。通常實驗室里的方式，是在顯微鏡下用毛細管吸取。這
PCR擴增儀
聚合酶鏈鎖反應，Polymerase chain reaction，簡稱PCR，是一種分子生物學技術，用于擴增特定的DNA片段，這種方法可在生物體外進行，不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。PCR這項技術，被廣泛地運用在醫學和生物學的實驗室，例如用于判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診
噬斑擴增實驗
實驗方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。實驗材料 重懸重組噬斑貼壁生長良好的細胞HeLa S3 細胞試劑、試劑盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培養基篩選試劑（麥考酚酸 黃嘌呤／次黃嘌呤）5-溴脫氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇儀器、耗材
噬斑擴增實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。 實驗材料 重懸重組噬斑 貼壁生長良好的
PCR擴增過程
①首先是將含有待擴增DNA樣品的反應混合物放置在高溫（>91℃）環境下加熱1分鐘，使雙鏈DNA變性，形成單鏈模板DNA；②降低反應溫度（約50℃），致冷1分鐘，使寡核苷酸引物與兩條單鏈模板DNA發生退火作用并結合在靶DNA區段兩端的互補序列位置上;③將反應混合物的溫度上升到72左右保溫1-數分鐘，在
PCR擴增過程
①首先是將含有待擴增DNA樣品的反應混合物放置在高溫（>91℃）環境下加熱1分鐘,使雙鏈DNA變性,形成單鏈模板DNA；②降低反應溫度（約50℃）,致冷1分鐘,使寡核苷酸引物與兩條單鏈模板DNA發生退火作用并結合在靶DNA區段兩端的互補序列位置上;③將反應混合物的溫度上升到72左右保溫1-數分鐘,在
噬斑擴增實驗
實驗方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。實驗材料重懸重組噬斑貼壁生長良好的細胞HeLa S3 細胞試劑、試劑盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培養基篩選試劑（麥考酚酸 黃嘌呤／次黃嘌呤）5-溴脫氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇儀器、耗材杯狀超
PCR基因擴增
實驗概要PCR擴增目標DNA片段。實驗原理多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。? 1. 模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃
單細胞是什么
單細胞既可以指單細胞生物，比如細菌等，也可以指從多細胞生命體分離的單個細胞，比如實驗室培養的人體細胞等。此外，受精卵也是單細胞，屬于可以發育成完整生命體的全能干細胞。
單細胞分離技術
單細胞測序日趨火爆的原因很大程度上得益于單細胞分離技術的不斷完善。這一講，我們將跟大家一起回顧傳統的單細胞分離技術，并重點介紹單細胞分離技術的新寵微孔芯片技術及微流控技術。圖1為目前常見單細胞分離設備。圖1：目前常見單細胞分離設備傳統單細胞分離技術相信許多實驗人員，都見過下面我們要介紹的傳統的單細胞
什么是單細胞
單細胞生物 生物可以根據構成的細胞數目分為單細胞生物（Protozoa）和多細胞生物（Metazoa）。單細胞生物只由單個細胞組成，個體微小，用肉眼很難看的見，大多數單細胞生物生活在水域環境中，有些寄生在我們身上。單細胞生物靠分裂繁殖（酵母菌在適宜的環境下出芽繁殖）單細胞生物包括所有古細菌和真細菌和
基因擴增的含義和擴增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又稱DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應位置的
基因擴增的含義和擴增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又稱DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應位置的
PCR擴增模板和抗體可變區基因的擴增
PCR?擴增模板和抗體可變區基因的擴增???? 如果構建Fab抗體庫,必需利用RT-PCR獲取抗體基因;構建ScFv抗體庫,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在構建小鼠ScFv抗體庫過程中,主要采用DNA作為擴增模板。?【材料和試劑】（1）PCR儀（2）Taq酶（3）氯仿（4）瓊脂糖?【