泛素化研究取得進展
泛素化是指泛素(一類低分子量的蛋白質)分子在一系列特殊的酶作用下，將細胞內的蛋白質分類，從中選出靶蛋白分子，對靶蛋白進行特異性修飾的過程。泛素化在蛋白質的定位、代謝、功能、調節和降解中起重要作用，同時參與細胞周期、增殖、凋亡、分化、轉移等幾乎一切生命活動的調控。泛素化與腫瘤、心血管等疾病的發病密切相關。作為近年來生物化學研究的重大成果之一，泛素化成為研究、開發新藥物的新靶點。近日，受Nature Protocols雜志邀請，中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院張小飛研究組與荷蘭內梅亨大學共同發表了一篇系統鑒定泛素相互作用蛋白研究方法的指南論文。根據與蛋白質底物連接的蛋白分子數量和拓撲結構，泛素化分為單泛素化、多位點單泛素化和多聚泛素化，其中同型多聚泛素化又可能細分為8個亞型。現階段，人們對于細胞是通過哪些泛素，結合蛋白識別不同類型的多聚泛素化，仍處于個案研究，缺少系統性。近年來，張小飛研究組與荷蘭內梅亨大學、荷蘭萊頓大學開發了......閱讀全文
蛋白質的蛋白質的提取技術
選擇材料及預處理? 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方
蛋白質轉印法檢定蛋白質
蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose）?上，先經?素洗去SDS，并使蛋白質回?原態抗原性，可使用抗體進?免疫染色?（Towbin?et?al,?1979）。儀器用具：電泳轉印槽?（Hoefer?Tra
蛋白質根據蛋白質結構進行分類
纖維蛋白（fibrous protein）：一類主要的不溶于水的蛋白質，通常都含有呈現相同二級結構的多肽鏈許多纖維蛋白結合緊密，并為單個細胞或整個生物體提供機械強度，起著保護或結構上的作用。球蛋白(globular protein)：緊湊的，近似球形的，含有折疊緊密的多肽鏈的一類蛋白質，許多都溶于水
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—蛋白質激酶C
試劑、試劑盒PKC 分析緩沖液組蛋白 HI 儲存液磷脂酰絲氨酸甘油二油酸脂實驗步驟1. 在冰浴的離心管內配制如下 20 μl 反應混合物：5X PKC 分析緩沖液??????????????????????????????????????? 4 μl10 mg/ml 組蛋白 HI 儲存液 ?????
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析
試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl，室溫（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室溫（p
完全蛋白質、不完全蛋白質及半完全蛋白質的概念
完全蛋白質所含必需氨基酸種類齊全，數量充足，相互之問比例也適當，不但能夠維持成人的健康，也能夠促進人體的生長發育，如乳中的酪蛋白、蛋類中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麥中的麥符蛋白等。?半完全蛋白質所含各種必需氨基酸種類齊全，但各種氨基酸含量多少不勻，互相之間比例不合適。在膳食中作為唯一的蛋白質來源時，
蛋白質分離實驗_分離未知－pI－蛋白質
用 CE 進行 IEF分離是選擇隨后用于在非衍生毛細管柱上分離蛋白的緩沖液系統的有效的第一步。如果沒有檢測到蛋白質，可能是被吸收到柱的硅表面。在離子去垢劑如 SDS 存在的情況下重復分離過程，這樣就會用負電荷包被蛋白質從而阻止吸收。但是，這意味著蛋白質只能依據大小的不同而進行分離。知道蛋白質的 pI
蛋白質譜測定蛋白質的基礎原理
蛋白質是一條或者多條肽鏈以特殊方式組合而成的生物大分子，大多數蛋白質會自然折疊為一個特定的三維結構。蛋白質的結構層次可以分為一級結構、二級結構、三級結構和四級結構： 一級結構：組成蛋白質多肽鏈的線性氨基酸序列。 二級結構：依靠不同氨基酸之間的C=O和N-H基團間的氫鍵形成的穩定結構，主要為α
蛋白質組和蛋白質組學分析
?隨著人類基因 組計劃研究成果的公布，人們對基因的認識逐漸清晰，但基因數量的有限性和基因結構的相對穩定性，與生命現象的復雜性和多樣性之間存在巨大反差。如何了解眾多的基因與危害人類身心健康的疾病之間的關系，對生命科學研究者來說仍是一項長期而艱巨的任務。因此，作為生命活動的直接承擔者――蛋白質，成為后基
蛋白質分離和分析——凝膠蛋白質染色
實驗步驟?基 本 方 案 1 考馬斯亮藍染色檢測范圍為〇.3?lMg 每蛋白質條帶。材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)聚丙烯酰胺凝膠（單 元 12. 3)考馬斯亮藍、銀染用固定液考馬斯亮藍染液甲醇/乙酸脫色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 濾 紙（可選）干 膠 儀（可選
蛋白質譜測定蛋白質的基礎原理
蛋白質是一條或者多條肽鏈以特殊方式組合而成的生物大分子，大多數蛋白質會自然折疊為一個特定的三維結構。蛋白質的結構層次可以分為一級結構、二級結構、三級結構和四級結構：一級結構：組成蛋白質多肽鏈的線性氨基酸序列。二級結構：依靠不同氨基酸之間的C=O和N-H基團間的氫鍵形成的穩定結構，主要為α螺旋和β折疊
蛋白質純化
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛，是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質，一些含量十分豐富，一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質，必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。
蛋白質測序
一、概念當前，所謂蛋白質測序，主要指的是蛋白質的一級結構的測定。蛋白質的一級結構(Primary structure)包括組成蛋白質的多肽鏈數目。很多場合多肽和蛋白質可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白質生物功能的基礎。 蛋白質氨基酸順序的測定是蛋白質化學研究的基礎。自從1953年F.San
蛋白質電泳
蛋白質電泳（主要內容如下）One-Dimensional SDS-PAGETwo-Demensional SDS-PAGEProtein Electrophoresis in Agarose Gel?Gel StainingRecipesOne-Dimensional SDS-PAGE·??????
蛋白質標記
Biosynthetic labeling?(Sefton Lab)Biotinylation of Antibody?(Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl?(ScienceXchange)Protein (
蛋白質定量
Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups?New?(Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept
蛋白質染色
二維凝膠電泳(2-DE)是廣為蛋白質組學科學家們應用的經典技術之一，蛋白混合物在兩個維度上被分離。第一步是常規的等電聚焦，此過程中蛋白質根據其等電點被分離。接著，第二維使用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，將蛋白質按分子量進一步分離。上述兩步操作在互相垂直的兩個方向上，使分離的蛋白
蛋白質純化
是當代生物產業當中的核心技術。該技術難度、成本均高；例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質分離純化當中。常用技術有：１、沉淀，２、電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。３、透析：利用透析袋把大分子蛋白質與小分
蛋白質測序
進行蛋白質測序的方法包括： 埃德曼降解 肽質量指紋圖譜 質譜分析 蛋白酶水解法 如果編碼蛋白質的基因是已知的，那么目前測序和推斷蛋白質序列要容易得多。通過上述方法之一確定蛋白質氨基酸序列的一部分(通常是一端)可能足以鑒定攜帶該基因的克隆。
蛋白質測序
一、概念當前，所謂蛋白質測序，主要指的是蛋白質的一級結構的測定。蛋白質的一級結構(Primary structure)包括組成蛋白質的多肽鏈數目。很多場合多肽和蛋白質可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白質生物功能的基礎。 蛋白質氨基酸順序的測定是蛋白質化學研究的基礎。自從1953年F.San
蛋白質測序
Edman降解法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要有質譜法，利用蛋白質測序儀進行測序以及利用蛋白質對應DNA或mRNA進行間接測序。傳統的蛋白質測序實驗一般包括以下步驟：1
蛋白質純化
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛，是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質，一些含量十分豐富，一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質，必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。用于分離蛋白質的最重要特性有大小、電荷、疏水性和對其他分子的
蛋白質測序
一、概念當前，所謂蛋白質測序，主要指的是蛋白質的一級結構的測定。蛋白質的一級結構(Primary structure)包括組成蛋白質的多肽鏈數目。很多場合多肽和蛋白質可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白質生物功能的基礎。 蛋白質氨基酸順序的測定是蛋白質化學研究的基礎。自從1953年F.San
蛋白質亞基
在結構生物學，一個蛋白質亞基是一個單一的蛋白質分子，其組裝（或“?coassembles?”）與其他蛋白質分子以形成蛋白復合物。一些天然存在的蛋白質具有相對較少的亞基，因此被描述為寡聚體，例如血紅蛋白或DNA聚合酶。其他的可能由非常多的亞基組成，因此被描述為多聚體，例蛋白質亞基如微管和其他細胞骨架蛋
蛋白質測定儀測奶制品蛋白質
隨著人們生活水平的提高,鮮奶已成為人們普遍食用的營養佳品。鮮奶中蛋白質、脂肪、糖類含量豐富,且易被人體消化吸收;鮮奶中鈣、鐵等礦物質含量也很豐富,是人們補鈣的天然優良食品。在日本就有一杯奶改善一個民族之說。蛋白質是鮮奶的重要組成成分,也是評價鮮奶質量的重要營養學指標之一。 目前，市售部分大
蛋白質的結構及蛋白質的功能（二）
?? (二)蛋白質空間橡象與功能活性的關系 蛋白質多種多樣的功能與各種蛋白質特定的空間構象密切相關，蛋白質的空間構象是其功能活性的基礎，構象發生變化，其功能活性也隨之改變。蛋白質變性時，由于其空間構象被破壞，故引起功能活性喪失，變性蛋白質在復性后，構象復原，活性即能恢復。 在生物體內，當某種物質
蛋白質分離實驗_分離已知pI－的蛋白質
實驗材料含10 mg蛋白質／ml 的溶于水的樣品試劑、試劑盒緩沖液（pH>pI）儀器、耗材50 μm 內徑的未包被的融合硅毛細管柱CE 儀器實驗步驟1. 用 pH 高于蛋白質的pI的 5 mmol/L 緩沖液 1/10 （V/F） 稀釋蛋白質樣品，使蛋白質（終濃度 = 1.0 mg/ml） 產生電荷
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制 依賴環核苷酸的蛋白質激酶 蛋白質激酶C 酪蛋白激酶 酪氨酸激酶 凝膠蛋白質激酶分析 ? ? ? ? ? ?
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制依賴環核苷酸的蛋白質激酶蛋白質激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝膠蛋白質激酶分析試劑、試劑盒ATP儲存液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?實驗步驟一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多
蛋白質測定儀用于羊奶蛋白質測定
????? 研究表明，羊奶是最接近母乳的奶，分子結構與母乳最相似，含有大量的乳清蛋白，嬰兒對羊奶的消化率可達94%以上。因此在現代的很多奶制品生產企業，羊奶的生產頻率很高，而在這些企業的品控中心，一般都配備有蛋白質測定儀這樣的檢測儀器，用于測定羊奶中的蛋白質含量，從而保障產品的質量。?????