組織培養細胞染色體制備方法
組織細胞用于遺傳學分析最常見的是體外培養的細胞株，多為惡性腫瘤細胞株，且呈貼壁生長，僅小數細胞株為懸浮生長。培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和染色體標本制出清晰度高等優點。組織細胞染色體制備的關鍵是掌握好體外細胞的生長動態，只有處在對數生長期的細胞才能出現較高的分裂相，所以積水仙素處理的時機及量是染色體標本形態及分裂指數的關鍵。 1、 實驗材料 培養液（PRMI 1640、M199、DMEM等），小牛血清、0.025%胰蛋酶、秋水仙素，刻度離心管，直吸管及彎頭吸管，培養瓶或皿、KCL、甲醇、冰乙酸、載玻片。 2、 培養液配制 培養液 85-95% 小牛血清 5-15% 雙抗（選擇） 100u/ml 3、 操作過程（1）培養細胞：選擇處于指數生長期、用大瓶培養的80-90%匯合單層培養細胞；（2）終止培養：當有大量圓形發亮細胞出現時，加秋水仙素0.01-0.03ug/ml培養混合液，置溫箱繼續培養6-10......閱讀全文
組織培養細胞染色體制備方法
組織細胞用于遺傳學分析最常見的是體外培養的細胞株，多為惡性腫瘤細胞株，且呈貼壁生長，僅小數細胞株為懸浮生長。培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和染色體標本制出清晰度高等優點。組織細胞染色體制備的關鍵是掌握好體外細胞的生長動態，只有處在對數生長期的細胞才能出現較高的分裂相，所以積水仙素處理的時機及量是染
骨骼細胞染色體制備方法
1. 在含有細胞培養基的細胞培養管中無菌添加骨髓樣本1ml(參考細胞密度
淋巴細胞染色體制備方法
1. 向含有細胞培養基的細胞培養管中無菌添加全血0.5ml，蓋緊培養瓶，充分混均；2. 水平培養72 h(37℃)；3. 加入20ul 秋水溶液，培養2 h；4. 離心5 min（2000 rpm）；5. 去除上清液，保留0.5ml的細胞；6. 重新充分混懸細胞1；7. 加入5ml 低滲溶液(KCl
胸腹水細胞染色體制備方法
在惡性腫瘤的胸腹水中有大量的分裂期細胞，其中多以非整倍體細胞存在，并含有各種標記染色體。 1、 實驗材料 2.5%碘精、75%酒精、無菌棉球、鑷子20-22號無菌腰穿包、50ml離心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、載玻片等。 2、 操作過程（1）采樣：選擇有胸或腹水患者，在無菌條件下，輕腹
羊水細胞染色體制備方法（原位法）
細胞培養1. 將羊水（約20ml）轉移到無菌的離心管中，1000rpm離心10分鐘；2. 去除上清液，用于其它分析，保留細胞懸液約0.5~1ml，用培養基混勻到2~2.5ml左右；3. 將細胞懸液平分到3只Chromslide培養皿中；4. 培養24/48小時后，向每只Chromslide培養皿中加
絨毛染色體制備方法
絨毛來源于胚胎的中胚層，最早的初級干絨毛出現于孕三周初，孕8周左右是絨毛發育最旺盛時期。目前國內外絨毛取材多選于8-9周。研究資料表明，絨毛取樣不影響胚胎的發育及胎盤的功能。但取樣的失敗可導致胚胎丟失而終止妊娠。絨毛取樣前者首先要檢查陰道分泌物以判別陰道的潔凈度，防止取樣導致宮內感染。其次需做B超檢
人癌細胞染色體制備
實驗概要本實驗介紹了人癌細胞染色體制備的基本原理及操作步驟。有助于學習人類染色體制備的常規方法，了解人癌細胞染色體及其變異。實驗原理目前大多數癌癥都建立了相應的細胞株或細胞系，體外培養的癌細胞多屬于連續的周期細胞，可以用來制備染色體。國內外制備動物和人類染色體的常規方法是空氣干燥法，該方法的關鍵包括
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養，但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞，依據其外形和生長特征可區分為以下三類：上皮細胞（E）、成纖維細胞（F）和羊水細胞（AF）。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長，所以在培養過程中的生長期最短。AF細
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養，但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞，依據其外形和生長特征可區分為以下三類：上皮細胞（E）、成纖維細胞（F）和羊水細胞（AF）。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長，所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒環己酰亞胺勻漿緩沖液儀器、耗材培養皿實驗步驟1. 培養基中加入環己酰亞胺（溶于蒸餾水，貯存液濃度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，試著加熱到 40℃ 以幫助溶解）（終濃度 10 μmol/L)，37℃ 保溫 5~10 分鐘。2. 培養皿從 37℃ 轉移到冷室，立
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 環己酰亞胺 勻漿緩沖液
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒環己酰亞胺 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?勻漿緩沖液 ? ?
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點，掌握其體外生長動態，取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面：1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變，包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備
實驗概要本文介紹了人外周血染色體制備和體外培養細胞染色體標本制備的原理、操作流程及注意事項。實驗原理人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混勻，固定10min。⑧ 離心：同上，吸去上清液。⑨ 制細胞懸液：根據細胞量多少，加入適量固定液，充分混勻，制成細胞懸液。⑩ 滴片：取出預先經冰水浸泡的載玻片，用吸管吸取混勻的細胞懸液在離冰片約30cm距離進行滴片，每片約滴2～3滴細胞懸液，使細胞較好分散。一般每一培養瓶
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備1
一、 人外周血染色體制備實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。在培養液中加入植
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素，破壞細胞紡錘體的形成，使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞，低滲處理，使細胞脹大，染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質，使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片，然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
CHO細胞染色體制備[Harvard－Medical－School]
Mitshison Lab, Department of Systems Biology, Harvard Medical Schoolhttp://mitchison.med.harvard.edu/protocols/chr1.htmlBuffers:Swelling Buffer (PME):
骨髓細胞染色體標本的制備
一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者，特別是慢性或急性粒細胞性白血病，因為骨髓反映粒系統細胞增生情況，這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病，也不主張用外周血，因為加PHA刺激外周血培養，只能獲得正常淋巴細胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞，培養
人癌細胞染色體制備及觀察
一、實驗目的學習人類染色體制備的常規方法，了解人癌細胞染色體及其變異。二、實驗原理目前大多數癌癥都建立了相應的細胞株或細胞系，體外培養的癌細胞多屬于連續的周期細胞，可以用來制備染色體。國內外制備動物和人類染色體的常規方法是空氣干燥法，該方法的關鍵包括：1.秋水仙素的預處理：秋水仙素又叫秋水仙堿，它是
包被組織培養板制備實驗
實驗材料刀豆蛋白A試劑、試劑盒磷酸緩沖液（PBS）儀器、耗材6 孔 35 mm 組織培養板無菌塑料袋（用于保存包被板）實驗步驟1. 將 12 mg 刀豆蛋白 A 加入 120 ml 無菌的 PBS 中，至終濃度為 100 μg/ml。2. 在組織培養板的每孔中加入 1 ml PBS/刀豆蛋白 A 混
包被組織培養板制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 刀豆蛋白A
包被組織培養板制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 刀豆蛋白A
染色體制備
實驗方法原理 固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。實驗材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶對數期的培養細胞秋水仙酰胺試劑、試劑盒 低滲溶
染色體制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。
染色體制備
實驗方法原理固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。實驗材料D-PBS ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
染色體制備
實驗方法原理固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。實驗材料D-PBS0.25%胰蛋白酶對數期的培養細胞秋水仙酰胺試劑、試劑盒低滲溶液醋酸
染色體制備
一、 人外周血染色體制備 1. 實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，離心