RNA－蛋白質的相互作用1
葉綠體RNA的體外加工與紫外交聯分析RNARNA的合成l DNA模板的線性化1．根據供應商的指導用合適的限制酶酶解含有DNA模板（如亞克隆在轉錄載體如pBluescript?（Stratagene）上的菠菜葉綠體psbA基因）的質粒（Schuster and Gruissem1991）。2．用DNA瓊脂凝膠（Sambrook et al. 1989）分析線性化質粒以檢查酶解是否完全。3．用乙醇沉淀DNA（Sambrook et al. 1989），并重懸DNA沉淀于水中，調整線性DNA終濃度為200μg/ml。 l DNA模板的轉錄1．向微量離心管加入下列反應液DNA模板 &n......閱讀全文
RNA－蛋白質的相互作用1
葉綠體RNA的體外加工與紫外交聯分析RNARNA的合成l??????DNA模板的線性化1．根據供應商的指導用合適的限制酶酶解含有DNA模板（如亞克隆在轉錄載體如pBluescript?（Stratagene）上的菠菜葉綠體psbA基因）的質粒（Schuster and Gruissem1991）。2
RNA－蛋白質的相互作用2
葉綠體mRNA3’末端的體外加工l??????RNA加工反應1．在1.5ml微量離心管中加入下列反應液：緩沖液IVT（20×）????????????????????????????0.5μl葉綠體蛋白提取物（20μg）??????????????????????Lμl緩沖液E???????????
采用PACE分析RNA-肽相互作用實驗
聚丙烯酰胺共電泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 檢測是相對較晚發展起來的定量分析蛋白質、肽與 DNA 或 RNA 相互作用的方法。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理聚丙烯酰胺共電泳（poiyacrylamide coelec
采用PACE分析RNA-肽相互作用實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 聚丙烯酰胺共電泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 檢測是相對較晚發展起來的定量分析蛋白質、肽與 DNA 或 RNA 相互作用的方法。
采用PACE分析RNA-肽相互作用實驗
實驗方法原理 聚丙烯酰胺共電泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 檢測是相對較晚發展起來的定量分析蛋白質、肽與 DNA 或 RNA 相互作用的方法。實驗材料 低放射性標記物RNA 底物試劑、試劑盒 TBE 凝膠儲存緩沖液電泳緩沖液丙烯酰胺儲存液過硫酸銨考
蛋白質間相互作用研究方法1
確定各種可能與目標蛋白相互作用的蛋白質，“撒大網” l????????雙雜交和其他雙成分系統 第一階段：誘餌-LexA融合蛋白的鑒定 誘餌-LexA融合蛋白的構建 1．將編碼誘餌蛋白的靶DNA克隆到LexA融合載體的多聚接頭處，以合成一種框架內的LexA融合基因。確定誘餌序列的羧基端存在翻
蛋白質間相互作用研究方法1
LY: 宋體; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'">融合蛋白進行Far Western印跡來檢測蛋白質-蛋白質相互作用 ?放射標記蛋白探
RNA-蛋白質印跡法的技術應用
中文名稱RNA-蛋白質印跡法英文名稱Northwestern blotting定 義將經過電泳分離的蛋白質轉移到膜上再與某種特異的RNA探針雜交，是研究蛋白質與RNA特異結合的技術。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
酵母三雜交系統檢測和分析RNA-蛋白相互作用
一、引入 RNA 質粒和 cDNA 文庫通常首先將 RNA 質粒轉化到宿主菌株-L40coat 內，得到包含 RNA 質粒的細胞，再轉化一個融合了轉錄激活區的 cDNA 文庫（雜交 RNA 對宿主細胞幾乎沒有毒性，與用于雙雜交篩選的一些雜交蛋白
酵母三雜交系統檢測和分析RNA-蛋白相互作用實驗
酵母三雜交系統（yeast three-hybrid system）可用于分析蛋白質與 RNA 間的相互作用。在酵母三雜交系統中，RNA 蛋白質相互作用導致報道基因的轉錄，可以通過細胞生長、克隆顏色或特異的酶活性檢測蛋白質與 RNA 的相互作用。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方