蛋白質測定方法
蛋白質測定方法在生化研究中經常涉及到,它是很多實驗的基礎。因此,了解蛋白質測定方法相當重要。目前,常用的蛋白質測定方法有 以下五種方法:凱氏定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)、紫外吸收法和考馬斯亮藍法(Bradford法)。在這 五種測定法中,考馬斯亮藍法(Bradford法)和Folin-酚試劑法(Lowry法)這兩種靈敏度最高,而定氮法最復雜但準確。一般我們都使用定氮 法來測量標準蛋白質作為參考值。因此,凱氏定氮法在現實中更加常用。當然,我們在選擇蛋白質測定方法時,還得從以下方面考慮:1.實驗對測定所要求的靈敏度和精確度;2.蛋白質的性質;3.溶液中存在的干擾物質;4.測定所要花費的時間。下面,我們來具體看下各種測定方法以及優缺點介紹。(一)凱氏定氮法:樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液......閱讀全文
蛋白質測定方法
蛋白質測定方法在生化研究中經常涉及到,它是很多實驗的基礎。因此,了解蛋白質測定方法相當重要。目前,常用的蛋白質測定方法有 以下五種方法:凱氏定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)、紫外吸收法和考馬斯亮藍法(Bradford法)。在這 五種測定法中,考馬斯亮藍法(Br
蛋白質測定方法
蛋白質測定方法一般來說,有以下五種:凱氏定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)、紫外吸收法和考馬斯亮藍法(Bradford法)。表 五種蛋白質測定方法的比較 從以上表格中可以得出,不同的方法有不同的特點和優勢,如紫外吸收法測定時間快。但是綜合起來,最后一種考馬斯亮藍
蛋白質的測定方法
pro的測定方法分為兩大類:一類是利用pro的共性,即含氮量,肽鏈和折射率測定pro含量,另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸、堿性基團和芳香基團測定pro含量。但是食品種類很多,食品中pro含量又不同,特別是其他成分,如碳水化合物,脂肪和維生素的干擾成分很多,因此pro的測定通常利用經典的剴氏定
蛋白質測定方法的原理
1、凱氏定氮法準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化。消化完畢后進行蒸餾,全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴
蛋白質測定方法及其比較
目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍 使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法); 還有近來廣為應用的蛋白定量方法——BCA法。其中Bradford法和Lowry法靈敏度較高,
蛋白質的定量測定方法
一、微量凱氏(kjeldahl)定氮法樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例,其反應式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
蛋白質的定量測定方法
一、微量凱氏(kjeldahl)定氮法樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例,其反應式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
蛋白質測定方法的比較
蛋白質的定量,是生物化學中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有以下幾種方法:定氮法、紫外吸收法、Lowry法(Folin-酚試劑法)、Bradford法(考馬斯亮藍法)、BCA法等:定氮法比較繁復,但較準確,往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標準蛋白。 紫外吸收法簡便、靈敏、快速,不消耗樣
如何改進蛋白質測定的方法
蛋白質是食品中最重要的營養成分,也是評價食品營養價值的重要指標,因而在食品分析中是一個高頻率的分析項目。就分析方法而言,GB/T 5009.5-2003中的第一法是首選的方法。蛋白質測定儀法是由樣品消化、水蒸氣蒸餾和滴定三個連續的操作步驟組成的。鑒于水蒸氣蒸餾耗水費電,且高溫操作較不安全,本文改
常用蛋白質測定方法的原理
1、凱氏定氮法準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化。消化完畢后進行蒸餾,全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴
蛋白質含量的測定方法(一)
實驗原理:蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法
蛋白質測定的方法有哪些?
1.凱氏定氮法準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化,之后進行蒸餾,全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴定終點
蛋白質含量的測定方法(二)
(二)試劑與器材1.試劑(1)試劑甲:(A) 10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙
比色方法測定蛋白質介紹
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等幾種方法。Lowry 法:以最早期的Biuret 反應為基礎,并有所改進。蛋白質與Cu2 反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影
常用蛋白質濃度測定方法匯總
蛋白質是細胞中最重要的含氮生物大分子之一,承擔著各種生物功能。蛋白質的定量分析是蛋白質構造分析的基礎。目前常用的蛋白測量的方法主要有BCA法、考馬斯亮藍法(Bradford)和Lowry法等。BCA法??原理在堿性環境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+(biuret reaction)
蛋白質含量的測定方法(三)
(二)Bradford法的優缺點1、Bradford法的突出優點是:(1)靈敏度高,據估計比Lowry法約高四倍,其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合后產生的顏色變化很大,蛋白質-染料復合物有更高的消光系數,因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比Lowry法要大的多。(2)測定快速、簡便,
幾種蛋白質濃度測定方法
一、Bradford法蛋白質與考馬斯亮蘭染料結合生成藍色物質,藍色物質的量與蛋白質濃度的高低成正比。生成的藍色物質在595nm處有最大光吸收,通過測定595nm的光吸收,來測定蛋白質濃度。實驗中一般利用牛血清白蛋白(BSA)來作標準曲線,此法的靈敏度為25~200ug/ml。甘油、吐溫(tween)
常用蛋白質測定方法的原理
1、凱氏定氮法準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化。消化完畢后進行蒸餾,全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴
蛋白質及蛋白質含量測定的幾種方法
蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。 蛋白質含量測定的幾種方法 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具
蛋白質及蛋白質含量測定的幾種方法
蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。蛋白質主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。 蛋白質含量測定的幾種方法? 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶
兩種蛋白質測定方法比較
植物組織總蛋白質的提取方法較多,常用的方法有TCA-acetone(三氯醋酸-丙酮沉淀)法,Tris法、磷酸緩沖液(PB)法和試劑盒法等。另外,蛋白質濃度的測定方法有紫外分光光度法(UV法)、Bradford法、定氮儀法、雙縮脲(Biuret)法、BCA(Bicinchoninic Acid)法
測定蛋白質含量的方法有哪些
1、凱氏定氮法凱氏定氮法是由丹麥化學家凱道爾于1833年建立的,現已發展為常量、微量、平微量凱氏定氮法以及自動定氮儀法等,是分析有機化合物含氮量的常用方法。凱氏定氮法的理論基礎是蛋白質中的含氮量通常占其總質量的16%左右,因此,通過測定物質中的含氮量便可估算出物質中的總蛋白質含量(假設測定物質中的氮
蛋白質含量的測定方法有哪些
蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子
蛋白質含量測定的操作方法
衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。?一般食品蛋白質含氮量為l0%如肉、蛋、豌豆
蛋白質含量的測定方法有哪些
蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子
測定蛋白質濃度的方法有哪些?
蛋白質是細胞中最重要的含氮生物大分子之一,承擔著各種生物功能。蛋白質的定量分析是蛋白質構造分析的基礎。 下面小編給大家匯總一下有哪些常用的蛋白測量的方法。 BCA法 原理 在堿性環境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+(biuret reaction)。BCA
蛋白質紫外吸收與濃度測定方法
[原理]由于蛋白質中存在著含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白質溶液在280nm處具有紫外吸收高峰。在一定濃度范圍內,蛋白質溶液在此波長處的吸光度與其濃度呈正比關系,因此利用這一性質可進行蛋白質定量測定。該法迅速、簡便、不消耗樣品、低濃度鹽類不干擾測定,可測定0.1~1.0mg/mL的蛋白質溶液。
蛋白質水解程度測定的常用方法
水解程度測定的常用方法是茚三酮法,利用待測蛋白樣品完全水解液做為茚三酮比色的標準樣品測定蛋白質的水解度。?水解度( Degree of hydrolysis,DH)代表水解過程中蛋白質肽鍵被裂解的程度,常用百分數來表示:DH =h/htot× 100%式中,h是水解后每克蛋白質被裂解的肽鍵數,毫摩爾
知識分享:蛋白質含量的測定方法
實驗原理: 蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bra