特異性檢測溶酶體亞硫酸氫鹽新武器：新款智能熒光探針
文章提出了一種新的基于邏輯與的熒光探針(NY-Lyso)，它由嗎啉基、半花菁苷和1,8-萘二甲酰亞胺顯色團組成，用于特異性檢測溶酶體中的亞硫酸氫鹽。該智能探針由兩個功能部件組成：NY-Lyso探針上的嗎啉基對細胞內溶酶體(pH 4.5-5.5)和其他細胞器之間的pH差異產生敏感反應，噻吩和花菁之間的碳碳雙鍵通過親核加成選擇性地與HSO3-反應。 嗎啉基和半花菁苷均能通過光誘導電子轉移(PET)和分子內電荷轉移(ICT)機制獨立淬滅發射，因此探針無熒光。當同時存在SO2和H+時，探針在524nm處表現出強烈的熒光發射。也就是說，只有當SO2和pH同時被認為是“輸入”時，熒光發射才會被“輸出”。值得注意的是，基于該方法的探針不僅具有高選擇性、快速響應(小于200s)、極低的檢測限(LOD = 20.7nM)和優良的溶酶體靶向性的優點，而且克服了在復雜的細胞pH環境中檢測HSO3?的局限性。與以前報道的用于SO2衍生物的生物探針......閱讀全文
特異性檢測溶酶體亞硫酸氫鹽新武器：新款智能熒光探針
文章提出了一種新的基于邏輯與的熒光探針(NY-Lyso)，它由嗎啉基、半花菁苷和1,8-萘二甲酰亞胺顯色團組成，用于特異性檢測溶酶體中的亞硫酸氫鹽。該智能探針由兩個功能部件組成：NY-Lyso探針上的嗎啉基對細胞內溶酶體(pH 4.5-5.5)和其他細胞器之間的pH差異產生敏感反應，噻吩和花菁之
功能納米熒光探針用于腫瘤細胞檢測
惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的重大疾病之一，目前已成為人類死亡的主要原因，并且其發病率呈逐年上升的趨勢。若能早期發現腫瘤并及時治療，可大大提高腫瘤的治愈率。因此，對于腫瘤的早期檢測和診治已成為各國科學家關注的熱點。為了實現腫瘤早期診治，目前研究大多集中于檢測活細胞內一種腫瘤標志物，這可能會帶來“假
監測活細胞內脂滴動態過程－“緩沖熒光探針”立大功
近日，大連化物所分子探針與熒光成像研究組（1818組）徐兆超研究員團隊利用“緩沖”策略，發展了細胞內脂滴動態識別熒光探針LD-FG，該探針具有優異的光穩定性，可在空間超分辨成像的基礎上實現高時間分辨率和長時間穩定成像，從而發現了多種新的脂滴動態過程。 脂滴是維持脂質和能量穩態的關鍵細胞器，由中
細胞形態觀察（電鏡檢測）活率測定（亞細胞結構分離）
一、實驗內容1、細胞電子顯微鏡檢測2、細胞活率測定3、亞細胞結構的分離與鑒定 二、實驗設計 前一天細胞傳代: 1. （電鏡）中午每班傳細胞入含小蓋片培養瓶3瓶 晚上1瓶正常、2瓶損傷 次日損傷2瓶中，其中1瓶損傷恢復 2. （活率）中午每組
細胞凋亡檢測實驗——熒光探針雙標記法
實驗方法原理本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡，同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿（HT）是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病，
什么是活細胞熒光
沒有聽說過這個術語，不過應該很好猜測，就是用熒光技術標記活細胞，可以是只有活細胞才能吸收的熒光物質，該物質被活細胞吸收后，該活細胞就發出熒光可用于觀測了。而死細胞不吸收就觀測不到熒光，可以區分細胞死活。
熒光探針的分類檢測
常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外，在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。 檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置（CCD）熒光成像（包括用于微區分析的激光共聚
新型DNA結構的熒光張力探針于活細胞機械力可視化研究
電學、化學和力學是細胞內最常見的三大信號系統，它們相互協調，共同維持著細胞的生命活動。前兩者已被人們廣泛研究,而細胞的機械力信號傳遞過程因缺少有效的研究方法，人們一直對其認識有限。研究表明，細胞在體內擁擠的環境中不僅通過擠來擠去以獲得足夠的生存空間，同時，細胞的生命過程也不斷的受到擠壓、拉伸、彎
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白
在過去的五年中，熒光蛋白在監測體內生物學研究中，起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是zui早被我們應 用的熒光蛋白，但是隨著時間的推移，現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富，包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它們都可以
檢測酶活性的熒光探針
檢測酶活性的熒光探針?共聚焦激光掃描顯微鏡除了具備熒光顯微鏡檢測熒光酶細胞化學的作用以外，在檢測活細胞酶活性動態變化方面有著無可比擬的優勢。通過對細胞施予不同的處理因素可檢測細胞內相應的酶被激活或滅活的動態變化過程。有的酶熒光探針是自身就可發出熒光、有的是與酶結合后發出熒光、有的則是被酶分解后發出熒
我所發展細胞膜緩沖熒光探針實現活細胞質膜形態動力學的超分辨熒光成像
近日，我所生物技術研究部分子探針與熒光成像研究組（1818組）喬慶龍副研究員和徐兆超研究員團隊發展了組裝介導的細胞膜緩沖熒光探針，實現了對細胞質膜的長時間穩定標記和超分辨動態熒光成像，觀察到了質膜絲狀偽足的動態運動和細胞外囊泡的分泌過程，發現了兩種細胞外囊泡的融合模式，為細胞質膜的超分辨動態成像提供
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白（二）
下一步就是要結合信號/背景優化結果確定最佳激發和發射波長。因為初步檢測結果的斯托克頓位移偏小(22nm)，顯然是要通過降低激發波長和增大發射波長來擴大兩者之間的差異，其次還需要找到合適的發射光阻隔濾片優化最佳靈敏度。最終，我們使用5 5 0nm的激發波長來激發， 同時使用570nm的發射光阻
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白（一）
簡介在過去的五年中，熒光蛋白在監測體內生物學研究中，起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是最早被我們應用的熒光蛋白，但是隨著時間的推移，現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富，包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋白。它們都可以在眾
酶標儀利用”無創”技術檢測活細胞熒光蛋白（三）
在本次實驗中，ZsGreen和DsRed細胞系在底讀模式都有著相似的檢測限，而且兩者都比AcGFP細胞系的檢測下限低3到4倍。本次實驗一共重復了三次，但是DsRed實驗結果并不是每次都能表現的足夠好。在一次實驗中，它的檢測下限近似于AcGFP，但是在另一次實驗中，它的檢測下限又會很高。我們將這些區別
熒光pH探針于細胞內pH檢測的使用（一）
細胞內pH在各種細胞事件中起重要的調節作用，包括細胞生長，鈣調節，酶活性，受體介導的信號轉導，離子轉運，內吞作用，趨化作用，細胞粘附等等。借助pH敏感的熒光指示劑，研究人員能夠以更高的靈敏度、空間分辨率、采樣密度來監控活細胞內的pH波動。?通常，細胞的細胞內pH在其各個細胞區室之間會有所不同。例如，
熒光pH探針于細胞內pH檢測的使用（二）
? pH 6.0 ?pH 8.5 ?圖2. 用RatioWorks?BCFL，AM標記的Hela細胞。將Hela細胞與5 μM RatioWorks?BCFL，AM（Cat# 21190）在37°C 下孵育30分鐘
局部熒光探針可以檢測腸癌啦！
近日，國際化學與生物學雜志chemistry＆biology發表了來自斯坦福大學醫學院Matthew Bogyo研究小組的一項最新研究成果，他們發現一種熒光淬滅探針（aABP）能夠特異性靶向在腸道發育不良中高表達的半胱氨酸蛋白酶，對指示腸道腫瘤具有非常高的敏感性和特異性。 早期檢測結腸息肉能夠
鈣離子熒光探針：比值型熒光探針
前面我們介紹了熒光指示劑法可以將Ca2+檢測的實驗與其他技術結合使用，如可以與流式細胞儀、熒光分光光度計、或者熒光顯微鏡進行聯合檢測 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等，數量較少，可見光型數目較多，包括Fluo-3、鈣黃綠素、Rhod-2等。熒光指示劑根據測光原理和數據
大連化物所可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針研究獲進展
可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針研究取得新進展 近日，中科院大連化學物理研究所1101組韓克利研究員在可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針的研究中取得新進展，相關結果以通訊的形式發表在最近一期的J. Am. Chem. Soc.上 (2011, 133 (29), pp 11030–1
活細胞間接免疫熒光法
一．實驗器材：1．??器材：40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2．??試劑：單抗隆抗體（單抗）、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、疊氮鈉（NaN3）等二．方法（微量法）1．??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分鐘
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（三）
細胞混合結果在本次實驗中，我們在一個96孔板里混合了多種細胞，保證每個孔大約50,000個細胞。因此，如果是1:1混合，那么每種細胞會有25,000個。如果是1:1:1混合，那么每種細胞將有16,700個。實驗板分別用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的優化結果)和550/588nm(D
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（一）
簡介在過去的五年中，熒光蛋白在監測體內生物學研究中，起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是最早被我們應用的熒光蛋白，但是隨著時間的推移，現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富，包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋白。它們都可以在眾
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（二）
結果波長優化用GeminiEM對DsRed進行波長掃描，以此舉例如何進行波長優化。為了檢測最大激發波長，我們首先固定發射波長為600nm，然后對發射波長進行掃描。掃描結果顯示最大激發波長為556nm(圖1)。同樣為了檢測最大發射波長，我們固定激發波長為535nm，然后掃描發射波長，從而得到584nm
化學所在活細胞分子探針研究中取得系列進展
分子識別是生命過程的基礎，揭示生物活性分子間識別作用是透徹理解生命過程的重要途徑。發展新型識別分子、構筑分子探針，在分子水平上探索生命過程和疾病發生發展機制是現代生化分析領域前沿研究方向之一。 中國科學院化學研究所活體分析化學院重點實驗室上官棣華課題組科研人員長期致力于分子探針的開發和分子識別
細胞骨架的熒光探針標記方法
細胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微絲(microfilament, MF)，中間絲(intermediate filament, IF三種類型。它們分別由不同的蛋白單體組裝而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌動蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是細胞骨架的重要組
ros熒光探針檢測結果怎么看
活性氧檢測試劑盒（Reactive oxygen species assay kit）是一種利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內后，可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內。細
LSCM常用的檢測內容及其熒光探針
胞內游離鈣 共聚焦激光掃描顯微鏡常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前兩者為單波長激光探針，利用其單波長激發特點可直接測量細胞內Ca2+動態變化，為鈣定性探針；后兩者為雙波長激發探針，利用其雙波長激發特點和比率技術，能定量細胞內i，為鈣定量探針。定量細胞內[Ca2+]i
《Nature－Chemistry》新化學探針，高通量實時關注活細胞動態
“回顧歷史，過去40到50年，抗生素的發現幾乎是停滯的，沒有人真正發現過某種全新的抗生素，”領導這項研究的化學家Michael VanNieuwenhze說。“全球抗生素耐藥問題一刻不停地威脅著公共衛生，我們認為解決這一問題的新方法，包括我們研發的方法，具有重大價值。”Michael VanNi