有機沉淀法總蛋白提取
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質，而且是具有潛力的新一代營養保健食品，因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要，讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 一、實驗目的 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法，了解其意義及其應用價值。 二、實驗原理 植物葉蛋白或稱綠色蛋白濃縮物(leaf protein concentration，簡稱LPC)，是從新鮮植物葉片中提取的高質量濃縮蛋白質，不僅是畜禽生長發育和生產畜產品的主要營養物質，而且目前也正成為人類的保健營養理想食品之一。天然蛋白存在于為數甚多的植物體內，對其分離應依據人們的利用目的及提取蛋白含量和品質加以考慮。 天然蛋白質一般在溶液中呈穩定的親水膠體狀態，故LPC 亦稱葉蛋白膠。其特點是： (1)水化作用 即蛋白質分子表面附有能有效防止蛋白質分子沉淀析出的水化膜; (2)電荷排斥作用 水化膜外還有電荷層(具陰、陽......閱讀全文
有機沉淀法總蛋白提取
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質，而且是具有潛力的新一代營養保健食品，因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要，讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 一、實驗目的 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法，了解其意義及其應用價值。 二、實驗原理 植
有機沉淀法總蛋白提取實用小教程
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質，而且是具有潛力的新一代營養保健食品，因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要，讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 ? 一、實驗目的 ? 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法，了解其意義及其應用價值。 ? 二
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗——有機溶劑沉淀法
實驗方法原理將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑的濃度按體
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
有機溶劑沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑
蛋白質沉淀方法有機溶劑沉淀法介紹
多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化 有機溶劑的沉淀機理是降低水的介電常數，導致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最后析出。 該法優點在于： 1）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉淀； 2）沉淀不用脫鹽，過濾較為容易； 3）在生化制備中應
有機溶劑沉淀法的影響因素
(一)有機溶劑的選擇 在實際生產中，常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小，沉淀能力強；而乙醇無毒，廣泛應用于藥品生產中。 (二)溫度的控制 有機溶劑沉淀時，溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同，采用的溫度不同，為防止生物大分子在較高溫度時發生變性，一般要求在低溫下進行
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮（或其他有機溶劑如乙醇或甲醇）儀器、耗材Eppendorf 管（小塑料離心管）Eppendorf 管離心機（小型臺式離心機）混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 樣品溶液，混勻。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型臺式離
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min （或在冷凍
如何提取總蛋白？
大家目前最常用的方法是利用溶液法進行蛋白提取（如 RIPA 裂解液），但是往往會在蛋白質提取中產生兩個不同的組分，即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性組分。通常 RIPA 不可溶性組分被我們直接丟棄忽略。但是已經有文章證實許多蛋白質存在于被丟棄的 RIPA 不可溶性組分中。也就是說
表達蛋白檢測實驗_免疫沉淀法
實驗方法原理使用強大的晚期基因啟動子表達的重組蛋白可以用放射性氨基酸標記，再用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測。當使用早期或晚期基因啟動子時，利用標記蛋白免疫沉淀能提高靈敏性和特異性。試劑、試劑盒磷酸緩沖液（PBS）細胞裂解液[35S]蛋氨酸或[35S]半胱氨酸儀器、耗材完全 MEM-5 培養基（含和不含蛋氨
蛋白沉淀法的優缺點分析
優點: 操作簡單，無需特殊裝置缺點:1.非特異性的沉淀反應可能使微量的分析物隨著基質蛋白質共同沉淀而損失。2.凈化效果較弱，檢測靈敏度和可靠性低。
有機物中總氮的測定
在此有機物中N是怎么存在的呢？酰胺或氨基機構的直接用凱式定氮，偶氮或肼需先加Zn粉還原后再消解，雜環氮需先用氫碘酸或紅磷還原后再消解，對于含碳量較高的（大于百分之10）的在消解液中加入少量多碳化合物。
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
免疫沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋白質
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 實驗材料?含蛋白質的樣品試劑、試劑盒?100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟 1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
三氯醋酸沉淀法 丙酮沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 含蛋白質的樣品
腦脊液總蛋白測定實驗
實驗方法原理磺基水楊酸為生物堿試劑，能沉淀蛋白質，但對白Pr的沉淀能力比球Pr強，加入Na2SO4后，同樣濃度的ALB和球Pr呈濁，趨于一致，與標準Pr濃度對比定量測定．試劑、試劑盒磺基水楊酸－硫酸鈉試劑Pr標準液實驗步驟1. 取4支試管，分別標明標本管，標本空白管標準管，試劑空白管，向標本管和標本
腦脊液總蛋白測定實驗
實驗方法原理 磺基水楊酸為生物堿試劑，能沉淀蛋白質，但對白Pr的沉淀能力比球Pr強，加入Na2SO4后，同樣濃度的ALB和球Pr呈濁，趨于一致，與標準Pr濃度對比定量測定．試劑、試劑盒 磺基水楊酸－硫酸鈉試劑Pr標準液實驗步驟 1. 取4支試管，分別標明標本管，標本空白管標準管，試劑空白管，向標本管
血清總蛋白測定原理
1.雙縮脲法 蛋白質中的肽鍵在堿性溶液中能與銅離子作用產生紫紅色絡合物。此反應和兩個尿素分子縮合后生成的雙縮脲在堿性溶液中與銅離子作用形成的紫紅色的反應相似，故稱之為雙縮脲反應。這種顏色反應強度在一定濃度范圍內與蛋白質含量成正比，與同樣處理的蛋白質標準液比較，即可求得蛋白質含量。 2.微量凱氏定
血清總蛋白測定方法
凱氏定氮法：是血漿總蛋白測定的參考方法。雙縮脲比色法：是推薦方法，用于常規檢測。原理：蛋白質分子中的肽鍵在堿性條件下與Cu2+作用生成紫紅色絡合物，顏色深淺在一定范圍內與蛋白含量成正比。經與同樣處理的蛋白標準液比較，即可求得蛋白質含量。優點是清、球蛋白的反應性相近，操作簡單，重復性好，干擾物質少，（
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
血清總蛋白測定原理
1.雙縮脲法蛋白質中的肽鍵在堿性溶液中能與銅離子作用產生紫紅色絡合物。此反應和兩個尿素分子縮合后生成的雙縮脲在堿性溶液中與銅離子作用形成的紫紅色的反應相似，故稱之為雙縮脲反應。這種顏色反應強度在一定濃度范圍內與蛋白質含量成正比，醫學教育網搜|集整理經與同樣處理的蛋白質標準液比較，即可求得蛋白質含量。
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織?目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗——硫酸銨沉淀法
實驗方法原理當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、溶
怎樣檢測土壤中總氮和有機碳
土壤樣品樣品從Lodi附近的PoValley的一個長期試驗田中收集，pH為6.2的砂質土壤。比較了5種不同的輪作方式，分別代表了不同的作物強化程度的飼用作物體系：（1）1年連續的雙作物輪作，意大利黑麥草（loliummultiflorumLam.） 青貯玉米（zeamaysL.）；（2）3年輪作，意
有機物對總氮測定的影響
當水樣渾濁時,水樣消解不完全,有機物對總氮的測定造成了干擾;當水樣中的氮以氨氮為主要存在形式時,在消解過程中部分氨氮轉化成氨氣逸散造成的損失,使得總氮的測定值偏低。文章通過實驗表明,可以對渾濁水樣進行過濾以及對氨氮含量高的水樣進行稀釋來解決總氮測定值偏低的問題。
有機物對總氮測定的影響
當水樣渾濁時,水樣消解不完全,有機物對總氮的測定造成了干擾;當水樣中的氮以氨氮為主要存在形式時,在消解過程中部分氨氮轉化成氨氣逸散造成的損失,使得總氮的測定值偏低。文章通過實驗表明,可以對渾濁水樣進行過濾以及對氨氮含量高的水樣進行稀釋來解決總氮測定值偏低的問題。