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生物分子下游純化的對象一般包括蛋白、酶、重組蛋白、單抗、抗體及抗原、肽類、病毒、核酸等。純化前首先需要測定生物分子的各物理和化學特性，然后通過實驗選擇出最有效的純化流程。測定------分子量、PI 當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時，可用PAGE電泳方法或層析方法加以測定。分離范圍廣闊的Superose HR預裝柱很適合測定未知蛋白的分子量。用少量離子交換介質在多個含不同PH緩沖液的試管中，可簡易地測出PI，并選擇純化用緩沖液的最佳PH。 2.選擇------層析方法 若對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解，可嘗試幾種不同的純化方法：一] 使用最通用的凝膠過濾方法，選擇分離范圍廣闊的介質如Superose、Sephacryl HR依據分子量將 樣品分成不同組份。二] 用含專一配體或抗體的親和層析介質結合目標蛋白。亦可用各種活化偶聯介質......閱讀全文
柱床體積Vt可以通過加入一定量的水至層析柱預定標記處，然后測量水的體積來測定。外水體積Vo可以通過測定完全排阻的大分子物質的洗脫體積來測定，一般常用藍色葡聚糖-2000作為測定外水體積的物質。因為它的分子量大（為200萬），在各種型號的凝膠中都被排阻，并且它呈藍色，易于觀察和檢測。&n
聚丙烯酰胺凝膠電泳儀（PAGE）是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術，于1959年建立，1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高，目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理：
儀器、耗材DBMS實驗步驟3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時，每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶（由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶，首先要創建一個新的項目。一旦建立，該項目就屬于這個用戶，這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度，盡量不要用手動輸入操作
實驗步驟：3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時，每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶（由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶，首先要創建一個新的項目。一旦建立，該項目就屬于這個用戶，這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度，盡量不要用手動輸入操作。因此，
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測，對于不同的目的，應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性，所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
對于復雜混合物，如全細胞裂解物或富集的亞細胞組分，通過兩步正交的分離 (orthogonalseperation)，二維凝膠 (2D 膠）電泳可以很好地分離成幾百個至上千個單個蛋白質。第一次分離基于電荷，即使用變性等電聚焦電泳; 第二次分離基于表觀分子質量，即使用變性十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電
等電聚焦和二維凝膠電泳實驗 試劑、試劑盒 樣品緩沖液
聚丙烯酰胺凝膠電泳儀（PAGE）是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術，于1959年建立，1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高，目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理： &n
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
凝膠色譜法凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術，由于設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規模地用于工業生產。一、基本理論
凝膠層析法(gel chromatography)也稱分子篩層析法，是指混合物隨流動相經過凝膠層析柱時，其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術。該法設備簡單、操作方便、重復性好、樣品回收率高，除常用于分離純化蛋白質、核酸、多糖、激素等物質外，還可用于測定蛋白質的相對分子質量，以及樣品的脫鹽和濃
凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術，由于設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規模地用于工業生產。 &n
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
背景知識：凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術，由于設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規模地用于工業生產。一、基本理論（一）分
(一)分子篩效益 一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時，各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動：垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質由于直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布顆粒之間，所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆
一、基本理論 (一)分子篩效益 一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時，各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動：垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質由于直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布顆粒之間，所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可
一、基本理論 (一)分子篩效益 一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時，各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動：垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質由于直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布顆粒之間，所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙
實驗概要蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心. 雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1000個E.coli蛋白，并表明蛋白質譜不是穩定的，而是隨環境而變化. 雙向電泳原理簡明，第一向進行等電聚焦，蛋白質沿pH梯度分離，至各自的等電點；隨后，再
2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n 2+ 反染法相同），且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮）的激發光
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗 梯度膠凝膠電泳 SDS-尿素膠凝膠電泳 實驗方法原理
本實驗介紹關于放射自顯影和從測序凝膠上讀取 DNA 序列的過程。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。實驗步驟材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的配方見附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。凝膠固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋
實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的配方見附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。凝膠固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性混合物放射性墨水或化學發光標記物參見附錄 9。可重復使用的放射性墨水主要是選擇 Stratagene 的冷光標記物（Glosos)。標記物能被多
實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的配方見附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。凝膠固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性混合物放射性墨水或化學發光標記物參見附錄 9。可重復使用的放射性墨水主要是選擇 Strat
做過胃腸鏡和插過導尿管的人都會知道，硬塑料橡膠在人體柔軟組織中拖動摩擦所帶來的痛苦。而且，導尿管等醫療器械表面容易粘附細菌、生長異物。這些問題困擾著全球幾千萬人。水凝膠柔軟多水，表面光滑抗菌，是和人體接觸的最好界面。可是怎么讓各種醫療儀器，例如導尿管、內窺鏡等附上一層足夠厚又耐用的水凝膠涂層？該
儀器、耗材開放源代碼軟件實驗步驟3.1 實驗設計1. 平行設計不同凝膠之間部分蛋白質點的量變是不可控的。重復樣品之間或從蛋白質樣品制備到二維凝膠染色的任何步驟的生物學差異，都是這些不可控變化的原因。已經表明，批次效應（即不同系列同時運行電泳和染色的二維凝膠的變化）對二維電泳的結果影響很大，因此在實驗
實驗方法原理SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法主要依據蛋白質的分子量對其進行分離。SDS 與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其穩定地存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS 蛋白質復合物的長度與其分子量成正比
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實驗方法原理 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法主要依據蛋白質的分子量對其進行分離。SDS 與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其穩定地存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS 蛋白質復合物的長度與其分
背景介紹 水凝膠微球，也稱為微凝膠，是一種可以被水溶脹的納米材料，是由交聯的親水或兩親性聚合物組成。與固體微球相比，這種微球有良好的生物相容性，pH值和溫度響應性的特點，而且柔軟性和穩定性出色，在高性能催化、生物分子、給藥系統和組織工程學等領域有潛在應用。 研究者通過設計不同的納米復合結構，
四、聚丙烯酰胺凝膠性能指標：1、性能指標：聚丙烯酰胺凝膠性能指標有凝膠總濃度和交聯度等。（1）凝膠總濃度（T）：凝膠總濃度表示凝膠溶液中單體和交聯劑的總百分含量。 T = [（a + b）/m]×100%式中：a為單