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    常用試劑的性質與制備純化(四)

    21.鉀在處理鉀時必須非常小心,要在裝有石油醚的研缽中切金屬鉀,不要用易碎的燒杯或培養皿。切開外面的氧化層,然后用鑷子將碎屑放入另一裝有石油醚的研缽中。用鑷子將剛切的鉀夾到濾紙上,快速吸干,然后加到已知質量的裝有石油醚的燒杯中,稱量。將稱量后的鉀加到反應物中。鉀碎屑不應久置,應立即分解掉,可將裝有鉀碎屑的研缽轉移到通風櫥內,用移液管分批加入少量叔丁醇(不能用甲醇或乙醇),控制滴加速度使反應不是很劇烈。準備一個防熱擋板,如果溶液著火,可用擋板蓋住熄滅。粘在刀上和研缽中的鉀屑也要在通風櫥中用叔丁醇小心處理。 22.甲醛商品福爾馬林是含37~40% 甲醛的水溶液(每毫升含甲醛0.37~0.40 g),加入12%的甲醇作穩定劑。當需要干燥的氣態甲醛時,可通過180~200℃多聚甲醛的解聚得到。23.金屬氫化物金屬氫化物應用廣泛,處理簡單,常被選作很多有機官能團的還原劑。下面幾種金屬氫化物的氘代物可以通過商業途徑得到,它們能在有機化合物的......閱讀全文

    常用試劑的性質與制備純化

    常用試劑的性質與制備純化有機化學實驗經常用到大量的試劑,包括無機試劑和有機試劑,市售的試劑有分析純(A.R)、化學純(C.P)、工業級(T.P)等級別,其中分析純的純度較高,工業級則帶有較多的雜質。在某些有機反應中,對試劑或溶劑的要求較高,即使微量的雜質或水分的存在,也會對反應的速率、產率和產品純度

    常見有機溶劑的純化方法總結

      在實驗室里是不是常碰到這種情況:做某個實驗,用不同品牌甚至同一品牌不同批次的試劑,能做出完全不同的結果,然后買了純度更高的試劑回來做,結果就是正常的了……  化學供應商提供的常用試劑僅可滿足一般化學反應的需要。為了確保一些有機合成反應的順利進行,常常要對試劑進行進一步的純化處理。常用的溶劑處理方

    分子生物學常用實驗技術(page 1)

    第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分

    我國目前針對實驗室化學試劑純度的分級

      目前,我國的化學試劑己廣泛應用于工業、農業、醫療衛生、生命科學、生物技術、環境保護、能源開發等科研領域和國民經濟發展的各個行業,其化學試劑按純度分為以下幾個等級:優級純(GR,標簽顏色為深綠色)、分析純(AR,標簽顏色為紅色)、化學純(CP,標簽顏色為藍色)和四級試劑(實驗或工業試劑)通常用L.

    核酸分離與純化的設計與原則

    細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA又有染色體DNA

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些

    直接點樣的芯片制備技術

        直接點樣法最早由Stanford大學Brown實驗室發展而來,是將微量的寡聚核苷酸片段、cDNA或蛋白質等通過特定的高速點樣機器人直接排列到玻片等介質上,生物大分子探針通過共價鍵或離子鍵與特殊處理的玻片相連,從而制備成芯片。直接點樣法主要包括3個重要的環節:探針

    蛋白質組學的樣品制備

    想要研究蛋白質,首先要得到高度純化且具有生物活性的目的物質,因此,蛋白樣品的制備是重要前提。蛋白提取的質量和效果對后續的研究分析有重要影響。不同種類的樣本在制備過程中,存在一些差異,要根據樣本特征調整實驗方案和操作細節。基本原則樣品處理盡量簡單,減少蛋白損失;盡量避免蛋白的降解;盡可能提高樣品蛋白的

    免疫酶細胞化學實驗技術-3

    一、對照實驗  1.吸收實驗  應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳

    放射性碘標記

    在RIA中,標記抗原質量的優劣,直接影響測定結果,必須制備比放射性強、純度高的標記抗原,并保持免疫活性不受喪失。  一、同位素的選擇  同位素有穩定性和放射性兩種。放射性同位素可利用其衰變時放出的放射線進行測量,這種測量較靈敏而方便,故多用放射性同位素。標記抗原,常用的放射性同位素有3H、14C、1

    蛋白質與多肽激素的放射免疫分析-2

    (二)乳過氧化物酶法(LPO)  本法反應溫和,對抗原、抗體免疫活性影響小,已被廣泛應用。缺點是標記率較低,一般為20~40%。  1.原理此法是利用乳過氧化物酶(Lactoperoxidase)有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用,生成125I+,并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。  2.方法

    基于微流控芯片的固相萃取技術簡介

    目前,國內外針對微流控芯片上樣品的前處理的方法和技術研究越來越多,最主要的技術有過濾、膜分離、液-液萃取、固相萃取、等速電泳和場放大堆積等。這些方法各有特色和優勢,有的兼具樣品提取和富集的功能。特別是固相萃取技術,其富集倍數甚至可達10^5,超過某些專門的樣品富集技術。與其他前處理方法相比,固相萃取

    免疫酶細胞化學實驗技術

    免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色

    生物大分子樣品的保存

    生物大分子制成品的正確保存極為重要,一旦保存不當,辛辛苦苦制成的樣品失活、變性、變質,使前面的全部制備工作化為烏有,損失慘重,全功盡棄。影響生物大分子樣品保存的主要因素有:⑴空氣:空氣的影響主要是潮解、微生物污染和自動氧化。空氣中微生物的污染可使樣品腐敗變質,樣品吸濕后會引起潮解變性,同時也為微生物

    ELISA實驗所用試劑詳解

    在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制

    蛋白質特性與分離純化技術的選擇

    摘要:蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質,綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異,利用一種同時多種性質差異,在兼顧收率和純度的情況下,選擇蛋白質提純的方法。關鍵詞:蛋白質 分離純化前言    蛋白

    蛋白質特性與分離純化技術的選擇

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    檢測實驗室的實驗用水知識大全

      水的基本性質  ?1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于極性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結合,互相吸引并保持一定的距離。而1個水分子可以同時與4個水分子結合,形成晶體般的整齊結構。  ?水分子聚合體中,由于氫鍵

    實驗室用水知識總結

      今天和大家分享的產品知識是關于實驗室用水的,希望如下內容對大家有所幫助。   1.水的基本性質   1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于極性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結合,互相吸引并保持一

    多肽純化十問十答

      1. 多肽含量與多肽純度有什么區別?   一條多肽產品中除了多肽本身還包括生產過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質,多肽純度僅指多肽本身所含肽產品的含量及雜質的含量,不包括水份等雜質;而多肽含量則是指目標多肽在產品中的凈含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測;因此一條多肽即使純

    關于多肽純化的問題解答

      1. 多肽含量與多肽純度有什么區別?   一條多肽產品中除了多肽本身還包括生產過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質,多肽純度僅指多肽本身所含肽產品的含量及雜質的含量,不包括水份等雜質;而多肽含量則是指目標多肽在產品中的凈含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測;因此一條多肽即使純

    親和層析實驗:常規方法

    實驗步驟一、親和介質的選擇親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標,既保證較弱的非特異性吸附,又可以在整個過程中維持良好的流動特征。優選介質應具備便宜、易獲取和使用簡便的特點。

    核酸分離與純化的設計與原則(二)

    (四)核酸的濃縮、沉淀與洗滌隨著核酸提取試劑的逐步加入,以及去除污染物過程中核酸分子不可避免的丟失,樣品中核酸的濃度會逐漸下降,及至影響到后面的實驗操作或不能滿足后繼研究與應用的需要時,需要對核酸進行濃縮。沉淀是核酸濃縮最常用的方法,其優點在于核酸沉淀后,可以很容易地改變溶解緩沖液和調整核酸溶液至所

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    酶標記抗體

    酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否,因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中最常用的是酶標記抗體,它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質量的酶(

    重結晶的原理和經典問題案例

    在有機合成實驗和藥物生產的過程中,我們最常用的純化方式當屬重結晶了,所以如何進行正確的重結晶操作很重要,但了解重結晶原理和與之相關案例同樣不容忽視。重結晶(recrystallization)是將晶體溶于溶劑或熔融以后,又重新從溶液或熔體中結晶的過程。重結晶可以使不純凈的物質獲得純化,或使混合在一起

    ELISA的試劑-2

    3.1.3  包被用抗原   用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養物等,須經提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細菌和病毒抗原可以從其培養物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中

    如何提高轉染實驗的效率

    在本章節我們解釋了轉染體系的關鍵組分對細胞轉染  實驗的效率有何影響,并且合理的給予您一些關于如何使它們更有利于您研究方面的提示。 【組織培養試劑】 一般提示:優化您的細胞生長條件。只使用新鮮配制的培養基和添加劑,并經可能減少所用試劑的變更。 基礎培養基—目前所使用的各

    ELISA中的試劑(2)-結合物

    3.2  結合物 結合物即酶標記的抗體(或抗原),是ELISA中最關鍵的試劑。良好的結合物應該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當的分子比例,在結合試劑中應盡量不含有或少含有游離的(未結合的)酶或游離的抗體(或抗原)。此外,結合物尚要

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