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    蛋白質磷酸化研究的相關方法節選

    對于信號轉導科研來說,抗酪氨酸磷酸化抗體的出現是一個意義重大的事件。在沒有抗酪氨酸磷酸化抗體之前,蛋白質和酶的酪氨酸磷酸化只能通過非常危險的并且很費時的放射性實驗來檢測。而利用抗酪氨酸磷酸化抗體,則可以通過Western Blot或其它免疫學方法輕松地檢測到磷酸化信號。常規的檢測方法包括:用抗酪氨酸磷酸化抗體在Western Blot上檢測內源或外源表達的磷酸化蛋白。如果目標蛋白的含量較低,也可利用免疫沉淀的方法先富集發生磷酸化的酪氨酸蛋白,再檢測目標蛋白的水平。抗酪氨酸磷酸化抗體也常用于檢測在不同處理的條件下,細胞內總的酪氨酸磷酸化水平的變化情況,作為許多細胞生物現象的一個重要指標。我們都知道如果需要檢測某一個目標蛋白的某一特定位點的磷酸化狀態,可以選用該蛋白特定位點的磷酸化特異性抗體。但由于我們研究的通常是新的磷酸化位點,或者這些蛋白特定位點的磷酸化抗體效果不夠好,我們不得不自己制備磷酸化抗體。如果大家自己制備過磷酸......閱讀全文

    張麗華發文:N-磷酸化修飾蛋白質的富集和鑒定方法

      摘要  蛋白質磷酸化修飾在細胞的信號轉導、代謝、發育等生命過程中發揮著重要作用。除了研究較為透徹的發生在絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸側鏈羥基的O-磷酸化修飾之外,近年來,發生在組氨酸、精氨酸和賴氨酸側鏈氨基的N-磷酸化修飾受到了越來越廣泛的關注。然而,由于N-磷酸化修飾具有獨特的P-N鍵結構,導致其化

    磷酸化位點分析實驗-磷酸肽的分離

                實驗方法原理 磷酸化分析的原理研究的最常見的磷酸化類型是絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知發生的磷酸化還有精氨酸、組氨酸和賴氨酸的亞酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。這些修飾中

    磷酸化位點分析實驗-磷酸肽的分離

    實驗方法原理磷酸化分析的原理研究的最常見的磷酸化類型是絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知發生的磷酸化還有精氨酸、組氨酸和賴氨酸的亞酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。這些修飾中的其中一些是化學不穩定的,通常觀察不到,除非采取特殊的保護措施防止他們在蛋內質分離過程中消失。舉例來說,組氨酸磷酸化是一

    水生所四膜蟲蛋白質磷酸化修飾特征等研究獲進展

      11月7日,國際蛋白質組學領域刊物Molecular & Cellular Proteomics在線發表了題為Phosphoproteomic analysis of protein phosphorylation networks in Tetrahymena thermophil

    磷酸化蛋白 WB 做不好?文獻指出了你可能忽略的原因

    WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法,然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做!這是因為處于不同的細胞生長狀況和 / 或特定的細胞周期時,磷酸化蛋白可能僅占細胞總蛋白中的一小部分,處理不得當時,還會快速的去磷酸化。磷酸化蛋白質 WB 做不好的原因有許多,比如封閉問題,抗體問題,或所需的磷酸化

    2010年全國有機質譜學術會議盛大開幕

    威斯康星-麥迪遜(Wisconsin-Madison)大學 李靈軍教授   來自威斯康星-麥迪遜(Wisconsin-Madison)大學的李靈軍教授帶來了報告“Mass Spectrometry-Based Quantitative Proteomic Investigation of

    2011年北京質譜年會隆重召開

      2012年3月30-31日,北京理化分析測試技術學會北京質譜學會舉辦的“2011年度北京質譜年會”在北京外研社國際會議中心隆重召開。來自科研院所、檢測機構、儀器廠商等五百余位質譜界專家學者、實驗室人員、技術工程師等參加了本次年會,共同探討了質譜技

    Cell重要成果:繪制凋亡蛋白質組圖譜

      斯克里普斯研究所的科學家們同時繪制出了細胞中兩種最重要的蛋白質修飾類型的圖譜,揭示了在凋亡這一重要細胞過程中它們之間廣泛的協同作用。相關論文發表在7月20日的《細胞》(Cell)雜志上。   磷酸化(Phosphorylation)和蛋白質水解(proteolysis)幾乎總是被獨立開展研究。

    2010年全國有機質譜學術會議盛大開幕

    大會報告 廈門大學化學化工學院化學系、清華大學生命有機磷化學及化學生物學教育部重點實驗室 趙玉芬院士   來自廈門大學化學化工學院化學系、清華大學生命有機磷化學及化學生物學教育部重點實驗室的趙玉芬院士帶來了報告“穩定同位素質譜技術在結構及反應機理上的應用”。趙院士在報告中介紹了用質譜技術

    大化所等在蛋白質磷酸化規模化分析研究中獲新進展

      近日,中科院大連化學物理研究所研究員鄒漢法帶領的研究團隊(1809組)與華中科技大學教授薛宇和第二軍醫大學王紅陽院士合作,在人類肝臟蛋白質磷酸化的規模化分離鑒定研究方面取得新進展,相關研究成果發表在蛋白質組學領域著名刊物上 (Mol. Cell. Proteomics,2012,

    磷酸化多肽及其修飾方法

    蛋白質磷酸化是生物界最普遍,也是最重要的一種蛋白質翻譯后修飾,20世紀50年代以來一直被生物學家看作是一種動態的生物調節過程。在細胞中,大概有1/3的的蛋白質被認為是通過磷酸化修飾的。蛋白質的磷酸化修飾與多種生物學過程密切相關,如DNA損傷修復、轉錄調節、信號傳導、細胞凋亡的調節等。磷酸化蛋白質及多

    Cell:CRISPR揭示驚人發現,百種蛋白都聽命于誰?

      我們身體內的每一個細胞都懂得利用磷酸化作用——通過添加磷酸基團這一化學標記來控制蛋白質的功能和命運。盡管人們已充分了解了在細胞內起作用的大多數蛋白質的磷酸化過程,一些細胞外蛋白質的磷酸化過程卻仍然是個謎。然而從傷口愈合到骨形成,人類的健康和疾病很大程度上卻依賴于在細胞外起作用的蛋白。  現在來自

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      我們身體內的每一個細胞都懂得利用磷酸化作用——通過添加磷酸基團這一化學標記來控制蛋白質的功能和命運。盡管人們已充分了解了在細胞內起作用的大多數蛋白質的磷酸化過程,一些細胞外蛋白質的磷酸化過程卻仍然是個謎。然而從傷口愈合到骨形成,人類的健康和疾病很大程度上卻依賴于在細胞外起作用的蛋白。  現在來自

    生物質譜技術在蛋白質組學中的應用

      一、 前言[1,2]   基因工程已令人難以置信的擴展了我們關于有機體DNA序列的認識。但是仍有許多新識別的基因的功能還不知道,也不知道基因產物是如何相互作用從而產生活的有機體的。功能基因組試圖通過大規模實驗方法來回答這些問題。但由于僅從DNA序列尚不能回答某基因的表達時間、表達量

    第十屆全國生物醫藥色譜技術學術交流會大會報告(一)

      2014年4月20日上午,第十屆全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會大會報告在威海盛大召開。在此次的全國生物醫藥色譜大會報告中邀請了中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎院士;國家自然科學基金委員會、北京大學化學學院的莊乾坤教授;復旦大學的楊芃原教授;中國科

    Western Blot蛋白質磷酸化操作小貼士

    WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法,然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做!WB 磷酸化蛋白曝不出條帶的時候,會特別沮喪。在此給大家列出幾點小建議,希望能幫助您改善一下實驗結果。1、樣本是否表達:查閱資料或通過預實驗確定。2、對照設置:陽性和陰性對照。總蛋白抗體對照,對于特定時間的特定樣

    張玉奎院士:復雜樣品的高效分離與表征

      2014年4月20日上午,第十屆全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會大會報告在威海盛大召開。中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎院士作為本次大會的嘉賓,帶來了題為《復雜樣品的高效分離與表征》的報告。 中國科學院大連化學物理研究所 張玉奎院士   張玉奎院士首先介紹了蛋白質組學的研究

    大連化物所等磷酸化蛋白質組分析方法研究取得新進展

      近日,中國科學院大連化學物理研究所生物分離分析新材料與新技術研究組(1809組)鄒漢法、葉明亮等在磷酸化蛋白質組分析新方法研究方面取得新進展。該團隊與加拿大西安大略大學教授李順成研究團隊利用生物分子之間的特異性識別作用建立了一種非抗體的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,顯著提高了酪氨酸磷酸化蛋白質組的

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗             實驗步驟

    專家點評Cell肺腺癌的帽子戲法 多組學整合精準醫學來臨

      肺癌是我國也是世界上發病率和死亡率最高的惡性腫瘤【1】,五年存活率不足20%【2】。肺腺癌(Lung Adenocarcinoma, LUAD)是非小細胞肺癌中最普遍存在的分型,大約占所有惡性肺腫瘤的一半【3】。LUAD最普遍的風險因素是吸煙,其他的風險還包括暴露在致癌物以及戶外空氣污染等等【4

    大化所磷酸化蛋白質組分析方法研究取得新進展

      近日,我所生物分離分析新材料與新技術研究組(1809組)鄒漢法、葉明亮等在磷酸化蛋白質組分析新方法研究方面取得新進展。該團隊與加拿大西安大略大學李順成教授研究團隊利用生物分子之間的特異性識別作用建立了一種非抗體的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,顯著提高了酪氨酸磷酸化蛋白質組的分析覆蓋率和靈敏度,相關

    最新精準醫療蛋白質組里程碑事件的思考與研究成果 一

    無論是關注蛋白質組學的領域內專業人員,還是領域外、甚至是學術圈外的,我想很多人此刻都難掩興奮。2019年2月28日,軍事科學院軍事醫學研究院、國家蛋白質科學中心(北京)、蛋白質組學國家重點實驗室賀福初院士團隊、錢小紅教授團隊,與復旦大學附屬中山醫院樊嘉院士團隊,在國際頂級學術期刊《Nature》上以

    國內外蛋白質組學大腕云集 聚焦生物質譜前沿技術

      2014年7月3日,全國生物質譜學術報告會--生物質譜前沿技術邀請報告會在上海復旦大學隆重召開。此次活動旨在積極促進我國生物質譜技術的發展和應用,加強國內外相關研究領域的專家學者之間的交流與合作,特邀瑞士蘇黎世聯邦技術學院分子系統生物學

    賽默飛世爾科技“蛋白質組學解決方案”網絡視頻講座

      3月30日下午,賽默飛世爾科技蛋白質組學市場專員唐佳向大家作了題為《蛋白質組學研究方法和Thermo蛋白質組學解決方案》的報告

    2018中國質譜大會生命科學與醫學集錦

      分析測試百科網訊 2018年11月24日-26日,2018年中國質譜學術大會在廣州東方賓館盛大召開。本次大會包括一個報告主論壇,21個主題分論壇,共300余場演講報告。在“生命科學與醫學”分論壇上,數十位業內專家學者帶來精彩的演講報告,吸引參會人員駐足聆聽。分析測試百科網作為本次活動的合作媒體,

    揭示糖尿病新機制還得從這類修飾入手(一)

    原文:Phosphoproteomics Reveals the GSK3-PDX1 Axis as a Key Pathogenic Signaling Node in Diabetic Islets原文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.cmet.2019.02.012不知

    Cell:繪制轉移性癌癥的互作網絡圖譜

       這一發表在8月4日《細胞》(Cell)雜志上的研究,是加州大學圣克魯斯分校和加州大學洛杉磯分校研究小組的合作成果。他們一開始從致命轉移前列腺癌患者尸體中獲得的臨床組織樣本入手,隨后完成了一系列復雜的分析以前所未有的細節確定了來自每位患者的癌細胞特征。對生成的數據集進行一種新穎的計算分析,繪制出

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗2

    二、用 于 鑒 定 P T M 的富 集 技 術2.1 磷酸化絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的可逆磷酸化也許是研究最為深人的 PT M 。蛋白質磷酸化信號網絡介導細胞對與不同的應激因子、生長因子、細胞因子以及細胞間相互作用作出響應。憐酸化還影響多種細胞進程,如增殖、凋亡 、遷移 、轉錄和蛋白質翻譯(W

    第十二屆全國分析化學年會大會報告集錦(一)

      2015年5月8日-11日,第十二屆全國分析化學年會在美麗的武漢洪山大禮堂舉辦,本次會議由中國化學會和國家自然科學基金委主辦、華中師范大學承辦,會議每三年一次,旨在交流與探討分析化學學科的新成就、新進展和新技術。本次會議吸引到分析化學領域的院士、專家、學者2000余人。  5

    蛋白基因組學助力挖掘結腸癌治療新思路

    2019年5月2日,Cell雜志報道了美國休斯敦貝勒醫學院研究人員利用基因、轉錄、蛋白及翻譯后修飾等多組學技術,對結腸癌/癌旁組織進行了系統、全面的分析,整合多組學結果為后續癌癥治療方案提供了新思路,同時也為生物標志物篩選、藥物靶點、分子分型等研究工作奠定理論基礎。實驗背景結腸癌是世界上死亡率排名第

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