WIKI資訊
單拷貝克隆產量低，高拷貝克隆穩定性差，一直讓研究者在克隆 表達時難以選擇。蛋白的表達就有誘導表達系統，可以實現人為地控制蛋白的表達時間和表達量——現在連質粒的拷貝數可以借助誘導的方法來人為控制了！Epicentre的專利技術——CopyControl克隆 系統能夠讓您共享單拷貝和高拷貝的優點。CopyControl克隆，首先以單拷貝形式生長——單拷貝可以確保插入穩定及成功克隆，編碼毒性基因序列—— 在需要的時候，再誘導成高拷貝克隆，以便下游應用所需。這一系統可以用來構建PCR克隆，對于BAC，fosmid文庫等大型質粒格外有用。一、CopyControl克隆系統有兩個重要的成分： （一）CopyControl pCC1 Vector. 這個載體含有兩個復制起始位點（如圖1）：單拷貝的大腸桿菌F-因子復制子，和誘導型的高拷貝oriV。 OriV的啟動，需要trfA基因產物，trfA基因既不在pCC......閱讀全文
在不久前上映的美國大片《遺落戰境》中，由湯姆·克魯斯飾演的克隆人在發現自己的身份后，奮起反抗外星人，最終獲得勝利。 緊接著，電影《侏羅紀公園》再次講述了科學家利用DNA技術復活恐龍卻遭遇瘋狂獵殺的故事。 兩部大片不僅給觀眾帶來了強烈的視覺沖擊，也再度激起了人們對克隆技術的濃厚興趣。
提到“克隆”，很多人的腦海中可能會浮現出這樣的景象：一群穿白大褂的科學家，在實驗室里擺弄著各種瓶瓶罐罐。 近日，全球最大的“克隆工廠”落戶天津，建成后，將擁有全球最大的動物克隆實驗室流水線、最高標準的克隆動物中心、生物多樣性基因資源庫以及科教展示中心。消息傳出，引起了國內外各界人士極
一、克隆的早期研討 克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁衍系。同一克隆內一切成員的遺傳構成是完整相同的，例外僅見于有突變發作時。自然界早已存在自然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實踐上就是一種克隆。但是，自然的哺乳動物克隆的發作率極低，成員數
一、克隆的早期研討 克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁衍系。同一克隆內一切成員的遺傳構成是完整相同的，例外僅見于有突變發作時。自然界早已存在自然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實踐上就是一種克隆。但是，自然的哺乳動物克隆的發作率極低，成員數
一、克隆的早期研究 克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的，例外僅見于有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而，天然的哺乳動物克隆
Gateway技術提供以下可能： 通過去除冗長的亞克隆步驟節省您的時間 同時將您的基因轉移到多個表達系統 在任何您選擇的系統――體外，細菌，酵母，昆蟲，或哺乳動物――分析表達一、一種更好的克隆方法Gateway技術能夠克隆一個或多個基因進入到任何蛋白表達系統（圖1）。這項強大的體
1997年2月，英國Roslin研究所伊恩?維爾穆特（Ian Wilmut）教授率領的團隊在頂級學術期刊《自然》（Science）公布了“多莉”羊的誕生。這只實際上出生于1996年5月的首例體細胞克隆哺乳動物自此成為動物界的“明星”，也徹底顛覆了人類對生殖發育經典理論的認識。 “多莉”誕生
定義概述克隆技術 [1]克隆是英文“clone”一詞的音譯，在臺灣與港澳一般意譯為復制或轉殖，是利用生物技術由無性生殖產生與原個體有完全相同基因組之后代的過程.科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫克隆，這門生物技術叫克隆技術，其本身的含義是無性繁殖，即由同一個
美國科學家新近取得的一種技術突破可幫助利用成年猴子克隆胚胎，預示著克隆人類胚胎終于有可能成為現實。這種新技術承諾將革命性地提高科學家把人類卵子轉化為克隆胚胎的效率，同時也引發新一輪關于克隆人倫理的討論。 據悉，被克隆的是一只10歲的雄性恒河猴。（華蓋圖） 基于新的卵子處理方法&nb
3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死，在無菌操作下取組織，放 在 4°C無血清培養基中，最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得
應用前景奇妙的克隆克隆技術已展示出廣闊的應用前景，概括起來大致有以下四個方面：（1）培育優良畜種和生產實驗動物；（2）生產轉基因動物；（3）生產人胚胎干細胞用于細胞和組織替代療法；（4）復制瀕危的動物物種，保存和傳播動物物種資源。以下就生產轉基因動物和胚胎干細胞作簡要說明。克隆山羊轉基因動物研究是動
基因的克隆就是利用體外重組技術，將特定的基因和其它DNA順序插入到載體分子中。基因克隆的主要目標是識別、分離特異基因并獲得基因的完整的全序列，確定染色體定位，闡明基因的生化功能，明確其對特定性狀的遺傳控制關系。通過幾十年的努力由于植物 發育，生理生化，分子遺傳等學科的迅速發展，使人們
基因的克隆就是利用體外重組 技術，將特定的基因和其它DNA順序插入到載體分子中。基因克隆的主要目標是識別、分離特異基因并獲得基因的完整的全序列，確定染色體定位，闡明基因的生化功能，明確其對特定性狀的遺傳控制關系。通過幾十年的努力由于植物發育，生理生化，分子遺傳等學科的迅速發展，使人們
把PCR產物克隆到載體上常見有3種做法：1.直接克隆到T載體（或者U載體上）2.引物設計時引入酶切位點，PCR產物酶切后直接克隆到目標載體上3.將平末端PCR產物直接克隆到平末端酶切載體上。 方法3主要是針對高保真的聚合酶比如Stratagene公司的Pfu酶，N
把PCR產物克隆到載體上常見有3種做法：1.直接克隆到T載體（或者U載體上）2.引物設計時引入酶切位點，PCR產物酶切后直接克隆到目標載體上3.將平末端PCR產物直接克隆到平末端酶切載體上。 方法3主要是針對高保真的聚合酶比如Stratagene公司的Pfu酶，N
把PCR產物克隆到載體上常見有3種做法： 1. 直接克隆到T載體（或者U載體上） 2. 引物設計時引入酶切位點，PCR產物酶切后直接克隆到目標載體上 3. 將平末端PCR產物直接克隆到平末端酶切載體上。 方法3主要是針對高保
技術來源“克隆”一詞于1903年被引入園藝學，以后逐漸應用于植物學、動物學和醫學等方面。廣泛意義上的“克隆”其實是我們的日常生活中經常遇到，只是沒叫它“克隆”而已。 在自然界，有不少植物具有先天的克隆本能，如番薯、馬鈴薯、玫瑰等的插枝繁殖的植物。而動物的克隆技術，則經歷了由胚胎細胞到體細胞的發展過程
基因克隆的常用方法 基因(gene)是遺傳物質的最基本單位,也是所有生命活動的基礎。不論要揭示某個基因的功能,還是要改變某個基因的功能,都必須首先將所要研究的基因克隆出來。特定基因的克隆是整個基因工程或分子生物學的起點。本文就基因克隆的幾種常用方法介紹如下。
實驗步驟由于原代的轉化子只能產生數目有限的濾膜，因而隨機鋪板不適合濾膜的制備以及 YAC、BAC 和 PAC 文庫的保存，而且由于克隆增殖率存在差別，因而無論是哪一種擴增形式都會將偏差帶人文庫中去。因此，原代的轉化子應加入微孔板中，放置于-8℃ 保存。這使得制造分配用的文庫拷貝變得簡單易行，而且使組
由于原代的轉化子只能產生數目有限的濾膜，因而隨機鋪板不適合濾膜的制備以及 YAC、BAC 和 PAC 文庫的保存，而且由于克隆增殖率存在差別，因而無論是哪一種擴增形式都會將偏差帶人文庫中去。因此，原代的轉化子應加入微孔板中，放置于-8℃ 保存。這使得制造分配用的文庫拷貝變得簡單易行，而且使組
距離第一個克隆生命——“多莉”羊誕生已有15年，克隆人一直是倫理學劃定的禁區，但與此同時，人們總能不斷聽到來自科學界的種種關于克隆人將會實現的聲音。近日，美國哈佛大學醫學院的遺傳學家喬治·丘奇表示，自己能夠利用克隆技術“復活”早在3.3萬年前就已滅絕的尼安德特人。面對人類克隆，你
在分子克隆過程中，篩選含有插入基因片段的重組質粒轉化子是一項必不可少的工作。一種稱為“藍白斑篩選”的顏色報告基因可以根據克隆顏色快速區分出重組和非重組的克隆。盡管藍白篩選提供了一個直觀的辨別重組克隆的方法，但是，在克隆挑取過程中，過多的人工操作過程存在主觀、速度慢、易出錯等問題。 Molecular
各位小伙伴，大家還記得當初進實驗室的時候接觸到的一個實驗技能是什么呢？沒錯，是 PCR 擴增。小編曾經也是，看著自己親自配比 PCR 克隆擴增的每個組分，親眼看著瓊脂糖凝膠在紫外透光臺上發出的幽綠色的熒光，也是深深被迷住。但總不可能成天就對著這個邪魅的熒光發呆，對吧？看久了，她會愛上你的眼
一、雜交通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交可在DNA與DNA、RNA與RNA或RNA與DNA的
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
一、概述 前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交
一、概述 前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交
酵母三雜交系統（yeast three-hybrid system）可用于分析蛋白質與 RNA 間的相互作用。在酵母三雜交系統中，RNA 蛋白質相互作用導致報道基因的轉錄，可以通過細胞生長、克隆顏色或特異的酶活性檢測蛋白質與 RNA 的相互作用。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方
類似方案 1、方案 2 描述了在真核表達載體上進行 cDNA 文庫構建與篩選的方法, 流程分為以下兩個階段：1. 在真核表達載體上構建 cDNA 文庫；2. 在真核表達載體上構建的 cDNA 文庫的篩選。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）上冊，作者：黃培堂。實驗材料宿主細胞質粒或λ噬菌體表達載體