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    細胞化學技術4

    6、基本實驗過程 用于大分子合成過程研究的放射自顯影技術: 同位素標記示蹤化合物→注入動物體內→ 取下器官或組織→切片→ 涂乳膠膜→自顯影→顯影和定影→染色→觀察 用于大分子定位研究的放射自顯影技術: 組織固定包埋→切片 ↓ 細胞化學反應→涂乳膠膜→自顯影→顯影和定影→染色→觀察 ↑ 同位素標記示蹤化合物 四、原位雜交技術 原位雜交技術(in situ hybridization)是以標記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術。這一技術不需要從組織細胞中提取核酸,對組織中含量極低的靶序列有很高的靈敏度,并可保持組織與細胞的結構完整,反映特異核酸分子的定位。特別是配合使用能定位特異蛋白分子的免疫細胞化學技術,就能對生理或病理條件下從DNA到mRNA到蛋白質這樣一個基因表達過程進行定性和定位的分析,是基因表達研......閱讀全文

    細胞化學技術-1

    細胞化學技術(cytochemistry)是在保持細胞結構完整的條件下,通過細胞化學反應研究細胞內各種成分(主要是生物大分子)的分布情況以及這些成分在細胞活動過程中的動態變化的技術,可以通俗地說,這類技術讓人們在顯微鏡下看到細胞內大分子的位置。這類技術包括光鏡和電鏡水平的酶細胞化學技術、免疫細胞化學

    內分泌腫瘤免疫細胞化學(2)

     (三)促甲狀腺激素瘤  甚為少見,約占1%,常發生于長期甲狀腺功能低下的病人,由于缺乏甲狀腺素,通過負反饋作用刺激其細胞增生。光鏡下常為嫌色性細胞腺瘤,胞漿含少量PAS陽性物質。電鏡下分泌顆粒稀疏。  (四)促腎上腺皮質激素腺瘤  此瘤能合成促腎上腺皮質激素(ACTH)和其它肽類如內啡肽等,可引起

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

    細胞化學技術-2

    二、 免疫細胞化學技術 免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗原抗體特異結合的特性定位組織和細胞中特異大分子的一類技術。它包括光鏡水平(簡稱免疫組化)和電鏡水平(簡稱免疫電鏡)的免疫細胞化學技術。應用免疫細胞化學技術可在原位檢測細胞的各種大分子,

    大道至簡 平淡為歸——記北大藥學院王夔院士

    在一切美好沒有來臨之前,心靈首先美好起來了;在一切平靜沒有來臨之前,心靈首先平靜下來了。經歷了三次政治和社會的大震蕩,三次改變研究方向的中國科學院院士王夔先生,對世事變遷和人生境遇始終淡然置之、不喜不悲,以哲人的睿智和科學家創新求變的精神探求世界的客觀規律和科學真理,走過了七十五年的生命歷程。王先生

    免疫細胞化學在神經科學中的應用

    免疫細胞化學的發展對許多領域的研究起到很大的推動作用,在神經科學的研究中尤為突出。本章 僅就免疫細胞化學在神經科學的基礎研究方面的應用做一簡要介紹。  一、確定神經遞質的性質、定性和分布  早期的神經科學工作者應用傳統的神經解剖學研究方法如甲基藍染色法、鍍銀染色法等對中樞及外周神經系統的結構做了大量

    病理學的研究方法

    病理學的研究方法多種多樣,研究材料主要來自患病人體(人體病理材料)和實驗動物以及其他實驗材料如組織培養、 細胞培養 等(實驗病理材料)。     (一)尸體剖檢     對死亡者的遺體進行病理剖檢

    免疫熒光細胞化學技術

    免疫熒光細胞化學技術免疫熒光細胞化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一,是由Coons等(1950)建立,經過近43年的發展,免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞(或組織)化學。它與親合化學技術如葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素與卵白素、植物血凝素(ConA等)相結合拓寬了領域;與激

    免疫細胞化學常用試劑介紹

    一、固定劑  大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽

    免疫細胞化學常用試劑介紹

    一、固定劑  大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽

    免疫細胞化學與圖像分析

    在細胞生物學中,一個常見的問題是如何獲取與細胞功能相關的各種定量測量信息。在免疫細胞化學中也存在同樣的問題。制作免疫細胞化學標本環節 較多,只要有一個環節 失誤就會影響實驗結果,除了需要精制的藥品外,還需要熟練的技術。那么,做成了理想的標本后,如何進行觀察,才能獲得盡量多的的各種定量信息,而且使這些

    免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用范圍

    第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用范圍在腎臟疾病時,免疫細胞化學技術主要應用于腎臟穿刺組織的檢查,也可應用于血清或腎臟洗脫液及尿液的特殊檢查,茲分述如下:一、腎臟組織的檢查腎穿刺組織一般應切割為三小塊,分別作冰凍切片、石蠟切片及超薄切片,進行熒光顯微鏡、光學顯微鏡及透射電鏡觀察。所應用的免疫

    神經內分泌腫瘤免疫細胞化學

    人體存在兩種形式分布的內分泌細胞,一種是內分泌細胞群集形成內分泌器官,如垂體等,另一種是內分泌細胞單個散在于其它組織細胞之間,形成彌散的內分泌系統(diffuse en-docrine system)。通過免疫細胞化學方法及超微結構觀察,人們對內分泌細胞的分布形態與功能等不斷有新的發現。1968年,

    分泌腫瘤免疫細胞化學(3)

      三、甲狀腺髓樣癌  由甲狀腺濾泡旁細胞(C細胞)產生的惡性腫瘤。此瘤在光鏡下與甲狀腺非典型腺瘤、未分化癌及轉移癌有時難以鑒別。免疫細胞化學染色可見瘤細胞降鈣素陽性反應,降鈣素免疫反應物常聚積于瘤細胞核周胞漿中,此項檢查具有診斷意義。電鏡下,瘤細胞中可見二種分泌顆粒,I型顆粒直徑約280nm,含有

    免疫細胞化學常用試劑

    一、固定劑大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽類)

    免疫細胞化學與圖像分析

    在細胞生物學中,一個常見的問題是如何獲取與細胞功能相關的各種定量測量信息。在免疫細胞化學中也存在同樣的問題。制作免疫細胞化學標本環節 較多,只要有一個環節 失誤就會影響實驗結果,除了需要精制的藥品外,還需要熟練的技術。那么,做成了理想的標本后,如何進行觀察,才能獲得盡量多的的各種定量信息,而且使這些

    電鏡與樣品制備技術

    電鏡樣品取材方法 1 動物及人體組織的取材 動物組織的取材,應在麻醉(1%戊巴比妥鈉按5ml/kg體重腹腔注射)或斷頭急性處死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小塊組織,放在干凈的紙板上,滴一滴冷卻的固定液,用新的、無油污鋒利的(雙面)刀片將材料切成大約1㎜寬,2~3㎜長的小塊,從中挑選損傷小的小條

    流式細胞術簡介

    一、流式細胞術發展簡史  流式細胞術(Flow Cytometry, FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是:①測量速度快,最快可在1秒種內計測數萬個細胞;②可進行多參數測量,可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量,并具有明顯的統計學意義;③是一

    免疫組化發展及原理

      1941年Coons首先用熒光素標記抗體—檢測肺組織內的肺炎雙球菌獲得成功。  60年代 Akanke建立酶標抗體技術—鐵蛋白標記Ab技術  70年代 Stemberger改良上述技術,建立辣根過氧化物酶—抗體過氧化物酶(PAP)技術,使免疫細胞化學得到廣泛應用。  80年代 Hsu等建立了抗生

    血液分析儀儀器原理和散點圖特點

    1、體積、電導和激光散射原理這是Beckman-Coulter 公司生產的血液分析儀所采用的經典分析方法,他集三種物理學檢測技術于一體,在細胞處于自然原始的狀態下對其進行多參數分析。該方法也稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法。此技術采用在標本中首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞,然后加入穩定劑來中

    透射電鏡超薄切片和染色實驗

    實驗方法原理 實驗步驟 1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細

    透射電鏡超薄切片和染色實驗

    實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,

    透射電鏡超薄切片和染色實驗

    實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,

    細胞生物學名詞解釋(一)

    1. 細胞(cell)細胞是由膜包圍著含有細胞核(或擬核)的原生質所組成, 是生物體的結構和功能的基本單位, 也是生命活動的基本單位。細胞能夠通過分裂而增殖,是生物體個體發育和系統發育的基礎。細胞或是獨立的作為生命單位, 或是多個細胞組成細胞群體或組織、或器官和機體;細胞還能夠進行分裂和繁殖

    神經干細胞的培養

    一、  神經干細胞的分離無菌條件下取新生SD大鼠(出生48h內)腦組織,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖顯微鏡下剝離腦膜,準確分離海馬,用眼科剪將海馬剪碎后,再轉移到DMEM/F12(1:1)加B27 和bFGF(20ng/ml)的無血清培養基,吸管吹打機械分離制作單細胞懸液,臺

    免疫酶細胞化學實驗技術

    免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色

    白細胞的八種類型

        白細胞亦稱白血球,它的功能是使機體免受病原體(細菌和病毒)、癌細胞、異物侵入,是人體的守衛者。白細胞來源于骨髓中的造血干細胞,在骨髓中發育后進入血液和淋巴液循環,也存在于血管和淋巴管外的組織中。??巨噬細胞??巨噬細胞是個頭最大的白細胞。??巨噬細胞由單核細胞分化發育而來

    丁勝Science,Cell Stem Cell發表細胞重編程重大突破

      來自Gladstone研究所的科學家們取得重大的突破,通過采用一些化學物質的組合將皮膚細胞轉化成為了心臟細胞和腦細胞。由于以往所有的細胞重編程研究都要求往細胞中添加外源基因,因此這一成果是一個前所未有的壯舉。這項研究為某一天能夠用藥物再生出喪失或受損的細胞奠定了基礎。  在發布于《科學》(Sci

    細胞培養污染的途徑、危害及預防措施(一)

    污染是細胞培養技術中面臨的主要問題。某些污染的發生往往難以察覺檢測,而且污染源能長期共存于培養體系中,這類染事實上大部分被人們忽視了。培養的細胞作為個生物體,會對培養環境以及環境中的污染物作相應的反應,造成培養細胞生物學特性的改變,而實驗結果造成潛在的威脅,而且隨著污染時間的長而增加。培養環境中的物

    毒理學新技術以及發展方向介紹(一)

      毒理學是一門研究化學物質對生物體的毒性反應、嚴重程度、發生頻率和毒性作用機制的科學,也是對毒性作用進行定性和定量評價的科學。毒理學與藥理學密切相關,目前已發展成為具有一定基礎理論和實驗手段的獨立學科,并逐漸形成了一些新的毒理學分支。本文就新技術在分子毒理學中的應用及毒理學的一些發展趨勢

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