電泳分析儀等電聚焦電泳相關
等電聚焦電泳 等電聚焦電泳(Isoelectric Focusing Electrophoresis,IFE)是一種利用有pH梯度的介質,分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。將等電點不同的蛋白質混合物加入有pH梯度的凝膠介質中,在電場內經過一段時間后,各組分將分別聚焦在各自等電點相應的pH值位置上,最后,樣品的各組分在各自的等電點聚焦成一條清晰而穩定的窄帶。......閱讀全文
電泳分析儀等電聚焦電泳相關
等電聚焦電泳 等電聚焦電泳(Isoelectric Focusing Electrophoresis,IFE)是一種利用有pH梯度的介質,分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。將等電點不同的蛋白質混合物加入有pH梯度的凝膠介質中,在電場內經過一段時間后,各組分將分別聚焦在各自等電點相應的pH值位置
等電點聚焦電泳
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
制備電泳實驗——等電聚焦制備電泳
實驗方法原理等電聚焦制備電泳是一種非變性制備技術。由于等電聚焦電泳技術的特點,因而是一種理想的制備方法。試劑、試劑盒電極液兩性電解質Ultrodex實驗步驟一、液體介質垂直柱狀蔗糖密度梯度等電聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制備和分析目的的等電聚焦方法。載體兩性電解質在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
等電聚焦電泳與普通電泳區別
兩者的原理上的區別:等電聚焦是根據被分離的蛋白質組分間的等電點的差異被分離,具有不同等電點的蛋白質會停留在相應的pH區帶,而普通的SDS-PAGE凝膠電泳是根據蛋白質組分間的分子量大小差異進行分離的,分子量不同的蛋白質會停留在相應孔徑的凝膠層。
雙向凝膠電泳的等電聚焦相關介紹
蛋白質是兩性分子,在不同的pH環境中可以帶正電荷、負電荷或不帶電荷。對每個蛋白質來說都有一個特定的pH,此時蛋白質的靜電荷為零,此pH值即該蛋白質的等電點(pI)。將蛋白質樣品加載至pH梯度介質上進行電泳時,它會向與其所帶電荷相反的電極方向移動。在移動過程中,蛋白分子可能獲得或失去質子,并且隨著
等電聚焦水平板電泳法的相關介紹
兩性電解質在電泳場中形成一個pH梯度,由于蛋白質為兩性化合物,其所帶的電荷與介質的pH值有關,帶電的蛋白質在電泳中向極性相反的方向遷移,當到達其等電點(此處的pH值使相應的蛋白質不再帶電荷)時,電流達到最小,不再移動。本法用于檢測蛋白類和肽類供試品的等電點。 除另有規定外按以下方法測定。 1
等電點聚焦電泳的定義
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
等電聚焦電泳的梯度組成
pH梯度的組成方式有二種,一種是人工pH梯度,由于其不穩定,重復性差,現已不再使用。另一種是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或電泳管正負極間引入等電點彼此接近的一系列兩性電解質的混合物,在正極端引入酸液,如硫酸、磷酸或醋酸等,在負極端引入堿液,如氫氧化鈉、氨水等。電泳開始前兩性電解質的
等電聚焦電泳的技術特點
是將兩性電解質加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當其處在低于其本身等電點的環境中則帶正電荷,向負極移動;若其處在高于其本身等電點的環境中,則帶負電向正極移動。當泳動到其自身特有的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點的物質最后聚焦在各自等電點位置,形成一個個清晰的區帶,分辨率極高。
等電聚焦凝膠電泳原理
等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在電場中移
電泳分析常用方法等電聚焦電泳技術
等電聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH 梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位,因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中,具有pH梯度的介質其分布是從陽極到
等電點聚焦電泳的技術介紹
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
等電點聚焦電泳的技術介紹
聚丙烯酰胺凝膠電泳( polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE),是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術,用于分離蛋白質和寡核苷酸。
什么是等電聚焦電泳技術?
等電聚焦(IEF)是利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術,特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分,在區帶電泳中分辨率最好。常用的pH梯度支持介質有聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術可應用于:(1)蛋白質的分離提純;(2)蛋白質組學研究。實驗方法原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,
等電聚焦電泳的基本原理
在IEF的電泳中,具有pH梯度的介質其分布是從陽極到陰極,pH值逐漸增大。如前所述,蛋白質分子具有兩性解離及等電點的特征,這樣在堿性區域蛋白質分子帶負電荷向陽極移動,直至某一pH位點時失去電荷而停止移動,此處介質的pH恰好等于聚焦蛋白質分子的等電點(pl)。同理,位于酸性區域的蛋白質分子帶正電荷
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在
等電聚焦電泳色譜儀的特點
等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同,在一個穩定、連續和線性的pH梯度中進行分離。等電聚焦是在電泳介質中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,載體兩性電解質形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,不同的蛋白質移動到其相當的等電點位置上,聚焦于一個狹窄區帶中的過程。一、進行等電聚
等電聚焦(isoelectric-focusing,IEF)電泳技術
等電聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位,因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中,具有pH梯度的介質其分布是從陽極
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的p
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦(Isoelectric focusing,簡稱 IEF)是六十年代中期出現的新技術。近年來等電聚焦技術有了新的進展,已迅速發展成為一門成熟的近代生化實驗技術。目前等電聚焦技術已可以分辨等電點(pI)只差 0.001pH 單位的生物分子。由于其分辨力高,重復性好,樣品容量大,操作簡便迅速,在
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中,即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個
等電聚焦電泳槽和水平電泳槽什么區別
等電聚焦電泳槽和水平電泳槽什么區別兩者的原理上的區別:等電聚焦是根據被分離的蛋白質組分間的等電點的差異被分離,具有不同等電點的蛋白質會停留在相應的pH區帶,而普通的SDS-PAGE凝膠電泳是根據蛋白質組分間的分子量大小差異進行分離的,分子量不同的蛋白質會停留在相應孔徑的凝膠層。
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(一)
原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在電場
毛細管電泳芯片等電聚焦分離
芯片等電聚焦分離芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3
等電聚焦電泳色譜儀的檢測方法
等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同,在一個穩定、連續和線性的pH梯度中進行分離,檢測方法有染色法、掃描法和其它檢測方法。一、染色法:1、考馬斯亮藍染色法。2、銀染色法。3、同工酶染色法。4、專一蛋白染色法。5、熒光標記以及免疫法。二、掃描法:激光光源強度大,單色性好,掃描I
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(四)
9.其他要注意的事項1)等電聚焦后可用一根染色的細線(0.1mm)標出染料前沿的位置;2)不同品牌的載體兩性電解質性質上有細微的差別,使用不同來源的載體兩性電解質凝膠時候蛋白質分離樣式略有差異,若要獲得好的重復性一般不要更換載體兩性電解質的品牌;3)通常,窄范圍的pH梯度可以提高分辨率,但是需要時間
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(三)
8.常見問題及解釋1) 若產生模糊條帶則證明聚焦不完全,這可能是由于電泳中的問題或大分子蛋白質限制了其在凝膠中的遷移能力。若聚焦時間過長或過短,條帶的分辨率會下降。增加電壓梯度可以使帶形更加銳利。高分子量蛋白質在瓊脂糖凝膠中可以聚焦的更好。2) 產生歪斜的條帶通常由于不正確的pH梯度,檢查電極是否潔