TRIzol有無毒性
TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性氣味。對呼吸道有傷害,聞久了會有暈的感覺。1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞,使細胞中的蛋白,核酸物質解聚得到釋放。2、苯酚雖可有效地變性蛋白質,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(RNA酶)。......閱讀全文
TRIzol-Prep
Procedure1.? Homogenize cells (10 million) or tissue (50-100 mg) in 1 mL?TRIzol Reagent?(e.g. scrape and pass through 30G needle, dounce homogenize an
TRIzol-RNA提取方法
研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采
TRIzol-RNA提取方法
(一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-
TRIzol-RNA提取方法
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構
使用-Trizol-純化-RNA-實驗
實驗材料 磨細的組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇,75%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 處理過的水配制DEPC 處理過的水2. 細胞和組織50~100 mg 已磨細的組織二、方法1
使用-Trizol-純化-RNA-實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 磨細的組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
總RNA提取(Trizol提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時,每50~100mg 組織用1ml
使用-Trizol-純化-RNA-實驗
RNA 分離的酚基試劑的生產以 Chomczynski 方案為基礎。這些方案在從富含 RNA 酶的組織如胰腺中獲取 RNA 時最有用。這里介紹的是隨 Invitrogen 的 Trizol 試劑出售的方案的摘要,經 Invitrogen 允許做了修改。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:
RNA-extraction-using-trizol/tri
RNA extraction with TRIzol (Invitrogen product name) or the equivalent TRI (Sigma-Aldrich product name) is a common method of total?RNA extraction?fro
TRIZOL提取注意事項
警告: 有毒物接觸皮膚或者不慎吞服。會導致灼傷。一旦接觸皮膚后立即以大量的洗滌劑和清水清洗。若感不適,看醫生并尋求苯酚和其他成分(JTSRN 80100437-5000p)的正確治療方案。)? TRIZOL在室溫下能穩定保存12個月。盡管如此,為達到最佳效果,我們建議保存在2—8°C的環境下。一般描
DNA抽提指南(TRIZOL)
按照RNA 分離操作方案在完全移去水樣層后,勻漿中的DNA 存在于中間層和苯酚層中也可以被分離出來。在沉淀和多次洗脫后,DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL試劑從組織和培養細胞中完全回收的DNA 可以用來做樣品中DNA 含量的測定。同時抽提的基因組DNA 可以用于對Northern a
蛋白抽提指南(TRIZOL)
在用酒精沉淀出DNA(DNA抽提中的步驟一)后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通過蛋白[質]印跡法對樣品中某一特殊的蛋白質進行分析。試劑所需,但沒有隨同提供的物品:* 異丙醇* 0.3M鹽酸胍(用95%酒精配制)* 無水乙醇* 1% SDS1.蛋白質的沉淀用異丙醇從苯酚—乙醇上清中
TRIzol有無毒性
TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性氣味。對呼吸道有傷害,聞久了會有暈的感覺。1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞,使細胞中的蛋白,核酸物質解聚得到釋放。2、苯酚雖可有效地變性蛋白質,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰
TRIZOL提取注意事項3
3.臺式離心機最大能達到2,600×g的離心力,如果將離心時間延長到30-60分鐘可以滿足步驟2和步驟3中的操作。疑難解答:RNA抽提每1 mg組織或1×106培養細胞預期的RNA產量1.肝和脾,6—10μg2.腎,3—4μg3.骨骼肌和腦組織,1—1.5μg4.胎盤,1-4μg5.上皮細胞(1×1
TRIZOL提取注意事項2
實驗所需但試劑未提供的物品:* 氯仿 *異丙醇* 75%乙醇(用DEPC處理過的水配制)*無RNA酶的水或0.5% SDS溶液[配無RNA酶的水,將水加入無RNA酶的玻璃瓶中,加入DEPC至0.01% (v/v)。放置過夜并高壓滅菌。SDS溶液必須用DEPC處理過并經高壓滅菌的水配制。]1.勻漿化作
TRIZOL提取RNA的詳細步驟
1、在提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA時,先離心沉淀細胞,每5-10╳106個細胞加1ml Trizol后,反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,
RNA抽提指南(TRIZOL法)
RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事項:* 全程佩戴一次性手套。皮膚經常帶有細菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養良好的微生物實驗操作習慣預防微生物污染。* 使用滅菌的,一次性的塑料器皿和自動吸管抽提RNA,避免使用公共儀器所導致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探針的實驗室
總RNA的提取(Trizol法提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml
Trizol法提取總RNA的原理
Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解,從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性,但它不能完全抑制RNA酶的活性,因此Trizol中還加入了8-羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(即RNA酶)。Tr
采用Trizol-溶液提取細菌總RNA
實驗概要了解用Trizol 溶液提取細菌總 RNA的方法。實驗原理Trizol主要物質是異硫氰酸胍,它可以破壞細胞使RNA釋放出來的同時,保護RNA的完整性。加入氯仿后離心,樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA ?可以通過異丙醇沉淀來還原。無論是人、動物、植物還
TRIzol影響實驗結果?miRNA文章被撤回
韓國首爾大學的科學家Narry Kim(金娜蕊)及其研究小組近日撤回了一篇關于microRNA(miRNA)衰減的文章,因為她們發現,所用的TRIzol試劑會對富含GC的miRNA或具二級結構的miRNA產生不同影響。 這篇文章去年發表于《Molecular Cell》雜志上。研究
trizol試劑提取細胞內總RNA
最好在4度下離心。因為在4度下,RNA酶的活性低,總RNA降解的也就越少。在常溫下離心RNA比4度更容易降解。
實驗室檢驗檢測工具TRIZOL
TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性,因此對純化RNA及標準化RNA的生產十分有用。TRIZOL的主要成分是苯
不用Trizol裂解細胞提取RNA的方法
1、方法一試劑:(1)變性液組成:25 g異硫氰酸胍溶于33 ml CSB中(42 mmol/L pH4.0乙酸鈉、0.83%十二烷基肌氨酸鈉、0.2 mmol/L β-巰基乙醇),65 ℃溶解,過濾滅菌,4 ℃預冷。(2)酸性酚配制:55 ℃時,500 g酚溶入500 ml 50 mmol/L,p
TRIzol-RNA提取試劑盒操作說明
TRIzol RNA提取試劑盒是由GIBCO BRL公司推出專供提取RNA的產品,其操作方便、快捷。 在TRIzol中,RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對樣品的后續操作會要求用無RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4小時。塑料器皿可以在0.
TRIzol法提取組織和細胞總RNA
(一)試劑準備1 . TRIzol 試劑。2 .氯仿3 .異丙醇4 . 75% 乙醇( DEPC H2O 配制)5 . DEPC H2O (二)操作步驟 1 . 樣品處理: (1)培養細胞:收獲細胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 離心管中,加入 1ml Trizol ,混勻,室溫
動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法
實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液,其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性,隨后加入氯仿,酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中,RNA則分布在上層的水相中,最后用異丙醇沉淀水相中的RNA,并用70
Trizol法提取總RNA的純化要求
1.純化后不應存在對酶(如逆轉錄酶)有抑制作用的物質。2.排除有機溶劑和金屬離子的污染。3.蛋白質、多糖和脂類分子等的污染降到最低程度。4.排除DNA分子的污染。
利用-Trizol-從植物組織中制備-RNA-實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 植物組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
利用-Trizol-從植物組織中制備-RNA-實驗
下述方案是經修改過的 Trizol 方案,用于從植物組織中分離 RNA,其中增加了一個高鹽異丙酵沉淀步驟,以選擇性地沉淀 RNA,而將多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態