生物樣品分離技術鹽析法
鹽析法利用不同蛋白質在高濃度的鹽溶液中溶解度不同程度的降低來沉淀除去蛋白質。在低鹽濃度下,蛋白質溶解度隨著鹽濃度的升高而增加,稱為鹽溶作用。當鹽濃度不斷升高時,不同蛋白質的溶解度又以不同程度下降,并先后析出沉淀,稱為鹽析作用。這是由蛋白質分子內及分子間電荷的極性基團的靜電引力造成的。由于水中加入了少量的鹽,增加了溶液的極性,減弱了蛋白質分子間的作用力,促使其溶解度增大。當鹽濃度增加到一定程度時,水活度被降低,蛋白質表面的電荷大量被中和,水化膜被破壞,白質分子又相互聚集沉淀析出鹽析法的優點是對設備和條件要求低,安全,應用范圍廣泛,一般可在室溫下操作常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。硫酸銨的鹽析能力強,飽和液濃度大,溶解度受溫度影響小,一般不會使蛋白質變性。缺點是緩沖能力差,pH值常在4.5～5.5。鹽析時要注意以下幾個問題。①鹽的飽和度影響 鹽的飽和度是影響蛋白質鹽析的重要因素,不同的......閱讀全文
生物樣品分離技術鹽析法
鹽析法利用不同蛋白質在高濃度的鹽溶液中溶解度不同程度的降低來沉淀除去蛋白質。在低鹽濃度下,蛋白質溶解度隨著鹽濃度的升高而增加,稱為鹽溶作用。當鹽濃度不斷升高時,不同蛋白質的溶解度又以不同程度下降,并先后析出沉淀,稱為鹽析作用。這是由蛋白質分子內及分子間電荷的極性基團的靜電引力造成的。由于水中加入了少
生物樣品分離技術膜分離法
膜分離技術包括超濾、反滲析、電滲析、微孔過濾等。利用膜分離技術可將樣品小分子化合物和大分子的蛋白質很好地分離。超濾是一種除去樣品中蛋白質和其他大分子的方法,是能用分子分離的薄膜分離技術,依靠薄膜兩側壓力差作為推動力來分離溶液中不同分子量的物質。與沉淀法相比,其優點是適用于小量樣品,不用稀釋樣品也不用
生物樣品分離技術加熱法
加熱法當待測組分熱穩定性好時,可采用加熱的方法將一些熱變性蛋白質沉淀。加熱溫度視待測組分的熱穩定性而定,通常可加熱到90℃。蛋白質沉淀后可用離心或過濾除去,這種方法最簡單,但只能除去熱變性蛋白質。
生物樣品分離技術凝膠色譜法
利用分子大小不同的物質在流過凝膠固定相時的保留時間不同,大分子首先流出,小分子最后流出,可將待測小分子化合物與大分子蛋白質分離。這時待測小分子化合物的濃度被流動相所稀釋,必要時還要進行濃縮后再用色譜分析。
生物樣品分離技術柱色譜法
用能吸附蛋白質的材料裝填成小柱,使欲除蛋白質的樣品流過小柱,樣品中的蛋白質被柱填料吸附,欲測組分不被吸附,從小柱中流出。現已有廠家將這種小柱做成商品出售,稱為預柱。這種預柱可以直接連在HPLC的進樣裝置上,含蛋白質的樣品通過預柱后可直接進入HPLC系統分析。如分析尿中的某些代謝產物時,可將樣品通過預
生物樣品分離技術等電點沉淀法
利用蛋白質在等電點時溶解度最低,用酸、堿調節pH值,可使蛋白質沉淀析出,但這時沉淀不完全,可與有機溶劑沉淀法、鹽析法聯合使用。
血清IgG的分離制備—鹽析法
原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，簡稱IgG）的主要成分之一，分子量約為15萬~16萬，沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分之一。血漿蛋白質的成分多達70余種，要從血漿中分離出IgG，首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序，使IgG在樣品中比例大為增高，
食品樣品預處理傳統方法鹽析法
向溶液中加入某種無機鹽,使溶質在原溶劑中的溶解度大大降低而從溶液中沉淀析出。這種方法叫作鹽析。如在蛋白質溶液中,加入大量的鹽類,特別是加入重金屬鹽,使蛋白質從溶液中沉淀出來。在進行鹽析工作時,應注意溶液中所要加入的物質的選擇,它不會破壞溶液中所要析出的物質,否則達不到鹽析提取的目的。
蛋白質鹽析分離法介紹
摘要 : 鹽析的發生是由于鹽濃度增大到一定數值時使水活性降低，導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，引起蛋白質分子之間相互聚集并從溶液中析出，最后經離心機分離后獲得沉淀物和上清液。一、蛋白質鹽析分離的原理：蛋白質在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升(鹽溶)，當鹽濃度增大到一定數值
蛋白質的鹽析分離法
一、蛋白質鹽析分離的原理：蛋白質在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升（鹽溶），當鹽濃度增大到一定數值時，其溶解度又逐漸下降直至蛋白質析出。鹽析的發生是由于鹽濃度增大到一定數值時使水活性降低，導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，引起蛋白質分子之間相互聚集并從溶液中析出，最后經離心
蛋白質的鹽析分離法
一、蛋白質鹽析分離的原理：蛋白質在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升（鹽溶），當鹽濃度增大到一定數值時，其溶解度又逐漸下降直至蛋白質析出。鹽析的發生是由于鹽濃度增大到一定數值時使水活性降低，導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，引起蛋白質分子之間相互聚集并從溶液中析出，zui后經
生物樣品蛋白質的常用分離技術
(1)加熱法當待測組分熱穩定性好時,可采用加熱的方法將一些熱變性蛋白質沉淀。加熱溫度視待測組分的熱穩定性而定,通常可加熱到90℃。蛋白質沉淀后可用離心或過濾除去,這種方法最簡單,但只能除去熱變性蛋白質。(2)鹽析法利用不同蛋白質在高濃度的鹽溶液中溶解度不同程度的降低來沉淀除去蛋白質。在低鹽濃度下,蛋
分離方法之鹽析
鹽析少量的鹽（如硫酸銨、硫酸鈉、氯化銨等）能促進蛋白質的溶解。當向蛋白質中加入的鹽溶液達到一定濃度時，反而使蛋白質的溶解度降低而從溶液中析出，這種作用稱為鹽析。蛋白質的鹽析是一個可逆過程，鹽析出的蛋白質稀釋后仍能溶解，并不影響蛋白質的活性。采用多次鹽析和溶解，可以分離提純蛋白質。制肥皂（高級脂肪酸鈉
鹽析法是粗分離IgG的重要方法之一
鹽析法是粗分離IgG的重要方法原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，簡稱IgG）的主要成分，分子量約為15萬~16萬，沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分。血漿蛋白質的成分多達70余種，要從血漿中分離出IgG，首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序，使IgG
血清免疫球蛋白（Immunoglobulin，IgG）的分離制備—鹽析法
（一）原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，簡稱IgG）的主要成分之一，分子量約為15萬~16萬，沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分之一。血漿蛋白質的成分多達70余種，要從血漿中分離出IgG，首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序，使IgG在樣品中比例大為
何謂鹽析？簡述分段鹽析分離蛋白質的原理
鹽析是指向蛋白質溶液中加入高濃度的中性鹽，以破壞蛋白質的膠體穩定性，使蛋白質的溶解度降低而從溶液中沉淀析出的過程。改變鹽的濃度與溶液的PH值，便可將混合液中的蛋白質逐個鹽析分開，這種分離蛋白質的操作稱為分段鹽析
生物樣品的前處理技術機械法進行細胞破碎
機械法主要是通過機械切力的作用使組織細胞破碎,有以下幾種裝置和方法可用于組織細胞的破碎。①高速組織搗碎機? ?由調速器、支架、馬達、帶桿刀葉、有機玻璃管(筒口加蓋)等部分組成,操作時將樣品配成稀糊狀液,放置于筒內(約占1/3體積),固定筒上的蓋子,將調速器撥至最慢處,開動馬達后逐步加速至所需速度,一
電泳分離技術樣品處理方法
根據樣品分離目的不同,主要有三種處理方法:還原SDS處理、非還原SDS處理、帶有烷基化作用的還原SDS處理。?1)還原SDS處理:在上樣buffer中加入SDS和DTT(或Beta巰基乙醇)后,蛋白質構象被解離,電荷被中和,形成SDS與蛋白相結合的分子,在電泳中,只根據分子量來分離。一般電泳均按這種
鹽析紙色譜法
鹽析紙色譜法?salting-out paper chromatography 是用于蛋白質類分離的一種紙色譜法。在水流動相中加入鹽類或有機溶劑如乙醇、丙酮等，使組分的溶解度減小，被紙吸附的作用加強，從而使各蛋白質組分的移動距離有較大差別，從而達到較好的分離。
抗體的純化：鹽析法
精制抗體的方法很多。一般采用綜合技術，避免蛋白變性。如分離IgG時，多結合使用鹽析法與離子交換法，以求純化。提取IgM的方法也很多，如應用凝膠過濾與制備電泳法，或離子交換與凝膠過濾等。一、原理蛋白質在水溶液中的溶解度是由蛋白質周圍親水基團與水形成水化膜的程度，以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。當用
抗體的純化：鹽析法
精制抗體的方法很多。一般采用綜合技術，避免蛋白變性。如分離IgG時，多結合使用鹽析法與離子交換法，以求純化。提取IgM的方法也很多，如應用凝膠過濾與制備電泳法，或離子交換與凝膠過濾等。?一、原理?蛋白質在水溶液中的溶解度是由蛋白質周圍親水基團與水形成水化膜的程度，以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。
鹽析技術的應用
可以把發黃的白襯衫放在5%食鹽水中浸泡1小時，再慢慢搓干凈；或將衣服浸于10%的濃鹽水中，泡1-2小時，取出用清水漂洗干凈。衣領部位的污漬可以單獨加一些細鹽粒輕輕搓洗效果更佳。應當注意的是衣服應當用涼水浸泡，切勿使用熱水。
蛋白質的提取及粗分離實驗——硫酸銨鹽析法
分離純化蛋白質，首先要從原材料中提取目的蛋白，然后通過粗分離的方法除去大量雜質，最后進行精細分離，得到目的蛋白。本實驗以新型基因重組人TNF為例闡明重組蛋白TNF的提取及初步分離實驗方法原理分離純化蛋白質，首先要從原材料中提取目的蛋白，然后通過粗分離的方法除去大量雜質，最后進行精細分離，得到目的蛋白
生物芯片技術樣品制備
RNA樣品通常需要首先逆轉錄成cDNA并進行標記后才可進行檢測。目前，由于檢測靈敏度所限，尚難以普通探針對極少量的核酸分子進行雜交和檢測，所以需要對樣品或后續測試信號進行適當的放大。多數方法需要在標記和分析前對樣品進行適當程度的擴增，例如通過PCR方法，以使樣品核酸的拷貝數有所提高達到檢測的靈敏度
鹽析法的原理是什么
鹽析法的原理是將硫酸銨、硫化鈉或氯化鈉等加入蛋白質溶液，使蛋白質表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導致蛋白質在水溶液中的穩定性因素去除而沉淀。蛋白質在水溶液中的溶解度取決于蛋白質分子表面離子周圍的水分子數目，亦即主要是由蛋白質分子外周親水基團與水形成水化膜的程度以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。蛋白
生物分子的透析分離法
一、生物分子透析分離的原理：天然或人工半透膜只允許小分子通過而阻礙大分子通過，當膜的兩側存在小分子濃度差時，小分子從高濃度一側向低濃度一側擴散直到平衡。通過離心機分離不斷去除擴散出來的小分子，從而達到分離純化的目的。二、影響生物分子透析分離的因素：1、半透膜的通透性：半透膜的通透性取決于膜孔徑的大小
生物分子的透析分離法
一、生物分子透析分離的原理：天然或人工半透膜只允許小分子通過而阻礙大分子通過，當膜的兩側存在小分子濃度差時，小分子從高濃度一側向低濃度一側擴散直到平衡。通過離心機分離不斷去除擴散出來的小分子，從而達到分離純化的目的。二、影響生物分子透析分離的因素：1、半透膜的通透性：半透膜的通透性取決于膜孔徑的大小
食品樣品預處理傳統方法色譜分離法
色譜分離法又稱色層分離法,是一種在載體上進行物質分離的方法的總稱。根據分離原理的不同,可分為吸附色譜分離、分配色譜分離和離子交換色譜分離等。此類方法的分離效果好,近年來在食品分析中的應用越來越廣泛。
生物芯片技術的生物樣品的制備
分離純化、壙增、獲取其中的蛋白質或DNA、RNA并用熒光標記， 才能與芯片進行反應。用DNA芯片做表達譜研究時，通常是將樣品先抽提MRNA，然后反轉錄成CDNA。同時摻入帶熒光標記的dCTP或dUTP。
微生物分離純化實驗——平板劃線分離法
實驗方法原理該方法操作簡便，普通用于微生物的分離與純化。其基本原理包括兩方面：1. 選擇適合于待分離微生物的生長條件，如營養、酸堿度、濕度和氧等要求或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長，而抑制其他微生物生長的環境，從面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個