關于DNA探針的主要優點介紹
對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質，然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列，然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。用此探針在DNA文庫中篩選，陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內含子序列，而原核則沒有。因此，真核基因組DNA探針用于檢測基因表達時雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針（包括cDNA探針）的主要優點有下面三點： ①這類探針多克隆在質粒載體中，可以無限繁殖，取之不盡，制備方法簡便。 ②DNA探針不易降解（相對RNA而言），一般能有效抑制DNA酶活性。 ③DNA探針的標記方法較成熟，有多種方法可供選擇，如缺口平移，隨機引物法，PCR標記法等，能用于同位素和非同位素標記。......閱讀全文
關于DNA探針的主要優點介紹
對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質，然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列，然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。用此探針在DNA文庫中篩選，陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織
關于DNA探針的應用介紹
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病，現場調查及蟲種鑒定，可用于病毒性肝炎的診斷，遺傳性疾病的診斷，可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法：用一個特定的DNA片段制成探針，與被測的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測出來。與傳統方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統的檢測一次，需幾天或幾個星期的時間，精確度不高，而
關于DNA疫苗的優點介紹
①DNA接種載體（如質粒）的結構簡單，提純質粒DNA的工藝簡便，因而生產成本較低，且適于大批量生產； ②DNA分子克隆比較容易，使得DNA疫苗能根據需要隨時進行更新； ③DNA分子很穩定，可制成DNA疫苗凍干苗，使用時在鹽溶液中可恢復原有活性，因而便于運輸和保存； ④比傳統疫苗安全，雖然D
關于DNA探針的基本內容介紹
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段，可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合，經放射自顯影或其他檢測手段就可以
DNA探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數不
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素
關于乙肝病毒DNA檢測的優點介紹
DNA檢測方法由于其特異性好、靈敏度高、操作簡便等原因已成為物種鑒定的主要檢測方法。首先，DNA在細胞中含量相對穩定，比蛋白質耐熱，在產品的加工過程中也相對不容易被破壞，從加工產品中仍能提取出足夠可供分析的小片段DNA；其次，DNA信息量大，物種的差異直接反映在DNA序列的差異上。可以根據DNA
DNA探針的基本信息介紹
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段，可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合，經放射自顯影或其他檢測手段就可以
DNA基因探針的克隆方法介紹
對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質，然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列，然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。用此探針在DNA文庫中篩選，陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織有所
探針標記方法的主要類型介紹
①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5′端核苷酸，同時在3′端修復加入被標記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻，多用于大分子DNA標記，(>1000b
關于DNA疫苗的主要問題分析介紹
DNA疫苗尚未得到廣泛的應用，除了因為它是一種新事物，不大為人所了解之外，它本身的安全問題則是人們對它 的最大顧慮。DNA疫苗存在的問題如下： 外源DNA進入機體后是否整合到宿主基因組，導致癌基因激活或抑癌基因失活。 疫苗DNA長期在體內表達是否會誘導機體產生免疫耐受，長遠來說，導致機體免疫
關于線粒體DNA的主要功能介紹
復制 mtDNA可自我復制,其復制也是以半保留方式進行的。用同位素標記證明,mtDNA復制的時間主要在細胞周期的S期和G2期。DNA先復制,隨后線粒體分裂。其復制仍受細胞核的控制,復制所需要的DNA聚合酶是由核DNA編碼,在細胞質核糖體上合成的。 遺傳 由于線粒體會通過卵細胞傳遞,相關疾病
DNA探針原位雜交的相關介紹
1、4—6微米切片，用防脫片膠（多聚賴氨酸）處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟，10minX2（趁熱脫蠟） 4、100%乙醇5minX2次，不用浸水，直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸餾水稀釋，濃度為25μg/ml），37℃消化1
雙鏈DNA探針標記法的介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到
雙鏈DNA探針標記法介紹
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。1.?切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的
“DNA探針”的技術依據
DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20～50個堿基的與基
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的制備過程
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別
DNA探針的功能特性
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以
DNA探針的制備方法
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細菌為例，細菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針，通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法，即將細菌DNA切成小片段后（如用限制性內切酶做不完全水解）分別
隨機引物法介紹DNA探針的標記方法
變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機DNA小片段，作為引物，當后者與單鏈DNA多個部位互補結合后，按堿基互補原則不斷在其3'-OH端添加同位素標記的單核苷酸，這樣也可以獲得放射性比活性很高的DNA探針。
衛星DNA的優點
衛星DNA具有很多優點，然而如何獲得所需要的衛星位點，一般有以下兩種方法：一種是利用衛星位點的保守性，從衛星數據庫中搜索出某物種已知衛星引物，然后以相近物種的基因組總DNA為模板，用已知引物進行擴增并進行多態性分析，再對特異擴增產物進行測序，從而獲得適合另一物種的高度多態的微衛星位點。另一種方法則是
什么是“DNA探針”？
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
分子雜交基因所用DNA探針應用介紹
DNA探針是最常用的核酸探針，指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針。現已獲得DNA探針數量很多，有細菌、病毒、原蟲、真菌、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列，或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的，如細菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針
關于乙肝病毒DNA檢測的主要作用介紹
乙肝病毒DNA檢測在乙肝檢查化驗中使用的越來越普遍，可見乙肝病毒DNA檢測在乙肝檢查化驗中占的分量越來越重，這是因為乙肝病毒DNA檢測對確診乙肝和評估乙肝治療效果具有十分重要的作用 [2]。主要表現于以下七個方面： 1、了解乙肝病毒在體內存在的數量。 2、乙肝病毒是否復制。 3、乙肝是否傳
關于基因探針的標記介紹
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,有必要對探針加以標記,以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素-親合素系統、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。最常
關于基因探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA，再通過逆轉錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是，cDNA探針不含有內含子序列。此外，還可在體外人工合成堿基數不
關于探針標記方法的介紹
①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同時在3´；端修復加入被標記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻，多用于大分
關于基因探針的標記介紹
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交，有必要對探針加以標記，以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素-親合素系統 、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。