捕捉生命密碼的“利器”還能測出烤串是否正宗
諾貝爾獎得主、美國生物化學家凱利·穆利斯不久前去世，他發明的PCR擴增技術，將生物學劃分為兩個時代：PCR前時代和PCR后時代—— 一人聲微，萬人聲振聾發聵。 諾貝爾獎得主、美國生物化學家凱利·穆利斯所發明的PCR技術，正是通過“百萬倍復制”的方法讓DNA攜帶的生命密碼發出振聾發聵的聲音，幫助人們將其一一捕捉。 不久前，穆利斯的去世讓人們回想起追逐DNA密碼的艱難歲月，而PCR技術的發明給了人們解密“利器”，這也是為什么《紐約時報》評價這一技術的誕生將生物學劃分為兩個時代：PCR前時代和PCR后時代。 開車途中靈光閃現 1983年實現第一個PCR片段 “當我走到我的銀色思域車前時，我感覺很虛弱。弗雷德（穆利斯的助理）、空試驗瓶以及PCR時代的曙光都不能取代珍妮（穆利斯女友）。我感覺孤獨。”據記載，穆利斯在諾貝爾獎獲獎現場的演講中這樣說道。 穆利斯創新性的靈光一閃出現在深夜載女友開車的途中，這位有著藝術家氣質的科學......閱讀全文
PCR擴增樣本DNA的HLA基因片段
一、PCR擴增體系1. 1.0uM 引物2. 300ng待測樣本基因組DNA3. 2.0U Taq多聚酶4. 200uM 各種dNTP5. 用1 X PCR緩沖液（10mM Tris-HCl，pH8.3，50mM KCl，1.5mM MgCl2，0.01%明膠）調至總體積100ul，并用50ul礦物
基因組DNA提取與PCR擴增技術
一、基因組DNA提取實驗目的基因組DNA的制備是基因分析的前提。 本實驗要求掌握基因組DNA提取的基本方法。實驗原理 DNA在生物體內是與蛋白質形成復合物的形式存在的。核酸與蛋白質之間的結合力包括離子鍵、氫鍵、范德華力等，破壞或降低這些結合力就可把核酸與蛋白分開。 DNA、RNA所含有的嘌呤環和嘧啶
用－PCR－控制基因組－DNA－文庫的質量實驗
在該方案中，用限制性內切酶的混合物處理人類基因組 DNA(內切酶混合物的識別位點為 4bp)，產生大概 50?500bp 的片段。最終使用這一類型的表達文庫，是通過利用表型的和生化的篩選方法，分離編碼功能多肽或蛋白片段的基因片段。用KlenowDNA 聚合酶處理后，基因組 DNA 片段成為平末端，
用－PCR－控制基因組－DNA－文庫的質量實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 ddH20 Vent 緩沖液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 質粒 DNA PCR 引物
用－PCR－控制基因組－DNA－文庫的質量實驗
試劑、試劑盒?ddH20Vent 緩沖液Vent DNA 聚合酶 dNTP質粒 DNAPCR 引物儀器、耗材?瓊脂糖凝膠電泳所需的試劑和設備熱循環儀實驗步驟?一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ddH202. 酶和酶緩沖液10X Vent 緩沖液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP，各
PCR擴增DNA（PCR－Amplify－DNA）實驗原理、材料和操作步驟
【實驗原理】聚合酶鏈反應（polymerasechainreaction，PCR）是一種體外 DNA擴增技術，1985年由Mullis等人創立。該技術能在幾小時的實驗操作中，將人為選定的一段DNA擴增幾百萬倍，具有靈敏度高、特異性強、操作簡便和應用廣泛等優點，目前已成為分子生物學及基因工程中極為
用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法（一）
一種用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法 來源：方統科技----------------------------------------------------------------------------------摘要： 本文介紹了一種用于PCR的植物基因組DNA的快速制備方法。該方法
用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法（二）
2 結果與討論2.1 PCR模板DNA的快速制備本方法是將少量植物葉片在TE溶液或去離子水中，經鎢合金珠在離心管內的振蕩破碎，直接獲得DNA溶液。用多功能組織細胞研磨器（MTM-60）一次可操作60個樣品。瓊脂糖凝膠電泳表明，用TE和去離子水都可獲得分子量較大的DNA片段（圖1A）。用TE制備的DN
DNA的化學檢測項目介紹結核桿菌基因檢測（PCR）
結核桿菌基因檢測（PCR）介紹： 結核分枝桿菌在體外培養周期長，陽性檢出率不高，因此對臨床的早期診斷和確定藥物治療都帶來一定的困難，應用聚合酶鏈反應(PCR)技術檢測結核分枝桿菌，能大大提供結核分枝桿菌的檢出率和檢出特異性，有利于臨床即使治療。標本采自患者的痰、支氣管分泌物、腦脊液、心包積液、胸腔
CGH－of－PCR－Amplified－Microdissected－DNA
PCR: We generally use 1-2 ul of starting paraffin microdissected DNA for each 50 ul DOP-PCR reaction. We assume that about 1 ug of product is produ
DNA測序PCR測序反應
1. 取0.2 ml的PCR管，用記號筆編號，將管插在顆粒冰中，按下表加試劑： 所加試劑 測定模板管 標準對照管 BigDye Mix 1 μl 1 μl 待測的質粒DNA 1 μl － pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA － 1 μl 待測DNA的正向引物 1 μl － M13(
轉基因植物TETR基因PCR檢測試劑盒樣品DNA的制備
1.用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。。也可以選購本公司的一管式病毒DNAOUT或其升級版柱式病毒 DNAOUT。本試劑盒免費贈送15次DNA病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAOUT的成分)。稀釋陽性對照(以10E2-10E7這6個10倍稀釋度為例。由于標
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法（一）
摘? 要：制備大量生物樣品的模板DNA用于PCR檢測是費時費人工的工作。本文介紹一種高通量的植物基因組DNA(gDNA)快速制備及其用于PCR基因型檢測的操作方法。將一小段單子葉植物苗葉片(長度約30 mm或40 mm，與96方孔板的孔深大致相同) 或一小塊(約2~4 mg)雙子葉植物葉片放入9
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法（四）
2.3 ?高通量的分子標記檢測?本方法制備的DNA濃度雖然低，用96針復制器加入0.5~1 μL模板進行33~35個PCR循環就可獲得足夠濃度的產物，并不需要加入特別多的Taq酶(甚至使用量為每45~50 μL PCR反應液1 U也能擴增分子標記)。該方法已對數萬份水稻樣品進行了分子標記(S
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法（二）
1.2? 植物材料 ?1.2.1 水稻秧苗。將1.6-mL 96方孔板底部用6 mm電鉆頭打穿，或將舊96孔PCR板的底部剪去約4 mm。使用時將方孔板壓入少量泥巴。每孔放入1粒萌動的水稻種子，在自然日光下(或人工氣候箱)生長至3~4片葉。其他植物小苗也可用類似方法種植。?1.2.2 水稻大植株的鮮
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法（三）
將純化定量的水稻品種(93-11)基因組DNA標準樣品(0.5~8 ng)與1.0 μL本方法制備的水稻品種(02428)基因組DNA混合作為模板，用InDel 標記引物(表1)進行PCR擴增和PAGE檢測。箭頭指某反應(或2個反應之間)其02428與93-11條帶的信號值大致相等(即DNA
基因的PCR擴增實驗擴增不出DNA條帶是什么原因
可能有很多原因，最常見的原因是1.模板不干凈，2.引物設計不當，3.退火溫度過高，等等
PCR基因擴增
實驗概要PCR擴增目標DNA片段。實驗原理多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。? 1. 模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃
A－simple,－rapid－procedure－for－the－isolation－of－DNA－for－PCR
N.M. DuTeau and J.F. Leslie - Department of Plant Pathology, Throckmorton Hall, Kansas State University, Manhattan, KS 66506-5502 The polymerase cha
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
在本方案所描述的反應中，差異 DNA 被選擇性地擴增。每個實驗至少應該有 4 個反應：①已消減的檢測 DNA;②未消減的檢測者對照（1-c);③反向消減的檢測 DNA;④反向未消減的對照（2-c)。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑
A－simple,－rapid－procedure－for－the－isolation－of－DNA－for－PCR
The polymerase chain reaction (PCR) is a method for amplifying specific segments of DNA defined by the small primers used to start the reaction. Using
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 樣品（即方案 2 第 16 步中的各消減樣品
DNA測序儀pcr測序反應
pcr測序反應 (1) 取0.2ml的pcr管，用記號筆編號，將管插在顆粒冰中，按下表加試劑： 所加試劑 測定模板管 標準對照管 bigdye mix 1μl 1μl 待測的質粒dna 1μl － pgem-3zf (+) 雙鏈dna － 1μl 待測dna的正向引物 1μl －
PCR擴增分離目的DNA片段
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用，掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域，它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分
痘苗DNA檢測實驗——PCR－法
除了 PCR 和 Southern 雜交可以檢測病毒 DNA 外，也可以利用 DNA 點跡雜交方法檢測在分離的噬斑中的重組病毒。本實驗主要介紹用這3種方法來檢測痘苗DNA。實驗材料貼壁生長良好的單層 BS-C-1 或 HuTK-143B 細胞重組病毒噬斑懸液試劑、試劑盒PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇
PCR技術（十五）：個體配子DNA序列的PCR分析
高等生物遺傳圖譜的構建依賴于選擇性雜交后代的分析或者通過家系分析法來計 算連鎖關系。對人類而言僅后者是可行的。使用長度多態性限制片段（RFLPS）在構 建人連鎖圖譜方面已取得長足的進步。為了對帶有與已知表現型相關的RFLP標記的基 因進行定位，首先得建立間隔約10CM的遺傳標記束（平均1CM等于1％
PCR技術（八）：擴增較大片段DNA的PCR方法
一般PCR方法在擴增大片段DNA時的局限性： 通常所用的PCR方法都在兩個方面有局限，即目標產物精確程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶，具有完整的3'外切酶校讀活性（3'-editing-exonuclease），可以將每個循環中堿基
高容量載體中基因組DNA片段末端的分離(小載體PCR)
許多真核生物的基因所包含的 DNA，遠非單個重組子所能容納得了的。對于大多數染色體來說，更是如此。因此，必須構建一套重疊的 DNA 克隆，這些克隆的 DNA 按次序排列能形成疊連序列（疊連群），可以涵蓋一個很大的基因或目的區域。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。 實驗方法
高容量載體中基因組DNA片段末端的分離(小載體PCR)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 許多真核生物的基因所包含的 DNA，遠非單個重組子所能容納得了的。對于大多數染色體來說，更是如此。因此，必須構建一套重疊的 DNA 克隆，這些克隆的 DNA 按次序排列能形成疊連序列（疊連群），可以涵蓋一個很大的基因或目的區域。