miRNA功能分析的五點建議
隨著microRNA(miRNA)研究的深入，很多人開始從miRNA的發現轉入功能分析。miRNA抑制是一種確定miRNA功能的強大技術。如何開展，需要注意些什么?Exiqon公司的專家給出了五點建議。 1. 選擇合適的抑制劑 若希望miRNA功能分析成功，首先要選擇一個最適合您實驗的抑制劑。 ? 檢查您的目的miRNA是否屬于可能的功能冗余的miRNA家族。如果這些家族成員在您的系統中表達，則您應當考慮抑制整個家族的家族抑制劑。 ? 如果您正在研究非常高表達的miRNA或難轉染的細胞，那么您應當考慮一些強力的抑制劑，如Exiqon的Power inhibitors。由于高穩定性，這些抑制劑適合需要長時間抑制的實驗。 ? 如果您正在研究一些容易轉染的細胞，或不太能忍受強力抑制劑的細胞(如來自肌肉或中樞神經系統的細胞)，那么常規的抑制劑可能是更好的選擇。 2. 優化您的轉染 優化......閱讀全文
Nature發布miRNA重要發現：脂肪細胞的miRNA信號
脂肪細胞并不簡單，Joslin糖尿病中心的科學家發現這種細胞并不只是靜靜的待在我們身體中，而且能釋放出激素和其它信號蛋白，影響多種組織，其中一種竟然是miRNA。利用脂肪細胞研發基因治療方法，也許能用于治療肝臟或其它器官的代謝疾病，還有癌癥等。 這一研究成果公布在2月15日的Nature雜志上
miRNA－mimics－miRNA－inhibitor
miRNA mimics 是模擬生物體 內源的miRNAs，運用化學合成的方法合成，能增強內源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化學修飾的專門針對細胞中特異的靶miRNA的抑制劑。近年來人工合成的miRNA（artificial miRNA，amiRNA）已經成功應用于沉默預期靶
Nature－Medicine：掌控細胞生死的miRNA
瑞士蘇黎世聯邦理工學院(ETH)的研究人員在β細胞中對microRNA開展研究時，發現了一種對壓力下細胞死亡起關鍵作用的microRNA。研究結果發布在5月18日的《自然醫學》（Nature Medicine）雜志上。 糖尿病是現代社會的重要禍患之一，糖尿病病例每年都在上升。全球已有超過3.8
Nature－Medicine：掌控細胞生死的miRNA
瑞士蘇黎世聯邦理工學院(ETH)的研究人員在β細胞中對microRNA開展研究時，發現了一種對壓力下細胞死亡起關鍵作用的microRNA。研究結果發布在5月18日的《自然醫學》（Nature Medicine）雜志上。 糖尿病是現代社會的重要禍患之一，糖尿病病例每年都在上升。全球已有超過3.8
miRNA海綿—長效抑制miRNA
隨著研究的深入，已知miRNA的數量與日俱增，目前Sanger miRBase數據庫中收錄的人miRNA已達721條。不過，大部分miRNA的功能仍是未知數。在基因功能研究中，最有效的方法是阻止特定基因的功能，然后了解其后果。miRNA同樣如此。然而，相比之下，miRNA的功能研究要困難得多。為什么
miRNA海綿—長效抑制miRNA
miRNA海綿隨著研究的深入，已知miRNA的數量與日俱增，目前Sanger miRBase數據庫中收錄的人miRNA已達721條。不過，大部分miRNA的功能仍是未知數。在基因功能研究中，最有效的方法是阻止特定基因的功能，然后了解其后果。miRNA同樣如此。然而，相比之下，miRNA的功能研究要困
檢測循環腫瘤細胞中miRNA的新技術
越來越多的證據表明，循環腫瘤細胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預后的潛力。然而，檢測卻并非易事。近日，西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法，能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。 CTC是從原發性腫瘤脫落，然后進入循環系統的一種細胞。它們到達其他的
干細胞牛人Nature聚焦抑癌miRNA家族
來自波士頓兒童醫院、德國科隆大學醫院等機構的研究人員證實，在神經母細胞瘤中多種機制破壞了let-7 microRNA家族。這一重要的研究發現發布在7月6日的《自然》（Nature）雜志上。 領導這一研究的是國際著名干細胞專家，美國血液腫瘤學Samuel E.Lux IV 教授，波士頓兒童醫院干
miRNA研究
一、miRNA研究的基本問題和研究方法二、miRNA研究的綜合解決方案1. miRNA微陣列芯片服務Agilent miRNA 芯片（21.0）?Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA測序服務??miRNA-seq文庫構建流程??miRNA測序數據分析流程3. miRNA R
miRNA功能分析的五點建議
隨著microRNA(miRNA)研究的深入，很多人開始從miRNA的發現轉入功能分析。miRNA抑制是一種確定miRNA功能的強大技術。如何開展，需要注意些什么?Exiqon公司的專家給出了五點建議。 1. 選擇合適的抑制劑 若希望miRNA功能分析成功，首先要選擇一個最適合您實驗
上海交大研究組：癌細胞分化與miRNA
來自上海交通大學醫學院細胞分化與凋亡教育部重點實驗室的研究人員發現了一種由HIF-1α 介導的，調控白血病細胞分化的新機制，這種作用因子能通過調控干擾細胞分化的miRNAs網絡行駛功能，這將有助于解析急性髓系白血病AML細胞分化的機理。相關成果公布在Cell Death & Differ
Cell－Reports：外泌體miRNA如何影響細胞通訊？
2013年，美國、德國3位科學家憑借他們所發現的細胞囊泡運輸的調節機制，榮獲2013年諾貝爾生理學或醫學獎。外泌體（exosomes）作為人體內一類重要囊泡，也開始受到越來越多的關注。科學家們已發現，外泌體會參與到免疫應答、凋亡、血管生成、炎癥反應、凝結等重要的生物過程中，細胞會通過分泌外泌體，
RNA實驗方案和應用（二）
miRNA?模擬物是化學合成的，雙鏈RNA分子（通常長度為18–24個核苷酸），通過轉染到細胞中，模擬成熟的內源性miRNA分子。miRNA抑制劑是單鏈（通常長度為21–25個核苷酸），經過修飾的RNA分子，通過轉染到細胞中，特異性的抑制miRNA的功能。模擬物和抑制劑包含一些化學修飾，以便提高活性
miRNA－－克隆實驗
實驗方法原理 在細胞中表達的 RNA 除了我們所熟悉的 mRNA 以外，還有大量不編碼蛋白質的非編碼 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非編碼 RNA 在細胞中起著非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 維持著基因的表達，還有一部分則起著調控基因表達的作用。實驗材料 寡核
miRNA克隆實驗
在細胞中表達的 RNA 除了我們所熟悉的 mRNA 以外，還有大量不編碼蛋白質的非編碼 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非編碼 RNA 在細胞中起著非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 維持著基因的表達，還有一部分則起著調控基因表達的作用。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主
miRNA克隆實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在細胞中表達的 RNA 除了我們所熟悉的 mRNA 以外，還有大量不編碼蛋白質的非編碼 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非編碼 RNA 在細胞中起著非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 維持著基因
什么是細胞因子抑制劑？
細胞因子抑制劑通常是指具有以下四種特征之一的一類異質性藥物。藥物通過以下方式抑制細胞因子合成，減少產生細胞因子的細胞數量，而不影響細胞生存能力。
活細胞評價細胞周期抑制劑——ImageXpress?－Micro
前言監測對細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。活細胞高內涵的篩選已被驗證可以區分細胞的每個周期。此技術結合BacMam轉染系統，可使細胞表達兩種細胞周期相關熒光融合蛋白。延時監測實驗持續2-3天，細胞置于ImageXpr
實時熒光定量PCR技術2
qRT-PCR基因表達分析在384孔板上11ul/孔的總反應體積中，使用熒光Universal ProbeLibrary（UPL）探針（羅氏公司）和ABI 7900HT 實時儀器（美國應用生物系統公司）以及2X FastStart Universal Probe Master （Rox）PCR試劑（
計生委：miRNA調控胚胎著床期的細胞凋亡
胚胎著床(Embryo Transfer，ET)是一個復雜的過程，也是受孕成功的基礎。已有研究報道胚胎著床過程中大鼠子宮多個mRNA出現差異表達，但是未見有關接受前期(pre-receptive)和接受期(receptive)大鼠子宮miRNA表達譜的報道，關鍵的轉錄后基因表達調控元件。為此
Science最新成果：一種能讓細胞“變身”的miRNA
在被無情剝奪這種miRNA之后，你一定不會相信干細胞竟然會發生這種改變，一項最新研究表明，通過去除單個微小RNA（miRNA），多能干細胞竟可以實現罕見的全能化，獲得分化成為胎盤等胚外組織的能力。這一研究極大程度上豐富了學術界對于細胞發育調控分子途徑的認識，可以幫助臨床醫生和科學家通過干細胞技
Science－Reports：檢測循環腫瘤細胞中miRNA的新技術
越來越多的證據表明，循環腫瘤細胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預后的潛力。然而，檢測卻并非易事。近日，西班牙的研究人員在 Science Reports上介紹了一種方法，能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。 CTC是從原發性腫瘤脫落，然后進入循環系統的一種細胞。它們到達
靶向細胞周期的miRNA抑制癌癥新發現
哈佛大學醫學院、Dana-Farber癌癥研究所Piotr Sicinski教授研究組與北京大學生命科學學院、北大-清華生命科學聯合中心、統計科學中心李程研究組合作，在《Cancer Cell》期刊發表了題為 “Cell-Cycle-Targeting MicroRNAs as Therapeu
miRNA與癌癥：了解它們之間的關聯
在腫瘤發生的經典模型中，癌癥通過慢慢積累突變、放任細胞增長而發生。許多這樣的突變影響關鍵的調控蛋白，如原癌基因和抑癌基因。不過，非編碼RNA基因的突變也同樣有害，尤其是microRNA。 microRNA（miRNA）是一類22個核苷酸的調控轉錄本。它們與mRNA靶點相結合，或抑制其翻譯，或誘
實時熒光定量PCR技術
通過實時熒光定量PCR技術實現對miRNA靶向物mRNAs的相對定量分析1 導言小RNA（miRNAs）是一種內源性非編碼蛋白的小分子RNA，它們是許多基礎的細胞過程中基因表達的主要調節因子，這些過程包括細胞增殖、細胞分化以及細胞凋亡等。miRNA在腫瘤生長過程中也發揮著重要作用。一般來說，miRN
根除癌癥干細胞的Wnt抑制劑
最近，一個團隊——包括日本國立癌癥中心（NCC）、日本理化學研究所生命科學技術中心（CLST）和日本Carna生物科學公司聯合宣布，他們開發了一個新的小分子Wnt抑制劑，命名為NCB-0846。Wnt信號是癌癥干細胞（CSC）發展的一條關鍵的通路。該抑制劑可為藥物難治性大腸癌患者，提供一種新的治
細胞因子抑制劑的功能介紹
依維莫司是由諾華公司最先研制開發的一種哺乳動物雷帕霉素靶蛋白抑制劑，臨床上主要用于預防腎移植和心臟移植手術后的排異反應，2003年依維莫司在歐洲被批準用于治療器官移植后排異反應并推向市場。依維莫司是西羅莫司衍生物，有效地用于預防器官移植排斥反應。其抗增殖和免疫抑制作用是通過與免疫結合蛋白形成復合物，
幾種常見的細胞因子抑制劑
● 抗細胞因子或其受體的抗體在正常人身上可以檢測到微量的抗細胞因子抗體。這些抗體的功能還有待進一步探索。其中有些抗體可以起到抑制細胞因子的作用，有些抗體則可以延長細胞因子的半衰期。用細胞因子或其受體作為免疫原對動物進行免疫而獲得的抗體，特別是某些單克隆抗體對細胞因子有很強的抑制作用，可用于治療由細胞
mirna－pcr電泳多久
一般是根據PCR產物大小和所用電壓來決定時間的吧一般溴酚藍跑到膠的1/3處就可以了。電壓大，就時間短，第一次跑，還是在邊上觀察著點吧，分子小，時間不長的。
MicroRNA（miRNA）的概念
MicroRNA（miRNA）：是含有莖環結構的miRNA前體，經過Dicer加工之后的一類非編碼的小RNA分子（~21-23個核苷酸）。MiRNA，以及miRISCs（RNA-蛋白質復合物）在動物和植物中廣泛表達。因之具有破壞目標特異性基因的轉錄產物或者誘導翻譯抑制的功能，miRNA被認為在調控發